- •1. Техника безопасности.
- •2. Бактериологическая лаборатория.
- •3. Устройство микроскопа
- •4, Основные формы бактерий.
- •5. Бактериологические краски.
- •6. Приготовление бакпрепаратов (мазков).
- •7. Простые и сложные методы окрашивания.
- •8. Окраска спор, капсул бактерий, методы определения подвижности бактерий
- •9. Изучение морфологии грибов и актиномицетов
- •10. Лабораторная аппаратура
- •11. Приготовление питательных сред
- •12. Предмет, история развития. Задачи и основные направления науки
- •13. Морфология микробов
- •14. Строение микробной клетки и физиология микробов
- •15. Генетика микроорганизмов
4, Основные формы бактерий.
Микробы делят на 4 группы:
1.Шаровидные формы (кокки) – имеют вид шара, 1 мкм в диаметре. Подразделяют на следующие виды:
- Микрококки расположены беспорядочно. В диаметре не превышают 0,5 мкм;
- Стафилококки образуют беспорядочные скопления клеток, напоминающие гроздь, делятся в обычных направлениях без особой закономерности
- Стрептококки расположены длинными цепочками, деление происходит в одной плоскости и образующиеся клетки не разъединяются;
- Диплококки расположены по две клетки, делятся в одной плоскости;
- Тетракокки располагаются по четыре, деление происходит в двух взаимно перпендикулярных плоскостях
- Сарцины кокки, группирующиеся по 8 клеток, располагаются в виде пакетов, куба, с каждой стороны которого по 4 клетки; получаются в результате деления клетки в 3-х взаимно перпендикулярных плоскостях
2. Палочковидные формы делят на бактерии (не образуют спор) –возбудитель туберкулеза, бациллы (диаметр споры меньше диаметра клетки и клостридии (диаметр споры больше диаметра клетки
3.Извитые формы делят на вибрионы (в виде запятой) возбудитель холеры; спириллы (микроорганизмы с несколькими крупными завитками)
4.Переходные формы имеют родство с несколькими, микобактерии, коккобактерии.
Величину микроорганизмов измеряют в микрометрах (мкм). Размеры микробов могут колебаться в значительных пределах – от 150 мкм (гиганты) - кристиспиры (свободно живущие в сточных водах и открытых водоемах), 10- 12 мкм – крупные (лептоспиры, клостридии), 2-3 мкм – средние (молочнокислые бактерии) и до 0,5 мкм – мелкие (бруцеллы).
Располагаться в мазке микробы могут разнообразно: беспорядочно(«россыпью»), кучками, скоплениями, длинными нитями, цепочками, в виде летящей чайки и т.д.
5. Бактериологические краски.
В микробиологической практике для окрашивания мазков используют анилиновые краски. Различают основные и кислые красители.
У основных красителей ионом,придающим бактериальной клетке окраску, служит катион, у кислых - анион. Клеточные структуры бактерий, взаимодействующие с красителем, заряжены преимущественно отрицательно и поэтому лучше воспринимают основные красители, к которым относятся:
-фиолетовые (генцианвиолет; кристаллический фиолетовый);
-красные (основной фуксин, сафранин);
-синие (метиленовая синь);
-зелёные (малахитовый зеленый).
Все краски представляют собой аморфные порошки или кристаллы. Анилиновые краски плохо растворяются в воде, поэтому вначале готовят на-
сыщенные спиртовые растворы красок (1:10),из которых затем получают рабочие водные растворы.
В бактериологической практике чаще применяют следующие краски:
-щелочная метиленовая синь (синька Леффлера) - применяется для простого метода окрашивания, она всегда должна находиться на столе у бактериолога;
-карболовый основной фуксин Циля - концентрированная краска, хранится долгое время; применяется при окрашивании трудно прокрашивающихся бактерий, таких как возбудитель туберкулеза, споры бактерий;
-разведенный фуксин (фуксин Пфейффера) –это фуксин Циля, разведенный дистиллированной водой 1:10; применяется для простого метода окрашивания или как один из компонентов окраски по Граму, краску готовят перед применением и используют в течение одного рабочего дня;
-карболовый генцианвиолет используют как основной краситель при окраске по Граму, в модификации по Синеву чаще применяют в виде кусочков фильтровальной бумаги, пропитанных краской и высушенных;
-раствор малахитовой зелени (1 % водный), применяемый при окраске бруцелл по Козловскому, при окраске спор.
Из насыщенных спиртовых растворов готовят спиртоводные растворы. Водные растворы готовят непосредственно перед применением,т.к. они разлагаются на свету. Для усиления действия красителя к нему добавляют протравляющее вещество.Это либо добавление в растворы красок фенола или едкого калия,либо обработка препарата перед окрашиванием слабыми растворами соляной, серной или хромовой кислот, либо прогревание препарата с нанесенной на него краской над пламенем горелки в течение нескольких секунд.