1. Микроскопирование – окраска по Граму, грамположительные большие прямые палочки с закругленными концами, располагающиеся одиночно, небольшими группами или в виде коротких цепочек.

2. Биохимические свойства –

среды с сахарами ферментирует с образованием газа и кислоты глюкозу, левулезу, мальтозу, глицерин, декстрин, салицин, адонит, инозит и не разлагает галактозу, сахарозу, дульцит, маннит, арабинозу и рамнозу.

Бактерии сероваров А и В обладают высокой протеолитической активностью: полностью переваривают кусочки печени и мышц в жидких средах; у серовара F протеолитические свойства выражены слабее и минимальны у сероваров С, D и Е.

3. Экзотоксин – определяется реакциями: преципитации; нейтрализации на биологическом объекте (мыши); ИФА; реакция Бойдена – РНГА с эритроцитами, нагруженными моновалентными антитоксическими противоботулиническими сыворотками типов А, В, Е.

4. Антигенная характеристика –

Выделяют 7 антигенных вариантов возбудителя ботулизма (A, D, C, D, E, F, G). Специфичность каждого варианта выявляют в реакции с антитоксическими сыворотками. В вегетативных клетках возбудителя ботулизма выявляют соматический О-антиген и жгутиковый Н-антиген. Эти антигены идентифицируются в реакции агглютинации. Соматический О-антиген является групповым, общим для протеолитических штаммов С. botulinum сероваров А и В. Жгутиковый Н-антиген является типоспецифическим. Он идентичен у бактерий, различающихся по варианту экзотоксинов.

5. Чувствительность к антибиотикам – диско-диффузионным методом

Заключение

Возможна так же экспресс диагностика с помощью РНГА с антительными эритроцитарными диагностикумами для обнаружения ботулотоксина в исследуемом материале. Диагностический титр 1к 10

10. В стационар поступил пациент с диагнозом «Острое респираторное заболевание». Какими микробиологическими методами можно уточнить этиологию заболевания?

ОРЗ могут быть вызваны бактериями или вирусами

Наиболее простым способом для дифференциации возбудителя является биологический механизм реакции гемагглютинации (РГА)

В основе РГА лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных антигенов. 

Материалом для исследования является смыв из носоглотки

В качестве диагностикума можно взять эритроциты кур, уток, баранов, первой группы крови человека.

Реакция проводится на планшетке, куда капается 2% взвесь эритроцитов и смыв из носоглотки больного, смесь оставляют на 2 часа в термостате при температуре 37 градусов, далее планшетку оставляют при комнатной температуре на 18-20 часов

Если агглютинация эритроцитов выглядит как ровный осадок, можно говорить о бактериальной этиологии ОРЗ, так как бактерии не имеют рецепторов к эритроцитам

В случае если агглютинация эритроцитов имеет форму звезчатого осадка, этиология заболевания вирусная, так как все вирусы имеют рецепторы к эритроцитам некоторых групп крови, в том числе к 1 группе крови

Кроме РГА так же можно использовать заражением культуры клеток, или животных

11. В инфекционную больницу поступил пациент с диагнозом «дифтерия»(?). Составить алгоритм микробиологического исследования биоматериала для уточнения этиологии заболевания.

При подозрении на дифтерию используют микроскопический метод, который в данном случае является дифференцировочным.

Окраска по Леффлеру, Нейсеру - строго биполярное расположение зерен валютина, расположение палочек под углом друг к другу буквой V.

Бактериологический метод –

1. Посев производят на кровяно-теллуритовых средах (КТА) а, а затем ставят в термостат при 37 °С.

Колонии, выросшие на чашках, просматривают через 24 ч после посева материала