7. На прибывшем в порт судне обнаружены трупы грызунов. Наметить план микробиологической индикации возбудителя.

Предполагаемый возбудитель Y.pestis

Для микробиологической диагностики используют бактериоскопический, бактериологический и серологический методы исследования

Материал для исследования – трупный материал

1) Микроскопический метод исследования - окраска по Граму, биполярно ок­рашенные грамотрицательные овоидные клетки

2) Бактериологический метод:

А) Посев на МПБ, кровяной МПА с антифаговой сывороткой и сульфатом натрия. Инкубирование 48 часов при 25-28С. Образуются колонии в R-форме, которые имеют форму «кружевных платочков», со светлым центром(плотный,компактный) и фестончатыми краями.

Пресев культуры на скошенный МПА для накопления чистой культуры.

Б) Идентификация

Микроскопирование – окраска по Граму, биполярно ок­рашенные грамотрицательные овоидные клетки

Биохимические свойства – восстанав­ливает нитраты в нитриты, ферментирует глюкозу, ксилозу, маннит с образованием кисло­ты (без газа), не обладают уреазной активностью, плазмокоагулаза положительна, не разжижает желатин.

Фаготипирование – провести невозможно

Экзотоксин – Мышиный токсин, определяется реакциями: преципитации, нейтрализации на биологическом объекте (мыши).

Антигенная характеристика –. Имеет термостабильные 0-антигены и термолабильные капсульные антигены. Протективной активностью обладает F1-антиген. Т-антиген (мышиный токсин).

Чувствительность к антибиотикам – метод серийных разведений в бульоне и методом HiComb MIC-Test (HiMedia, Индия) изучена чувствительность к стрептомицину, хлорамфениколу, эритромицину, гентамицину, ципрофлоксацину, рифампицину, азитромицину.

Диско-диффузионный метод

В) На основе полученных данных делается заключение.

3) Серологическое исследования: РНГА с эритроцитами, на которых адсорбирован капсульный антиген возбудителя чумы, реакцию нейт­рализации антигена (РНАг), ИФА и непрямую РИФ. Диагностический титр 1:40 и выше

4) Экспресс-диагностика – РИФ, позволяет получить результат через 2 часа.

8. В хирургическое отделение поступил пациент с травмой правой голени. Мягкие ткани голени размозжены, загрязнены землей. Составить алгоритм микробиологического исследования биоматериала.

В данной ситуации мы предполагаем загрязнение раны пациента бактериями рода Clostridium.

Для диагностики применяют бактериоскопический, бактериологический и биологический методы.

Материал для исследования – раневое содержимое

Бактериоскопический – окраска по Граму, грамположительные большие прямые палочки с закругленными концами, располагающиеся одиночно, небольшими группами или в виде коротких цепочек. 

Окраска по Бурри-Гинсу для выявления капсулы – вокруг красных палочек бесцветная капсула

Бактериологический метод:

1. Накопление микроорганизмов – посев на среды Китта-Тароции в 2 пробирках. Одну пробирку необходимо нагреть до 80С в течение 20 минут (нагревание необходимо, чтобы убить вегетативные формы). Инкубирование 2 суток при 37С в термостате.

2. Культуру пересеивают на кровяной агар.

I. Культивирование Cl.Tetani. Перед посевом одну половину чашки необходимо смочить противостолбнячим антитоксином.

Инкубируют при 37С 24 часа.

На кровяном агаре без антитоксической сыворотки вырастают прозрачные колонии в виде капелек росы с зоной гемолиза. На кровяном агаре с антитоксической сывороткой гемолиз не наблюдается (нейтрализация антитоксином).

II. Культивирование C. perfrinqens

Идентификация:

1. Микроскопирование – окраска по Граму, грамположительные большие прямые палочки с закругленными концами, располагающиеся одиночно, небольшими группами или в виде коротких цепочек.