Модификация метода

Если жидкая фаза культуры макрофагов (моноцитов) должна анализироваться при помощи культуры антителообразующих спленоцитов, макрофаги желательно культивировать в той же среде, что и спленоциты (см. раздел "Образование антител культурами клеток"). Иногда возникает необходимость получать большие количества макрофагов, например для изготовления антимакрофагальной сыворотки. В этих случаях суспензию макрофагов (1—2х10⁶ клеток/мл) разливают по 10 мл в чашки Петри диаметром 12 см. В культуральной среде можно при этом заменить добавку 10% сыворотки эмбрионов коров и 20% инактивированной лошадиной сыворотки. Обработку культур проводят как описано выше. Культивирование осуществляют в течение 3—4 дней с ежедневной сменой среды. Образующиеся монослои более чем на 99% состоят из макрофагов. Макрофаги осторожно отделяют от дна чашки стеклянной палочкой, на которую надет кусок мягкого пластикового шланга, выступающий за конец палочки на 10 мм.

Для гистологических или гистохимических исследований рекомендуется культивировать клетки на стеклянных пластинах. Для этой цели одну каплю суспензии клеток наносят на стеклянные пластины, которые инкубируют 1 ч во влажной камере. Неадгезировавшие клетки смывают раствором Хенкса и пластинки помещают в чашки Петри с культуральной средой. Поверхность пластин должна быть покрыта культуральной средой. По окончании культивирования стеклянные пластины отмывают изотоническим буфером, фиксируют клетки любым подходящим способом и окрашивают соответствующим красителем.