124. Методы обогащения исследуемого материала при мб диагностике туберкулеза.

Для более быстрого выделения возбудителя туберкулеза предложен метод микрокультур Прайса.. На нескольких предметных стеклах (ближе к одному концу) делают толстые мазки из исследуемого материала. Мазки высушивают, обрабатывают несколько минут 2—6% серной кислотой , стекло помещают в цитратную лизированную кровь и инкубируют при температуре 37 "С. Уже через 3— 4 сут. рост микобактерий на стекле проявляется в виде микроколоний, которые к 7—14-му дню достигают максимального развития, а микобактерии хорошо выявляются при микроскопии. извлекают стекла, фиксируют препарат, окрашивают по Цилю — Нельсону и микроскопируют ,вирулентные штампы образуют микрокультуры, имеющие вид жгутов ( змеевидные колонии), а невирулентные растут в виде аморфных скоплений.

125. Бактериоскопическая диагностика туберкулеза.

Материал: гной, мокрота, моча и т.д.

Микроскопия

Окраска по Цилю-Нильсену

Методы обогащения

(осаждение, флотация)

Микроскопия

Окраска по Цилю-Нильсену

Метод люминесцентной микроскопии

(аурамин, аурамин-родамин)

Мокроту помещают в чашки Петри и ставят на черную поверхность. Петлей или препаровальными иглами выбирают гнойный комочек, переносят его на предметное стекло ближе к одному из концов и, растирая между двумя стеклами, готовят мазок. Ликвор отстаивают в холодильнике и готовят мазки из нежной пленки фибрина, в которой находятся микобактерий туберкулеза и клеточные элементы. Мочу центрифугируют и делают мазки из осадка. Препараты из мочи обязательно обесцвечивают не только кислотой, но и спиртом для дифференциации микобактерий туберкулеза от М. smegmatis, которые могут находиться в моче здоровых людей. В отличие от микобактерий туберкулеза они обесцвечиваются спиртом.

Мазки окрашивают по Цилю — Нельсену и микроскопируют, просматривая до 100 полей зрения в препарате. Микобактерий туберкулеза окрашиваются в ярко-красный цвет, располагаются поодиночке или небольшими скоплениями .Единичные бактерии можно обнаружить в препарате, если их содержание не менее 10s в 1 мл мокроты. Поэтому при небольшом содержании микобактерий туберкулеза в материале применяют методы «обогащения» — гомогенизации и осаждения или флотации.