- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
II. Специфичность нейраминидазы
Gottschalk (1957), Blix и соавт. (1957) установили, что фермент, входящий в состав вирионов гриппа, гидролизует гликозидную связь, соединяющую кетогруппу N-ацетилнейр-аминовой кислоты (NANA) с Ь-галактозой, D-галактозами-ном или, возможно, с другими сахарами. За ферментом утвердилось название «нейраминидаза» — NA (Gottschalk, 1957). Кроме того, для обозначения фермента часто употребляется термин «сиалидаза». Эти названия являются отражением того, что фермент отщепляет вещество, которое называют либо нейраминовой, либо сиаловой кислотой (Heimer, Meyer, 1956). Номенклатурное название нейраминидазы, согласно «Номенклатуре ферментов» (1965),—мукополисаха-рид Ы-ацетилнейраминилгидролаза, ЕС 3.2.1.18. Фермент гидролизует связь между терминальной сиаловой кислотой и соединенной с ней с помощью а-связи молекулой сахара. Обзоры работ по изучению свойств бактериальных и вирусных нейраминидаз были опубликованы Drzeniek (1972, 1973), а также Gottschalk и Drzeniek (1972).
В природных нейраминовых .кислотах аминогруппа при углеродном атоме Cs всегда замещена на N-ацетил- или на
N-гликолильную группу, а гидраксильная группа (группы) иногда О-ацетилирована (Blix et al., 1957; Gottschalk, 1960). О-ацетильные группы замещают тидроксилы в положении 4, 7 или 8 и легко отщепляются после обработки разбавленными щелочами или кислотами. У большинства животных N-ацетил- и N-гликолилнейраминовые кислоты существуют в одно и то же время, причем отношение их содержания различно для разных видов животных и для разных тканей и секреторных выделений в случае одного вида (Gottschalk,. I960). Специфичность нейраминидазы зависит от вида заместителя при атоме азота в сиаловой кислоте субстрата; N-ацетильная форма расщепляется нейраминидазой вируса гриппа с гораздо большей скоростью, чем N-гликолилнейр-аминовая кислота (Flockton, Hobson, 1970). Было показано,, иго нейраминидаза вируса гриппа является высокоспецифичным ферментом и что ее специфичность отличается от специфичности бактериальных нейраминидаз (Drzeniek, 1972). Используя синтетические производные нейраминовых кислот, Meindl и Тирру (1966а) показали, что для того, чтобы гид-ролизовать субстрат с помощью нейраминидазы, абсолютно необходимо присутствие свободной карбоксильной группы. Замещение N-ацетильной группы более объемными группами, такими, как бензоильная, бутильная или бензилоксикарбо-нильная, превращает нейраминсодержащий субстрат в устойчивое соединение для гидролиза бактериальными нейрами-нидазами (Meindl, Tuppy, 1966; Faillard et al., 1969). Чувствительность субстратов к гидролизу вирусными нейрамини-дазами значительно снижается после окислительного отщепления от молекулы нейраминовой .кислоты углеродного атома Сэ или атомов Cs и Сд. Это указывает на высокую структурную специфичность действия нейраминидазы (Suttajit, Winz-ler, 1971).
Природа связи нейраминовой кислоты с углеводной частью (агликогон) также важна для специфичности действия нейраминидазы. Основываясь на результатах, полученных с использованием природных субстратов, в большинстве которых нейраминовая кислота связана с агликоном а-евязью, был сделан вывод, что нейраминидаза расщепляет только а-связи (Gottschalk, 1957, 1958; Kuhn, Brossmer, 1958). Используя синтетические субстраты, Meindl и Tuppy (1966a, b) показали, что фермент не отщепляет нейраминовые кислоты, присоединенные к агликону (З-связью. Строение атлвкояа, по-видимому, не играет существенной роли (Schauer, Faillard, 1968).
Углеродный атом С2 нейраминовой кислоты может быть соединен с углеродными атомами С3, С6 и, возможно, С4 галактозы, углеродным атомом С6 N-ацетилгалактозамина, углеродным атомом С6 ацетил^-глюкозамина или с Cg другой
молекулы нейраминовой кислоты (Drzeniek, 1973). Нейрами-новая .кислота всегда находится на конце цепи, если она не присоединена к другой молекуле нейраминовой кислоты связью (а, 2—*8) (Gottschalk, Drzeniek, 1972). Бактериальные нейраминидазы действуют преимущественно на а-кето-зидные связи, такие, как (а, 2—*3), (а, 2—>~4), ,а, 2——иб) и (а, 2—->-8), а вирусные нейраминидазы, такие, например, как нейраминидаза вируса болезни Ньюкасла и вируса чумы птиц (FPV), в основном гидролизуют связи 2—ьЗ (Drzeniek, 1967, 1972, 1973). Обе эти вирусные нейраминидазы относительно неактивны в отношении связей 2—Иг и 2—йЗ (Drzeniek, 1967; Huang, Orlich, 1972), а связь 2—>-8 расщепляет нейраминидаза FPV (Drzeniek, Gauhe, 1970).