- •I. Введение. Грипп — заболевание с неизменяющейся симптоматикой, вызываемое изменяющимся вирусом
- •II. Таксономия вирусов гриппа
- •IV. Структурное и функциональное родство вирусов гриппа с другими рнк-содержащими вирусами
- •V. Антигенная изменчивость вируса гриппа и ее отличие от антигенной изменчивости других инфекционных агентов
- •VI. Нерешенные вопросы
- •Структура вируса гриппа
- •I. Введение
- •1. Число и функции полипептидов
- •4. Нейраминидаза
- •5.Белок нуклеокапсида
- •7. Количество полипептидов в вирионе
- •8. Вирусы гриппа в и с
- •1. Гемагглютинин
- •2. Нейраминидаза
- •IV. Сборка вирионов
- •V. Заключение. Модель вириона гриппа
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Гемагглютинин
- •II. Реакция гемагглютинации
- •1. Количественное определение гемагглютинации
- •2. Гемадсорбция
- •3. Ингибирование гемагглютинации
- •III. Структура гемагглютинина
- •1. Химический состав изолированных гликопептидов
- •2. Антигенные свойства гликопептида hAt
- •4. Структура субъединицы на
- •5. Антигенная гомогенность субъединиц на
- •1. Моновалентный гемагглютинин
- •2. Агрегация и диссоциация моновалентного гемагглютинина
- •IV. Функции гемагглютинина
- •V. Заключение
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Нейраминидаза
- •II. Специфичность нейраминидазы
- •III. Субстраты для нейраминидазы
- •IV. Химические свойства нейраминидазы
- •V. Содержание нейраминидазы в оболочке вируса
- •1. Использование протеолитических ферментов
- •2. Использование детергентов
- •VI. Свойства изолированной нейраминидазы а. Состав аминокислот
- •VII. Структура нейраминидазы
- •VIII. Антигенные свойства нейраминидазы
- •IX. Лектины и нейраминидазы
- •X. Ингибиторы активности нейраминидазы
- •XI. Роль нейраминидазы
- •Биологически активные белки вируса гриппа. Активность транскриптазы в клетках и вирионах гриппа
- •I. Введение
- •II. Активность рнк-полимеразы в инфицированных клетках
- •IV. Заключение
- •Рибонуклеиновые кислоты вирусов гриппа
- •I. Введение
- •II. Методы
- •1. Экстракция рнк из вирионов
- •1. Анализ экстрагированной рнк с помощью градиентного центрифугирования
- •2. Анализ экстрагированной рнк с помощью электрофореза в полиакриламидном геле (паагэ)
- •IV. Комплекс рнк с белком (рнп) а. Физические и химические свойства
- •2, Созревание и упаковка рнк в вирионы
- •1. Внутриклеточная локализация вкРнк
- •2. Кинетика синтеза вкРнк
- •3. Физические свойства информационной рнк (мРнк)
- •VI. Действие ингибиторов на синтез рнк
- •VII. Заключение
- •Генетика вируса гриппа
- •I. Введение. Исторический обзор
- •1. Исследования по генетике, проведенные Burnet и сотрудниками
- •2. Исследования по генетике, проведенные Hirst и Gotlieb
- •II. Геном вируса гриппа
- •III. Мутации, изменчивость, адаптация
- •1. Модификация вирусных гликопротеидов
- •2. Модификация вирусной оболочки
- •3„ Модификации с помощью протеолитических ферментов
- •1964) Или к гуанидвнгидрохлориду (David-West, 1973) явля
- •2. Фенотипы, относящиеся к нейраминидазе
- •3. Морфология вириона
- •1. Чувствительность к клетке-хозяину
- •2. Патогенность
- •3. Механизм рекомбинации
- •10% От выхода вируса при разрешающей температуре. Шля1
- •V!. Фенотипическое смешение и гетерозигозис
- •VII. Изучение функции генов с помощью ts-мутантов
- •VIII. Заключение
- •Репликация вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Адсорбция, проникновение, «раздевание» вируса
- •III. Транскрипция а. Последовательность синтеза рнк
- •2. Циклогексимид
- •3. Глюкозамин
- •IV. Синтез вирусных белков
- •2. Белок нуклеокапсида
- •3. Неструктурные белки
- •4. Мембранный м-белок
- •5. Гемагглютинин
- •VI. Синтез липидов
- •VII. Сборка (см. Также гл. 2)
- •IX. Неправильные формы размножения
- •Культивирование вирусов гриппа человека в лабораторных условиях, круг хозяев среди лабораторных животных и выделение вируса из клинического материала
- •I. Введение
- •II. Культивирование вирусов в лабораторных условиях
- •1. Продуктивная инфекция
- •2. Абортивная инфекция
- •3. Персистентная инфекция
- •4. Параметры инфекции
- •IV. Выделение вируса
- •Антигенная изменчивость вируса гриппа
- •I. Введение
- •II. Грипп в историческом аспекте (см. Также гл. 15)
- •III. Свойства генома вируса гриппа
- •IV. Субъединицы гемагглютинина
- •V. Механизм антигенного дрейфа
- •1955, 1956; Magill, 1955; Hamre et al., 1958). Эпидемиологиче
- •1956, 1957; Takatsy, Furesz, 1957), антигены постепенно за
- •VI. Механизм антигенных сдвигов (значительных антигенных изменении)
- •VII. Дополнительные доказательства,
- •2. Естественная передача вируса и селекция
- •3. Селекция и передача «нового» вируса гриппа в системе in vivo
- •1. Антигенные соотношения между вирусами гриппа человека, низших млекопитающих и птиц
- •2. Круг хозяев
- •Иммунология гриппа
- •I. Введение
- •II. Проявления иммунитета
- •1. Устойчивость к инфекции
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •2. Изменение заболевания
- •3. Передача вируса
- •4. Механизм действия антител к na
- •V. Влияние антигенного дрейфа на иммунитет
- •VII. «первородный антигенный грех»
- •VIII. Клеточный иммунитет и грипп
- •IX. Заключение
- •Грипп у человека
- •2. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа а
- •3. Инфекция, вызываемая вирусом гриппа в
- •7. Изменения бактериальной флоры
- •8. Функция легких при неосложненном гриппе
- •9. Выделение больными вируса в окружающую среду
- •10. Интерферон
- •11. Продукция антител
- •1. Пневмония
- •2. Острые заболевания нижних дыхательных путей у детей
- •3. Обострение хронического бронхита
- •III. Экспериментальная гриппозная инфекция у человека
- •3. Продукция интерферона при заболевании
- •IV. Выводы и заключение
2. Антигенные свойства гликопептида hAt
Поскольку (гликопептид HAi гемагглютинина ориентирован так, что находится в водной фазе, окружающей вирион, можно ожидать, что именно он должен содержать область (или области), которая взаимодействует с эритроцитами, клетками-хозяевами, растворимыми ингибиторами и антителами. Информация об этом в настоящее время еще недостаточна. Однако из штамма PR8 (НОШ) был изолирован ге-магглютининсвязывающий антиген (НАВА), вероятно, представляющий собой димер гликопептида HAi (Eckert, 1966, 1969, 1973). Это молекулярное образование не обладало ге-малглютинирующими свойствами, но реагировало с антителами, специфичными для вирусного гемагглютинина. При обработке детергентом и дитиотриэтолом антиген диссоциировал на фрагменты с молекулярной массой около 40 000. Антиген количественно удалял HI-антитела из иммунной сыворотки, приготовленной против целого вируса. Он, кроме того, индуцировал образование HI- и нейтрализующих антител. Состав аминокислот ,НАВА сходен с таковым гликопептида НАЬ выделенного из штамма АО/Bel. Однако, как уже указывалось, HAi и НА2, выделенные из штамма Bel, сходны по составу аминокислот (исключая содержание .пролина), и их отличие может быть выяснено только с помощью методов определения последовательности аминокислот.
Эксперименты, проведенные Brand и Skehel (1972), также указывают, что HAi может содержать антигенные детерминанты, индуцирующие образование специфических против гемагглютинина антител. Полученный с помощью обработки бромелайном кристаллический гематглютинин давал одну полосу преципитации с антисывороткой против целого вируса или против HAj. Линия преципитации в реакции с антисывороткой против НА2 'наблюдалась только после добавления -к кристаллическому сгемагглютинину восстанавливающих агентов. Эти факты указывают на то, что функциональный антигенный центр интактного гемагглютинина локализован на гликопептиде НАЬ а дополнительный центр, расположенный на НА2, обнажается только после диссоциации HAi и НА2. Однако недавно было обнаружено, что каждая субъединица гемагглютинина содержит несколько антигенных детерминантов и что один из них теряется при выделении гемагглютинина с помощью обработки бромелайном (Laver et al., 1974; см. также гл. 10). Некоторые антигенные центры, вероятно, локализованы полностью на НАЬ в то время как другие могут частично или полностью включать участки гликопептида НА2. Воздействие расщепления субъединицы НА на антигенную активность этих центров еще предстоит изучить.
Субъединицы НА, изолированные из разрушенного с помощью детергента вируса, обладают гидрофобными свойствами. Например, удаление детергента из препарата разрушенного вируса приводит к образованию больших по размерам агрегатов, обладающих гематглютинирующей активностью. Вероятно, за эту способность субъединицы НА и агрегации ответствен гликопептид НА2. После отделения от HAi с помощью детергентов и восстанавливающих агентов молекулы НА2 образуют агрегаты даже в присутствии гуани-дингидрохлорида и дитиотриэтола (Laver, 1971). Однако субъединицы НА, экстрагированные из вирусной частицы с помощью бромелайна, не агрегируют (Laver, 1973). Такие субъединицы не обладают способностью агглютинировать эритроциты, но реагируют с антисывороткой против гемагглютинина, « выделенного из того же штамма с помощью SDS. Субъединицы содержат гликопептид НА2, молекулярная масса которого на 5000 меньше молекулярной массы аналогичного гликопептида, полученного из гемагглютинина при разрушении вируса с помощью детергента. Таким образом, при обработке бромелайном, вероятно, от НА2 отщепляется гидрофобная область, ответственная за способность субъединиц НА агрегировать в растворе.
Ранее Laver (1973) установил, что аминокислоты, включенные в гидрофобную область НА2, должны быть локализованы на одном (или обоих) конце молекулы, поскольку удаление этой области не приводит к деградации НА2 до фрагментов с малой молекулярной массой.
Совсем недавно Skehel и Waterfield (1975) показали, что обычный :и модифицированный с помощью брамелайна НА2 имеет идентичную последовательность аминокислот на N-KOH-це молекулы. Поэтому аминокислоты, отщепляемые броме-лайном, должны локализоваться на С-конце полипептида НА2. Эта часть НА2 длиной около 50 аминокислотных остатков содержит около половины всех остатков серина, входящих в эту молекулу. Считается, что приблизительно 21 аминокислотный остаток из 50 обладает гидрофобными свойствами.