biotechnology-2012-03
.pdfМетоды работы с ДНК
ПЦР
Рестрикция
Рестрикция ДНК
- Разрезание молекулы ДНК в определенной последовательности
Рестриктазы
1.Узнают определенные последовательности в ДНК
2.Разрезают молекулу ДНК в определенных местах
Рестрикция ДНК
Рестриктазы |
Type IIR |
(обнаружено несколько тысяч)
Образуются «липкие» или «тупые» концы
Рестриктазы Type II
Еще есть Type I и Type III
Частота встречаемости сайтов рестрикции
RsaI (four-base cutter)
EcoRI (six-base cutter)
NotI (eight-base cutter)
Рестрикционные карты
Подходы к изучению специфичных
последовательностей ДНК
Синтез ДНК in vitro
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Polymerase chain reaction (PCR)
– метод, позволяющий избирательно синтезировать большие количества определённых фрагментов ДНК
•«Полимеразная» - используется фермент ДНКполимераза
•«Цепная» - состоит из повторяющихся циклов, количество ДНК с каждым циклом увеличивается в геометрической прогрессии
1983 г, Кэри Муллис