Тема № 7. Методы определения молока от коров больных маститом.

Цель занятия:

1. Провести микроскопическое исследование различных проб молока.

2. Поставить каталазную, лейкоцитную, бромтимоловые пробы и пробу отстаивания по Мутовину, пробу со щелочью.

3. Провести анализ полученных данных и занести в протокол.

Оборудование и материалы:

Пробы молока, центрифужные пробирки, центрифуга, предметные стекла, наборы красителей для окраски по Граму, биологические микроскопы, каталазник, 1% раствор перекиси водорода, водяная баня, градуированные центрифужные про­бирки, 1% водный раствор метиленовой синьки, 0,2% раствор бромтимолового си­него в 60% спирте, пробирки бактериологические, 1 Н раствор NaOH.

Методика проведения занятия и методические указания по теме:

1. Объяснение преподавателя: характеристика основных возбудителей мас­тита, методы определения молока от маститных коров.

2. Самостоятельная работа студентов в соответствии с заданиями.

Возбудителями воспалительного процесса вымени могут быть различные микроорганизмы, в результате действия которых секреция молока отклоняется от нормы и реакция молока из слабокислой переходит в щелочную.

Молоко становится солено-горьким, в нем появляются хлопья или тянущиеся нити. Позднее выделяется гнойная жидкость, иногда неприятным запахом.

Наиболее опасное поражение вымени вызывают патогенные стрептококки -Sir. mastitidis, Str. agalactiae и стафилококки -Staph. aureus.

Молоко от маститных коров непригодно для молочной промышленности, кроме того, оно может быть источником пищевых токсикозов у потребителей.

При субклиническом течении мастита у коров, молоко почти не отличается от нормального. Поэтому применяют специальные методы определения молока от маститных коров.

Микроскопическое исследование молока:

пробы разливают в центрифужные пробирки, уравновешивают, центрифугируют при 3000 оборотах 10-15 минут, из осадка готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют и делают заключение о наличии стафилококков и стрептококков.

Для распознавания маститного молока:

1. Проводят микроскопическое и бактериологическое исследование.

2. Ставят специальные пробы /каталазную, лейкоцитную, бромтимоловую, отстаивания /пробу Мутовина/ и пробу со щелочью/.

Каталазная проба:

В каталазник вносят 15 мл молока, подогретого до 25°С и 5 мл 1% раствора перекиси водорода. Жидкость перемешивают и внутреннюю трубку катаказника вставляют так, чтобы уровень жидкости был на нулевом делении. Каталазник ста-вят на водяную баню при температуре 25°С на 2 часа. Затем отсчитывают высоту

уровня жидкости, которая соответствует объему выделившегося кислорода. При выделении свыше 2 мл кислорода молоко считается подозрительным на мастит.

Лейкоцитная проба:

В ценрифужные градуированные пробирки вносят по 10 мл молока от каждой пробы и центрифугируют 5 минут при 1500 оборотах. При наличии в пробирке

осадка, достигающего делений 0,5-1 молоко считается подозрительным, наличие осадка, достигают делений 1-2, указывает на то, что молоко получено от маститных коров.

При микроскопировании осадка обнаруживается большое количество многоядерных лейкоцитов и стрептококков.

Бромтимоловая проба:

В углублениях на фарфоровой пластинке 5 капель молока смешивают с 1 ка-плей 0,2% раствора бромтимолового синего в 60° спирте. Молоко, полученное от здоровых коров окрашивается в желтый цвет /рН - 6,3-6,5/, от маститных - в зеле­ный /рН - 6,5-7,0/, и даже в синий /рН - 7,0-7,5/.

При тяжелых формах мастита реакция молока может быть кислой и оно ок­рашивается в желтый цвет.

Проба отстаивания /проба Мутовина/:

Из каждого соска /каждой доли вымени/ выдаивают 10-15 мл молока в пробирки и оставляют их в штативе при температура 4-8°С. Пробирки просматривают через 2-3 часа и вторично - через 16-24 часа. При этом определяют цвет молока, наличие осадка, примесей, высоту слоя сливок и их внешний вид.

Маститное молоко бывает синеватым, водянистым. Слой сливок менее 0,5 мм указывает на заболевание. Признаком заболевания является также розовый цвет сливок /наличие в них эритроцитов/. Хлопья указывают на большое количество лейкоцитов.

Проба с щелочью:

На предметное стекло наносят 5 капель молока и добавляют 2 капли 1Н раствора NaOH и смешивают в течение 20 секунд. Если молоко доброкачественное, образуется прозрачная смесь, если маститное - наблюдаются хлопья и нити.

ТЕМА № 8. САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ ОБОРУДОВАНИЯ, ИНВЕНТАРЯ, ТАРЫ И РУК РАБОТНИКОВ. Цель занятия: освоить методы санитарно-бактериологического контроля технического оборудования, инвентаря, тары и рук работников предприятий.

Оборудования и материалы: Стерильные чашки Петри, МПА в колбах, среда Эндо в колбах, пробирки со стерильным физ раствором, стерильные ватные тампоны, пипетки градуированные на 1, 2, 5 мл, спирт этиловый, трафареты металлические (1 кв. см. и 5 кв. см..), предметные стекла, бактериологические петли, пинцеты, микроскопы биологические, иммерсионное масло, стерильная водопроводная вода в пробирках по 9 мл, наборы реактивов для окраски по Граму. В целях санитарного надзора объектов молочной промышленности проводится бактериологическое обследование технологического оборудования, молочной посуды, тары и рук работников предприятий. Приготовление смывов: При взятии смывов пользуются стерильными ватными тампонами, которые перед употреблением смачивают в среде Кесслера или стерильном физ растворе. Смывы делают с обеих рук, тщательно протирая ладони, межпальцевые промежутки и подногтевые пространства. Смывы с поверхности оборудования и предметов делают с помощью трафаретов площадью 1 и 5 см.² из нержавеющего металла. Перед взятием пробы трафарет смачивают спиртом, поджигают и накладывают на поверхность исследуемого объекта. Смоченным стерильным ватным тампоном протирают поверхность, ограниченную трафаретом. Тампон погружают в пробирку с физ раствором или средой Кесслера. Ватный иампон, которым проводили смывы с рук, помещают в пробирку с 9 мл стерильной водопроводной воды и получают разведение. Пробирку тщательно встряхивают в течение 3-5 мин. Для определения общего количества микробов из соответствующего разведения берут 0,1 мл, заливают 10 мл МПА (расплавленного и охлажденного до 45-46 С), перемешивают в бактериологической чашке и после застывания ставят в термостат при температуре 37 С на 48 часов. Число выросших колоний умножают на разведение и судят о степени загрязненности объекта. В целях определения фекального загрязнения на присутствие кишечной палочки проводят посевы смывов на среду Эндо. Санитарно-гигиеническое благополучие объекта устанавливают по отсутствию кишечной палочки.

Бактериологические нормы для оценки санитарно-гигиенического производства молока и молочных продуктов.

Объект анализа	Методика оценки	отлично	хорошо	удовлетворительно	плохо
Фляги	В 1 мл смыва	До 1000	1000-5000	5000-10000	Свыше 10000
Танки, ванны, холодильники, пастеризаторы. Сепараторы.	На 100 см2 поверхности	5000	5000-10000	10000-15000	Свыше 15000
Руки работников.	В 1 мл смва	000	1000-5000	5000-10000	Свыше 10000

Количество микроорганизмов учитывается при отсутствии бактерий группы кишечной палочки.

Протокол бактериологического исследования.

ДАТА	МАТЕРИАЛ	ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ	ДЕНЬ ИССЛЕДОВАНИЯ	ЧТО СДЕЛАНО	ЧТО ПОЛУЧЕНО

0