У насекомых – объектами генетических инженерии являются дрозофилла и тутовый шелкопряд.

Яйца насекомых окружены толстой хитиновой оболочкой, ядра не видны. Микроинъекции производят в цитоплазму свежеотложенных яиц

Выживают и развиваются 5% яиц, из них 1% может быть трансгенным.

У рыб – трансгены вводят путем микроинъекции и электропорации оплодотворенных яйцеклеток.

Инъекцию делают в цитоплазму. Все дальнейшие процессы протекают в резервуаре с регулируемой температурой. Выживаемость после инъекции высока и составляет 35-80%, а доля трансгенных потомков – от 10 до 70%.

У птиц – микроинъекция ДНК в оплодотворенные яйцеклетки птиц не позволяет получать трансгенных особей.

При оплодотворении у птиц в яйцеклетку проникает несколько сперматозоидов и идентифицировать тот пронуклеус, который соединится с женским ядром, невозможно.

Проведены эксперименты по использованию вирусных векторов для получения трансгенных птиц.

Трансгенные животные – продуценты биологически активных белков

Животные, как продуценты белков, предпочтительнее микроорганизмов:

-для биотехнологии, основанной на деятельности микроорганизмов, требуется сложная культивационная техника

-примеси бактериальных белков могут оказывать более сильное действие на человеческий организм

-производство ценных медикаментов может оказаться дешевле, а продукт полноценнее

Большинство компаний, занимающихся получением трансгенных животных для производства рекомбинантных белков используют крупных с/х животных – коров. овец и коз

Pharming, NV получили первого трансгенного быка (Herman) в

конце 80 – х годов и разработали линии трансгенных коров, продуцирующих лактоферрин и альфа глюкосидазу

GTC Biotheraupeutics (Framingham, MA) использует коз и коров для

производства более чем 60 терапевтическим белков, включая белки плазмы крови, вакцины, антитела. Человеческий антитромбин III

(получаемый от трансгенных коз) проходит последнюю фазу испытаний

Литр козьего молока может содержать до 9 г/л рекомбинантного белка

Затраты на получение такого белка могут быть в 30 раз дешевле, чем при использовании культуры клеток

PPL Theraupeutics работает с кроликами и овцами для получения

фибриногена, альфа-1-антитрипсина и липазы

Bio-Protein Technologies использует кроликов для получения рекомбинантных белков.

Основное преимущество использования кроликов это короткое время

развития и следовательно - получения продукта. Кролики могут быть использованы для получения антител, протеинов крови и гормонов

Abbott, Centocor, Alexion

Pharmaceuticals, Immunogen,

BASF, Bristol Myers Squibb, Eli Lilly

Получение животных, устойчивых к ряду инфекционных заболеваний

Исторически сложилось, что основные подходы к борьбе с инфекционными заболеваниями животных - это использование вакцин и лекарственных средств. Методами селекции не достигнуто значительных успехов.

Новая стратегия получения животных, устойчивых к заболеваниям называется – генетическая иммунизация.

Цель иммунизации – экспрессия факторов, обеспечивающих активацию механизмов подавления инфекционной патологии.

Пути получения животных, устойчивых к инфекциям

Интеграция в геном и экспрессия отдельных участков вирусных белков, являющихся антигенами, может иммунизировать животных против этих вирусов

Интеграция генов, кодирующих антитело против соответствующего вируса, позволяет получать животных с наследуемым механизмом защиты против патогена

Существует целый ряд белков, экспрессия которых обеспечивает устойчивость животных к заболеваниям

Известно о существовании пород с наследственной устойчивостью к бактериальным инфекционным заболеваниям – маститу (коровы), дизентерии (новорожденные поросята), холере (домашняя птица)

Создание трансгенных коров с измененными свойством и составом молока

Изменения свойств и состава молока

Экспрессия белка лизоцима, который обладает противомикробной активностью может снять проблему бактериальной инфекции в молоке

Перспективным может быть увеличения количества k-казеина в молоке, что позволит получить повышенной количество сыра

Для получения молока не содержащего лактозу можно получить трансгенных животных, вырабатывающих фермент лактазу

Белок лактоферрин обеспечивает транспорт железа , ингибирует рост бактерий в молочной железе и действует как антиоксидант