7.1. Серологическая диагностика
У инфицированной ВГП птицы развивается гуморальный иммунитет. Для обнаружения в ее сыворотке крови специфических антител пользуются РДП, РГА, реакцией ингибиции гемагглютинации и иммуноферментным анализом.
В РДП выявляют матричный и нуклеокапсидный антигены ВГП — они сходны у всех подтипов вируса. Эти антигены образуют с антисыворотками наиболее четкие линии при содержании в агаровом геле 8% хлористого натрия. Результаты РДП учитывают 2 раза: через 24 и 48 ч. после внесения реагентов в лунки.
Для постановки РГА и реакции ингибиции гемагглютинации пользуются эритроцитами свободных от патогенных возбудителей цыплят. Эти тесты проводят в пластиковых планшетах при комнатной температуре или 4 С. При исследовании сыворотки крови кур очень редко отмечают неспецифическую ингибицию агглютинации эритроцитов цыплят. Поэтому сыворотку крови кур тестируют без предварительной обработки. Из-за более высокой частоты неспецифических реакций сыворотку крови других видов птицы заранее обрабатывают эритроцитами цыплят. С этой целью смесь тестируемой сыворотки и эритроцитов после перемешивания выдерживают не менее 30 мин при комнатной температуре и центрифугируют 2…5 мин при 800 g. Верхний слой сыворотки собирают для тестирования.
8. Профилактика и контроль
Успех борьбы с гриппом птиц во многом зависит от мониторинга эпизоотической ситуации в разных регионах мира, создании на пути миграции перелетных птиц условий, снижающих риск заражения домашней птицы, в т.ч. иммунизации птицы в наиболее опасных районах. Пока нет вакцин, способных предотвратить заражение птицы всеми известными подтипами возбудителя. Однако иммунизация повышает резистентность птицы, снижая тяжесть симптоматики, интенсивность выделения возбудителя во внешнюю среду и уровень смертности.
Применение живых вакцин сопряжено с двумя проблемами — риском создания стационарных очагов инфекции в популяции привитой птицы и усложнением диагностики. В первом случае, как это произошло в Мексике, возрастает частота антигенных и генетических мутаций агента, что может стать причиной появления его высоковирулентных подтипов.
Инактивированные вакцины готовят из аллантоисной жидкости КЭ, зараженных ВГП. Вирус инактивируют пропиолактоном или формалином. Для повышения иммуногенности в качестве адъюванта в препараты добавляют минеральное масло. Применяют 2 типа инактивированных вакцин: гомологичные (из того же подтипа ВГП, что и циркулирующие в данном регионе полевые штаммы) и гетерологичные (из штамма, сходного с циркулирующими в данном регионе по Н-антигену, но отличающегося от последних по нейраминидазе). Серологическими методами отличить привитую птицу от инфицированной можно только после вакцинации гетерологичными вакцинами. Данное преимущество весьма существенно, тем более, что оба типа вакцин создают приблизительно одинаковый протективный иммунитет. В большей степени эффективность инактивированных вакцин зависит от концентрации в них вирусного антигена, но не все штаммы ВГП дают высокий урожай в КЭ. Поэтому нередко приходится прибегать к различным методам концентрирования вируса, что требует дополнительных затрат и повышает стоимость препаратов.
Перспективна разработка рекомбинантных вакцин, поскольку они в значительной степени лишены упомянутых выше недостатков живых и инактивированных препаратов . Внастоящее время их все ширеприменяют в США, Гватемале, Сальвадоре и Мексике.
В периоды эпизоотий заболевания следует ограничить поступление в благополучные хозяйства птицы из других источников. При отсутствии такой возможности для восполнения поголовья птицу получают только из тщательно проверенных хозяйств. Необходима дезинфекция всех используемых за пределами птицефермы транспортных средств, а также регулярная обеззараживающая обработка одежды и обуви персонала хозяйства и всех посетителей.
В случае подозрения на проникновение инфекции в птицеводческое хозяйство принимают экстренные меры для проведения диагностических исследований и распространения возбудителя. При подтверждении диагноза на высокопатогенный грипп на неблагополучный пункт накладывают карантин и прибегают к полному уничтожению в нем домашней птицы. Трупы птицы целесообразно сжигать. Такой подход оправдан невозможностью надежной ликвидации инфекции ВГП одними только санитарно-карантинными мерами. После уничтожения пораженного стада птицы проводят дезинфекцию помещений птицефермы, всего находящегося в них оборудования, транспортных средств и прилегающей территории.