Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Биохимия-лаб..DOC
Скачиваний:
12
Добавлен:
20.07.2019
Размер:
181.76 Кб
Скачать

Опыт 10. Реакция на обнаружение дисахаридов (реакция Подобедова-Молиша).

В две пробирки вносят по 10 капель 1-2%-ных растворов сахарозы. Затем в одну из пробирок добавляют 3 капли 10-15%-ного спиртового раствора α-нафтола, а в другую – 3 капли 10-15%-ного спиртового раствора тимола. Наклонив пробирки, по стенкам из пипетки осторожно приливают по 1 мл концентрированной серной кислоты.

На границе двух жидкостей (внизу – серная кислота, сверху – водный слой) в пробирке с α-нафтолом появляется кольцо фиолетового окрашивания, а в пробирке с тимолом – кольцо красного цвета.

Объясните опыт.

Лабораторная работа №3. Высшие полисахариды.

Высшие полисахариды – природные высокомолекулярные вещества, представляющие собой продукты поликонденсации большого числа молекул моносахаридов.

Полисахариды способны к гидролизу и распаду на большое число моносахаридов.

В полисахаридах гликозидный гидроксил одной молекулы моносахарида соединен со спиртовым гидроксилом второй молекулы. Полисахариды имеют свободный гликозидный гидроксил на большое число связанных молекул моносахарида, поэтому они практически не проявляют восстанавливающих свойств.

Важнейшими представителями полисахаридов являются растительный крахмал, гликоген (животный крахмал) и целлюлоза (клетчатка).

Свойства крахмала

Опыт 1. Получение растворимого крахмала.

Смешивают 2 г сухого крахмала с 10 мл холодной воды и вливают полученную кашицу в 100 мл кипящей воды. Кипятят 5-10 минут до полного растворения, затем охлаждают и дают отстояться. Если образуется хлопьевидный осадок, то с него сливают раствор или фильтруют. Для стабилизации добавляют 0,1 г гидроксида калия.

Растворимый крахмал является первой ступенью деструкции крахмала. После него образуются молекулы с меньшей степенью полимеризации, чем исходный крахмал.

Опыт 2. Реакция крахмала с реактивом Фелинга.

В пробирку наливают 1-2 мл раствора 1­%-ного крахмального клейстера и добавляют равный объем реактива Фелинга. Содержимое пробирки перемешивают и нагревают в пламени горелки только верхнюю часть раствора до начала кипения.

Изменяется ли окраска раствора? Объясните опыт.

Опыт 3. Реакция крахмала с иодом.

В пробирку наливают 1 мл 1%-ного раствора крахмального клейстера и добавляют несколько капель сильно разбавленного водой раствора иода в иодиде калия. Появляется интенсивное синее окрашивание. При нагревании этого раствора до кипения синяя окраска исчезает, а при охлаждении раствора снова появляется.

Объясните опыт.

Иодокрахмальная реакция применяется для открытия как крахмала, так и иода.

Опыт 4. Кислотный гидролиз крахмала.

При нагревании с минеральными кислотами крахмал гидролизуется. Гидролиз крахмала проходит ступенчато с образованием промежуточных продуктов – декстринов. В зависимости от степени гидролиза они дают с иодом окраску от сине-фиолетовой до оранжево-желтой: фиолетовую окраску дают амилодекстрины, красно-бурую – эритродекстрины, оранжево-желтую – флаводекстрины, не изменяют окраску иода ахродекстрины и мальтодекстрины. При глубоком гидролизе крахмала образуется дисахарид мальтоза. Конечным продуктом гидролиза является D-глюкоза.

В коническую колбу емкостью 50 мл наливают 20-25 мл 1%-ного раствора крахмального клейстера и 3-5 мл 10%-ного раствора серной кислоты. В 7-8 пробирок наливают по 1 мл очень разбавленного раствора иода в иодиде калия (светло-желтого цвета) и пробирки ставят в штатив.

- 2 -

В первую пробирку вносят 1-3 капли подготовленного для опыта раствора крахмала. Отмечают образовавшуюся окраску. Затем колбу нагревают на асбестовой сетке небольшим пламенем горелки. Через 30 секунд после начала кипения отбирают пипеткой вторую пробу раствора крахмала, которую вносят во вторую пробирку с раствором иода и после встряхивания отмечают цвет раствора. В дальнейшем отбирают пробы раствора крахмала через каждые 30 секунд и вносят их в последующие пробирки с раствором иода. Отмечают постепенное изменение окраски растворов при реакции с иодом. Изменение окраски в пробирках происходит в следующем порядке: 1 – синяя, 2 – сине-фиолетовая, 3 – красно-фиолетовая, 4 – красновато-бурая, 5 – оранжевая, 6 – оранжево-желтая, 7 – желтая (цвет иода).

Когда реакционная смесь перестанет давать окраску с иодом, смесь кипятят еще 2-3 минуты, после чего ее охлаждают и нейтрализуют 10%-ным раствором гидроксида натрия, добавляя его по каплям до щелочной реакции среды (появления розовой окраски на фенолфталеиновой индикаторной бумаге).

Часть щелочного раствора переливают в пробирку, смешивают с равным объемом реактива Фелинга и нагревают верхнюю часть жидкости до начала кипения.

Выпадает ли красный осадок оксида меди (1)?

Напишите уравнение реакции гидролиза крахмала с указанием промежуточных и конечных продуктов. Объясните, почему в процессе гидролиза изменяется окраска гидролизата с иодом.

Свойства целлюлозы (клетчатки)

Опыт 5. Растворение целлюлозы в медно-аммиачном растворе

(реактиве Швейцера).

В пробирку наливают 5 мл медно-амиачного раствора (реактива Швейцера), опускают в него маленький кусочек гигроскопической ваты (целлюлозы) и тщательно перемешивают содержимое пробирки стеклянной палочкой до полного растворения ваты. Полученную вязкую прозрачную жидкость ярко-синего цвета выливают тонкой струей в стакан с 100 мл теплой воды, подкисленной 2-3 мл концентрированной серной кислоты. Смесь сразу же обесцвечивается и целлюлоза выделяется из раствора в виде хлопьев.

Способность целлюлозы растворяться в реактиве Швейцера используется при производстве медно-аммиачного искусственного шелка.