ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЕ ВОПРОСЫ ПРАКТИКУМА

Опыт. Влияние ускорений на организм (моделирование кинетоза).

МЕТОДИЧЕСКАЯ РАЗРАБОТКА ПРАКТИЧЕСКОГО ЗАНЯТИЯ ДЛЯ

СТУДЕНТОВ ЗАНЯТИЕ № 1

Раздел. Болезнетворное действие факторов внешней среды Тема: Повреждающее действие ускорений и перегрузок на организм

животных

Цель занятия: I. Ознакомить студентов с требованиями кафедры патофизиологии

2. Экспериментально получить явления кинетоза и перегрузок у мышей. Показать зависимость патогенного действия ускорений и перегрузок от:

а) фактора времени

б) направления действия

в) величины параметров

3. Обсудить основные методы моделирования патологических процессов на разных уровнях интеграции организма. Животные и оборудование: мыши массой 18-20 гр., комплект ручных центрифуг РЦ-4 с разным положением пеналов для животных, измерительная линейка на 30 см., краска для метки животных, ручки для приведения центрифуги в действие, анатомический пинцет, пластиковые прокладки для крепления центрифуги к столу, тряпка для поддержания чистоты на рабочих местах.

Ход работы: Работа выполняется на 2-х столах (студенты последовательно переходят от одного стола к другому, наблюдая за проведением эсперимента, который выполняют желающие)

1) Центрифугу прочно укрепить на крышке стола, предварительно положив на обе поверхности крышки стола две пластиковые прокладки.

2) Студенту, ставившему эксперимент предварительно нужно потренироваться в обращении с центрифугой. Ручку центрифуги следует вращать по часовой стрелки, равномерно, со скоростью один полный оборот за 1 сек. Предварительное вращение проводить без размещения мышей в пеналы.

3) Поверхность стола, за которым ставиться эксперимент, должна быть свободной от различных предметов (тетради, учебники, ручки, сумки и т.д.)

4) Пометить краской шерсть спины одной из мышей.

5) Поместить мышей на поверхность стола и снять исходные показатели: поведение животного (активное, пассивное), ориентировочный рефлекс (выражен, не выражен), окраска кожных покровов и слизистой (розовая, бледная, цианотичная), координация движений - оценивается по способности мыши удерживаться спиной к верху на линейки во время вращения ее в горизонтальной плоскости (нарушена, не нарушена). Координация может быть оценена также, если поднять мышку за хвост и отметить реакцию ее

на такое расположение в пространстве; обратить внимание на тонус скелетной мускулатуры, конечностей (равномерный, симметричный, асимметричный). Эти же показатели снять после вращения мышей на центрифуге, обратив так же внимание на время восстановления нарушенных функций.

6) Поместить мышей раздельно в пеналы и закрыть их пробками (не прищемить хвост). Отверстие, через которое мышки попадают в пенал указать стрелками. Дать мышкам адаптироваться 1-2 мин.

7) Начать вращение: на первом столе, где мышки находятся в пеналах расположенных на разном расстоянии от центра вращения, экспериментатор производит вращение центрифуги в течение 25 сек. По истечении этого времени центрифугу резко останавливают, открывают пробку, на которую указывает стрелка, вытаскивают мышей из пеналов с помощью анатомического пинцета и кладут на поверхность стола. Отметить нарушения, которые отмечаются у мышей (по показателям, указанным выше). Отменить время восстановления функций, если это будет иметь место. На втором столе, где мышки находятся в пеналах» расположенных вдоль радиуса вращения (обратить внимание, чтобы одна мышь находилась головой к центру, а другая в противоположном направлении), проводить вращение в течение 45 сек, снять показатели также как в предыдущем опыте. Отметить симптомы положительной и отрицательной продольной перегрузки,

8) Величину центростремительного ускорения расчитывают по формуле: A=w x R; w= 2П х п ,где А - угловая скоростьД-радиус вращения, n-число оборотов центрифуги в 1 сек. Скорость вращения коромысла центрифуги с закрепленными в пеналах мышами составляет 8 об/сек (полный оборот за 1 сек.) Поскольку передаточные отношения шестерни центрифуги РЦ-4 к ее червяку составляет 8:1, то при указанной скорости вращения ручки (1об/сек.) скорость коромысла с пеналами составит 480 об/мин или 8 об/сек. Измерив, радиусы вращения (расстояние в метра от центра до места вращения мышей в пеналах), рассчитывают величину центростремительного ускорения по формуле: n = a /g -величину перегрузки действующей на животных (а и центростремительное ускорение, g- ускорение свободного падения).

Заполнить таблицу и сделать выводы.

Опыт. Моделирование артериальной гиперемии на языке лягушки.

Опыт 1.Изучение механизма возникновения и характер нарушений при артериальной гиперемии.

Задание	Указания к заданию
Обездвижить и зафиксировать лягушку.	Разрушить с помощью зонда спинной мозг, зафиксировать лягушку на препаровальной дощечке спинкой вверх
Зафиксировать язык	Извлечь осторожно пинцетом язык и наколоть булавками у края отверстия.
Изучить исходное состояние	Ознакомиться с расположением язычных вен и артерий, изучить кровообращение (под малым увеличением микроскопа) языка , скорость тока крови, густоту сетки капиллярных сосудов, их просвет.
Получить артериальную гиперемию	Поверхность языка смазать скипидаром или протереть сухой салфеткой; определить изменения кровообращения в тканях языка.
Оформить результаты опыта	Зарисовать и кратко описать наблюдаемую картину до, и после смазывания языка скипидаром или протирания его сухой салфеткой.

Опыт 2. Изучение особенности местного кровообращения при венозной гиперемии

Опыт. Моделирование венозной гиперемии на языке лягушки.

Задание	Указания к заданию
Изучить кровообращение в тканях языка лягушки.	Опыт ставится на той же лягушке (см. вопрос №2), предварительно смыв скипидар водой. С помощью пинцета оттянуть в сторону край языка у его корня. Провести лигатуру между расположенной снаружи веной и артерией, перевязать вену. Под малым малым увеличением микроскопа наблюдать изменение скорости кровотока, увеличение просвета венозных сосудов.
Оформить результаты опыта	Зарисовать и кратко описать наблюдаемую картину.

4. Опыт. Моделирование эмболии на брыжейке лягушки.

Опыт 4. Изучение особенности кровообращения б сосудах брыжейки ____ лягушки при эмболии.

Задание	Указания к заданию
Зафиксировать животное	Использовать лягушку из предыдущего опыта. Лягушку прикрепить к дощечке брюшком к верху так, чтобы правая ее сторона касалась круглого отверстия дощечки.
Выделить и зафиксировать петлю тонкой кишки.	Боковым разрезом справа вскрыть брюшную полость. Осторожно вытянуть пинцетом тонкую кишку и прикрепить у краев отверстия так, чтобы брыжейка оказалась слегка натянутой над ним.
Получить жировую эмболию	Вскрыть грудную клетку лягушки, освободить сердце от перикарда. В желудочек сердца ввести тонкой иглой 0.2-OJ мл взвеси вазелинового (подсолнечного) масла,
Изучить местное кровообращение	Под малым увеличением микроскопа изучить сосуды брыжейки лягушки, движение капелек жира в них и нарушение кровотока, вызванное эмболией.
[ Оформить результаты опыта.	Зарисовать и кратко описать эмболию.

5.Опыт. Моделирование тромбоза на брыжейке лягушки.

Тема занятия: «Патология гемостаза»

Цель занятия: Изучение морфологических и функциональных показателей тромбоцитарно-сосудистого и коагуляционного гемостаза в норме и при нарушениях свертываемости крови. Вопросы к занятию:

1. Тромбоцитарно-сосудистый гемостаз, причины и механизмы нарушении.

2. Коагуляционный гемостаз, причины и механизмы нарушений.

Опыт 2* Моделирование белого тромба в венозных сосудах брыжейки лягушки.

Лягушку обездвижить разрушением спинного мозга, фиксировать на препаровальной дощечке брюшком вверх Выделить брыжейку и растянуть ее над круглым отверстием препаровальной дощечкиЛетлоо кишечника укрепить булавками. Препарат рассматривать под малым увеличением (об. Х8Хнаблюдагь кровообращение в сосудах брыжейки.

Образование пристеночного тромба вызывают помещением кристаллика хлористого кальция (препаровальной иглой) рядом с наружной стенкой венозного сосуда.

Зарисовывают сосуд с образовавшимся тромбом, делают выводы

6. Опыт. Стадии нарушения микроциркуляции при остром воспалении (опыт

Конгейма).

Тема: ВОСПАЛЕНИЕ

Занятие 1: СОСУДИСТЫЕ РЕАКЦИИ ПРИ ВОСПАЛЕНИИ.

Оснащение: микроскопы, дощечки для препарования лягушек, зонды, булавки, ножницы, пинцеты глазные, покровные стекла, шприцы 1,0 мл, инъекционные иглы, 0,1% раствора синего Эванса, марлевые салфетки, физ. раствор для холоднокровных, 5% раствор НС1, лягушки.

Опыт1. Изучение сосудистых реакций при воспалении брыжейки кишки лягушки (опыт Конгейма).

Лягушку обездвиживают путем разрушения зондом спинного мозга и фиксируют ее на дощечке на спине.Кожу и мышцы в нижней половине брюшной стенки справа разрезают ножницами, пинцетом осторожно захватывают петлю кишечника и растягивают брыжейку над круглым отверстием дощечки. Петлю кешечника закрепляют булавками, вкалывая их в стенку кишки. Под малым увелечением микроскопа (об.х8) в брыжейке наблюдают кровоток в артериальных, венозных сосудах и капиллярах. Через 5-10 мин в результате подсыхания в брыжейке развивается острый воспалительный процесс, характерезующий вначале расширением артериальных сосудов и ускорением в них кровотока( артериальная гиперемия). В этих сосудах ясно различается центральный(осевой) слой, в котором сплошной массой движутся форменные элементы, и периферический прозрачный плазматический слой. Артериальная гиперемия через 30-40 мин после извлечения брыжейки сменяется расширением венозных сосудов и замедлением в них кровотока (венозная гиперемия). В период венозной гиперемии в мелких венах и капиллярах начинается процесс прилипания лейкоцитов к эндотелию(краевое стояние лейкоцитов). Продолжают наблюдать прогрессирующее замедление кровотока, которое переходит в стаз. Прикрыв брыжейку покровным стеклом, рассматривают ее при большом увеличении (об. Х40). В венах и капиллярах, в которых хорошо выражено пристеночное стояние лейкоцитов, они постепенно проникают сквозь соудистую стенку, отделяя от нее, принимают амебовидную форму и оказываются за пределами сосуда(эмиграция лейкоцитов). В капиллярах удается также наблюдать и выход эритроцитов наружу (диападез эритроцитов). В некоторых участках, в связи с разрывом сосудов, наблюдаются кровоизлияния с массовым выходом крови в окружающую ткань. В других участках можно обнаружить полную остановку крови-стаз.

Зарисовать наблюдаемые сосудистые явления (гиперемию, пристеночное стояние лейкоцитов и их эмиграцию).