Занятие № 23
МИКОБАКТЕРИИ. АКТИНОМИЦЕТЫ. ЛИСТЕРИИ
Микробиологическая диагнос тика туберкулеза, проказы, актиномикоза, листериоза
Общая характеристика микобактерий
Отличия микобактерий от других прокариот:
Микобактерии составляют особую группу прокариот, которая отличается от других бактерий следующими основными свойствами:
кислото-, спирто- и щелочеустойчивость
высокое (до 60%) содержание в клеточной стенке липидов
очень медленный рост
Кислотоустойчивость микобактерий:
Обуславливается высоким содержанием липидов в клеточной стенке. На этом свойстве основана дифференцирующая микобактерии от других прокариот окраска их по Цилю-Нильсену в розовый цвет. Вместе с тем необходимо иметь в виду, что встречаются и кислотоподатливые (окрашивающиеся по Цилю-Нильсену в синий цвет) микобактерии.
Возбудители туберкулеза Туберкулезная палочка
Классификация:
Отдел: Firmicutes
Порядок: Actinomycetales
Семейство: Mycobacteriaceae
Виды:
M. tuberculosis
M. bovis
M. africanum.
Морфологические свойства:
Окраска по Граму |
Грамположительные (этот метод окраски применяется в данном случае редко из-за плохого восприятия микобактериями анилиновых красителей) |
Форма |
Тонкая и стройная («швейная игла») прямая или слегка изогнутая палочка. Обладает большим полиморфизмом. В старых культурах наблюдаются нитевидные, ветвящиеся формы, нередко – зернистые (зерна Муха); в организме больных под влиянием химиопрепаратов часто образуются ультрамалые формы, способные проходить через бактериальные фильтры («фильтрующиеся формы») |
Размер |
|
Эндоспора |
Не образует |
Макрокапсула |
Не образует |
Жгутики |
Атрих |
Расположение в мазке |
В мазках из патологического материала располагается преимущественно одиночно |
Другие морфологотинкториальные особенности |
Кислото-, спирто- и щелочеустойчивость |
Культуральные свойства:
Питательные потребности |
Сложные (используются среды преимущественно на яичной основе или картофельно-глицериновые) |
Оптимальная температура |
37оС |
Условия аэрации |
Любые |
Скорость роста |
Растет очень медленно (одно деление клетки происходит за 14-18 часов), поэтому вывод об отрицательном результате при выделении туберкулезной палочки из питательного материала можно сделать лишь после трехмесячного культивирования. На жидких средах вырастают за 5 - 7 дней, на плотных - в течение 14 - 40 суток. |
Характер роста |
а) на жидких средах - морщинистая пленка; б) на плотных средах - R-формы колоний (похожие на бородавки или цветную капусту) с желтым пигментом |
Селективная питательная среда |
Лучшей средой считается свернутая среда Левенштейна-Йенсена в разных модификациях (включает картофельный экстракт, различные соли, яйца, глицерин и малахитовый зеленый как агент, ингибирующий рост контаминирующей микрофлоры) |
Биохимические свойства: основной биохимический тест, используемый для идентификации – ниациновая проба.
Серологические свойства:
Антигенами являются
Туберкулин (белок).
Полисахариды.
Фосфатиды.
Корд-фактор
Антигены всех видов микобактерий схожи между собой, вследствие чего серологический метод их идентификации практически не используется.
Факторы патогенности:
Сульфатиды (серосодержащие гликопротеиды):
снижают активность фагоцитов
усиливают действие корд-фактора
ингибируют фагосомо-лизосомальное слияние в фагоцитирующих клетках
Корд фактор (гликолипид, располагающийся на поверхности и в толще клеточной стенки) - главный фактор патогенности, лишенные его туберкулезные палочки являются непатогенными или слабопатогенными для человека:
поражает мембраны митохондрий (в том числе макрофагов), блокируя в них процессы окислительного фосфорилирования
тормозит миграцию фагоцитов
липиды:
оказывают повреждающее действие на ткани
обуславливают кисло-, спирто- и щелочеустойчивость микобактерий
обуславливают высокую устойчивость микобактерий к другим факторам внешней среды
белки (составляющие основу туберкулина):
вызывают сенсибилизацию организма
оказывают повреждающее действие на ткани.
Токсические липиды:
Состоят из:
нейтральных жиров,
восков,
стеринов, фосфатидов,
жирных кислот (фтиоидной, миколовой, туберкулостеариновой, пальмитиновой),
корд-фактора.
Фосфатидная фракция (содержит фтиоидную кислоту) - наиболее активная из всех липидов. Вызывает специфическую тканевую реакцию с образованием эпителиоидных клеток.
Жировая (нейтральные жиры) фракция (также содержит фтиоидную кислоту). Вызывает образование туберкулоидной ткани.
Восковая фракция (содержит миколовую кислоту). Вызывает реакции с образованием многочисленных гигантских клеток.
Резистентность во внешней среде:
Устойчивы во внешней среде. При кипячении погибают через 5 минут. Прямой солнечный свет убивает их в течение часа. Химические дезинфектанты по отношению к микобактериям малоэффективны (5% раствор фенола убивает их только через 5 - 6 часов). 0,05% раствор бензилхлорфенола убивает микобактерии через 15 минут.
Туберкулезная палочка способна вырабатывать устойчивость ко многим антибактериальным средствам.