- •Тема 15-16. Действие физических, химических и биологических факторов на микроорганизмы. Дезинфекция. Понятие об асептике, антисептике, консервации. Стерилизация.
- •Тема 15-16: Действие физических, химических и биологических факторов на микроорганизмы. Дезинфекция. Понятие об асептике, антисептике, консервации. Стерилизация.
- •1.Физические, химические и биологические факторы действующие на микроорганизмы. 2.Дезинфекция
- •Методы асептики и антисептики:
- •Физические методы стерилизации
- •Воздействие температуры:
- •Химические методы стерилизации
- •Механический метод стерилизации – фильтрация
- •Физические методы дезинфекции
- •Химические методы дезинфекции
- •Группы антисептиков и дезинфектантов
- •Задания для самостоятельной работы студентов
Задания для самостоятельной работы студентов
Задание №1. Изучение влияния УФ-лучей на грамотрицательные (кишечная палочка), грамположительные пигментированные (золотистый стафилококк) и споровые (бацилла) микроорганизмы.
Название микроорганизма |
УФ 5 минут (количество колоний) |
УФ 15 минут (количество колоний) |
Кишечная палочка |
|
|
Золотистый стафилококк |
|
|
Бациллы |
|
|
Посчитать колонии микроорганизмов, выросших на той части поверхности агара, которая подвергалась облучению (опыт) и внести результаты в таблицу. Сделать заключение.
В заключении к работе обратить внимание на различную чувствительность бактерий к УФ-лучам в зависимости от времени экспозиции и наличия спор и пигмента; а также на отсутствие проникающей способности УФ-лучей (сплошной рост на зоне МПА, закрытой при обучении стеклом); связать сроки стерилизации и объекты, подвергающиеся данному методу стерилизации.
Задание №2. Изучение различных бактериальных фильтров.
Обратить внимание на различные по структуре фильтры и целесообразность их применения в зависимости от конечных целей и виде стерилизуемой жидкости.
Задание №3. Изучение чувствительности бактерий к антисептикам (кишечной палочки, синегнойной палочки, золотистого стафилококка и протея).
Методика определения чувствительности микроорганизмов к антисептикам: Готовят стандартную взвесь исследуемых штаммов микроорганизмов из суточной культуры. Сеют газоном на поверхность МПА (тампоном или пипеткой, с последующим удалением избытка взвеси), подсушивают чашку. Затем на поверхность агара каплями (бактериологической петлей или микропипеткой) наносят антисептики на участки, предварительно помеченные со дна чашки. Посев помещают в термостат на сутки. Через сутки отмечают зоны задержки роста в виде стерильных пятен, которые свидетельствуют о чувствительности микроорганизмов к данному антисептику.
Изучите чувствительность исследуемых штаммов. Данные занесите в таблицу. Знаком «+» обозначьте стерильное пятно, что будет свидетельствовать о чувствительности штамма к антисептику. Сделайте заключение.
Вид микроорганизма |
Перекись водорода |
Йодинол |
Фурациллин |
Хлоргексидин |
Р-р Люголя |
Кишечная палочка |
|
|
|
|
|
Синегнойная Палочка |
|
|
|
|
|
Протей
|
|
|
|
|
|
Золотистый стафилококк. |
|
|
|
|
|
В заключении к работе обратить внимание на различную чувствительность к антисептикам у исследуемых микробов, а также на различную эффективность самих антисептиков (отсутствие чувствительности у всех штаммов к фурациллину); сделать вывод о необходимости проведения данного исследования во избежание назначения неэффективного препарата.
Задание №4. Изучение результатов контроля стерильности химическим методом.
Обратить внимание на применение различных веществ в зависимости от их точки плавления для химического контроля различных температурных режимов; проанализировать достоинства и недостатки химического метода.
Задание №5. Изучение результатов контроля стерильности пробок и марлевых тампонов микробиологическим методом (метод прямого посева)
Методика проведения контроля стерильности микробиологическим методом: исследуемые образцы после окончания стерилизации асептически изымают из упаковки и помещают в МПБ. Часть пробирок с образцами заливают стерильным вазелиновым маслом для создания анаэробных условий. Посевы инкубируют не менее 14 суток, ежедневно просматривая на наличие роста. При отсутствии роста делают заключение о стерильности партии объектов.
Изучите предложенные посевы. Отметьте знаком «+» и «-» наличие или отсутствие роста в каждой пробирке. Результаты занесите в таблицу. Сделайте заключение о стерильности образцов.
Объект |
Анаэробные условия (наличие или отсутствие роста) |
Аэробные условия (наличие или отсутствие роста) |
Марлевые тампоны |
|
|
Резиновые пробки |
|
|
В заключении к работе сделать вывод о стерильности объектов, обратить внимание на обязательное отсутствие роста при аэробных и анаэробных условиях в случае стерильности объекта; проанализировать достоинства и недостатки микробиологического метода контроля стерильности, проведенного таким способом; указать на использование тест-штаммов споровых микроорганизмов, как вариант микробиологического контроля стерильности и преимущества его.
Задание №6. Изучение результатов проведенных смывов с рабочего стола бактериолога до и после проведения дезинфекции.
Изучите посевы на МПА, сделанные до и после проведенной дезинфекции: количество колоний, культуральные свойства (цвет, размер, ползучий рост и т.д.). Внесите результаты в таблицу. Сделайте заключение по эффективности дезинфекции.
Количество колоний и культуральные свойства микроорганизмов |
|
До дезинфекции |
После дезинфекции |
|
|
В заключении обратить внимание на количество колоний и их культуральные свойства; отметить уменьшение количества колоний и отсутствие среди них протея (ползучий рост); подчеркнуть, что цель дезинфекции – устранение именно патогенных микроорганизмов.