- •1. Определить морфологию микроорганизмов (по готовым мазкам).
- •2. Определить морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов (по готовым мазкам).
- •3. Приготовить мазок из агаровой культуры, окрасить по Граму. Определить морфологические и тинкториальные свойства.
- •4. Произвести бактериоскопическое исследование гноя и определить морфологию и тинкториальные свойства имеющихся микроорганизмов.
- •5. Сделать посев исследуемого материала петлей на жидкую и плотную питательные среды.
- •6. Выполнить 1 этап выделения чистой культуры, оценить культуральные свойства по готовым посевам.
- •7. Произвести посев на косой агар с целью выделения чистой культуры микроорганизмов.
- •8. Сделать посев исследуемого материала на чашку с мпа сплошным газоном.
- •9. Сделать посев для определения биохимических свойств выделенной культуры.
- •10. Выполнить 1 этап бактериологического исследования испражнений больного при подозрении на дизентерию.
- •11. Определить вид микроба по антигенным свойствам в реакции агглютинации с адсорбированной агглютинирующей сывороткой.
- •12. Поставить и оценить ориентировочную реакцию агглютинации для определения вида микроба.
- •13. Оценить результаты рск с целью определения антител в сыворотке больного по демонстрационному ряду.
- •14. Поставить реакцию преципитации для определения антигена в ликворе больного.
- •15. Оценить рпга для определения наличия столбнячного токсина в фильтрате исследуемого материала (по демонстрационному материалу).
- •16. Поставить рга для индикации и титрования вируса. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
- •17. Поставить ртга для определения типа вируса в аллантоисной жидкости.
- •18. Оценить ртга в парных сыворотках больного с целью серодиагностики вирусных инфекций.
- •19. Поставить рпга для определения титра антител в сыворотке больного. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
- •20. Определить титр антител в ифа по демонстрационному материалу.
- •21. Поставить опыт по определению чувствительности культуры микроорганизмов к антибиотикам методом бумажных дисков. Оценить опыт по демонстрационным посевам.
- •22. Определение мпк (минимальной подавляющей концентрации) антибиотика методом серийных разведений в бульоне (по демонстрационному ряду).
- •23. Среда Эндо.
- •24. Среда Плоскирева.
- •25. Среда Гисса.
18. Оценить ртга в парных сыворотках больного с целью серодиагностики вирусных инфекций.
Берут 2 ряда пробирок с разведениями сыворотки больного: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, К (контроль). Учет начинают с контрольных пробирок, в которых должен быть осадок эритроцитов в виде «зонтика». Затем сравнивают результаты опытных пробирок с контролем. При наличии осадка эритроцитов в виде «пуговки» результат оценивается положительно, при наличии «зонтика» - отрицательно.
Определяют титры антител в двух рядах сыворотки и сравнивают.
Для серологического подтверждения вирусной инфекции титр антител во II-й сыворотке, взятой в конце заболевания, должен возрасти не менее, чем в 4 раза по сравнению с I-й сывороткой больного.
19. Поставить рпга для определения титра антител в сыворотке больного. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
Используют стандартные антигенные эритроцитарные диагностикумы. В пробирках готовят последовательные разведения сыворотки больного, ориентируясь на диагностический титр. Затем в каждую пробирку вносят одинаковый объем 3% суспензии нагруженных антигеном эритроцитов (эритроцитарного диагностикума). Через 2 ч инкубации при 370С учитывают результат, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): отрицательная реакция – осадок эритроцитов в виде компактного диска или колечка с ровными краями на дна лунки, положительная реакция – характерный кружевной вид осадка эритроцитов, тонкая пленка с неровными краями.
20. Определить титр антител в ифа по демонстрационному материалу.
Сначала оценивают контрольные пробы:
-
Отрицательная проба – лунка, в которой цвет пробы прозрачный со слегка желтоватым оттенком.
-
Положительная проба – лунка, в которой цвет среды коричневый.
После этого учитывают лунки, в которых находятся разведения исследуемой сыворотки (1:2, 1:4, 1:8 и т.д.). За титр антител принимают последнее разведение, в котором цвет пробы совпадает с цветом положительной пробы.
21. Поставить опыт по определению чувствительности культуры микроорганизмов к антибиотикам методом бумажных дисков. Оценить опыт по демонстрационным посевам.
Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар в чашке Петри. Для этого извлекают из бумажной упаковки стерильную пипетку, ее берут в правую руку. В левую руку берут пробирку с 1 млрд взвесью бактериальной культуры, открывают над спиртовкой пробку 4 –5 пальцами правой кисти. Набирают в пипетку 1 мл культуры, располагают пипетку горизонтально (чтобы случайно не вылить содержимое на стол), обжигают края пробирки и закрывают ее пробкой. Приоткрыв чашку Петри с МПА, выливают 1 мл культуры на агар. Чашку закрывают и распределяют культуру по поверхности агара, оставляют на несколько минут (для всасывания жидкости) на столе. Затем на поверхность питательной среды пинцетом помещают на равномерном расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 370С до следующего дня. По диаметру зон задержки роста культуры судят об ее чувствительности к соответствующим антибиотикам. При зоне задержки роста диаметром 0-10 мм культура расценивается как нечувствительная (устойчивая), диаметром 11–15 расценивается как малочувствительная, 16-25 мм – чувствительная, больше 25 мм – высокочувствительная.