- •Биологическая химия для бакалавров направления «Биология»
- •Введение
- •1. Цели и задачи дисциплины
- •2. Объем дисциплины и виды учебной работы
- •3. Формы и содержание текущего и итогового контроля
- •Система рейтинговой оценки
- •Система итоговой оценки знаний
- •4. Рекомендуемая литература
- •Организация работы студента
- •II. Работа с веществами и растворами
- •III. Обращение с нагревательными приборами
- •Занятие № 1. «Введение в курс»
- •Экспериментальная работа.
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 3. «Физико-химические свойства углеводов»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 4. «Физико-химические свойства липидов»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 5. «Строение и физико-химические свойства аминокислот и белков»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 6. «Ферменты»
- •Вопросы к контрольной работе:
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 7. «Ферментативный катализ»
- •Экспериментальная работа. Опыт 1. Определение активности амилазы (диастазы) мочи по Вольгемуту.
- •Практическое задание
- •Занятие № 8. «Роль витаминов в метаболизме»
- •Вопросы к контрольной работе:
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 9. «Гормональная регуляция обмена веществ»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 10. Коллоквиум I: «Уровни организации биогенных соединений. Ферменты. Витамины. Гормоны»
- •Занятие № 11. «Обмен веществ и энергии»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 12. «Цикл трикарбоновых кислот»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 13. «Обмен углеводов (часть 1)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 14. «Обмен углеводов (часть 2)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 15. «Обмен липидов (часть1)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 16. «Обмен липидов (часть 2)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 17. «Биологические свойства клеточных мембран»
- •Экспериментальная работа.
- •X - содержание холестерина в калибровочном растворе, ммоль/л
- •Занятие № 18. Коллоквиум I I: «Обмен веществ и энергии»
- •Занятие № 19. «Белковый обмен (часть 1)»
- •Экспериментальная работа.
- •Расчетные методы определения биологической ценности белка.
- •Содержание незаменимых (для человека) аминокислот в некоторых видах продуктов, г на 100 г белка
- •Занятие № 20. «Белковый обмен (часть 2)»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 21. «Биохимическая детоксикация»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 22. «Обмен нуклеиновых кислот и молекулярные механизмы синтеза белка»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 26. Коллоквиум III: «Азотистый обмен и биохимические механизмы синтеза белка».
- •Физиологические показатели обмена веществ у домашних и сельскохозяйственных животных.
- •Вопросы итоговой аттестации
- •Биологическая химия
Занятие № 13. «Обмен углеводов (часть 1)»
Цель занятия: рассмотреть факторы, влияющие на переваривание углеводов; освоить метод количественного определения глюкозы в крови.
ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:
Основные углеводы пищи, их характеристика. Биологическая роль и функции углеводов в организме.
Переваривание углеводов в желудочно-кишечном тракте у моногастричных животных. Ферменты, участвующие в переваривании углеводов. Нарушения переваривания углеводов.
Особенности переваривания углеводов у жвачных животных. Пути включения летучих жирных кислот (ЛЖК) в метаболизм.
Метаболизм глюкозо-6-фосфата.
Регуляция содержания глюкозы в крови. Биологическая значимость данного явления.
Синтез и распад гликогена: последовательность стадий и биологическое значение этих процессов.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Экспериментальная работа.
Опыт 1. Влияние формальдегида на активность амилазы.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Водяная баня.
Реактивы. 1. Крахмал, 1%-ный раствор.
2. Амилаза, раствор.
3. Йод, 1%-ный раствор.
4. Формальдегид, 5%-ный раствор.
Возьмите две пробирки.
В опытную пробирку налейте по 1 мл растворов крахмала, амилазы и 5 капель 5%-ного формальдегида.
В контрольную пробирку налейте по 1 мл раствора крахмала, амилазы и воды.
Поместите пробирки на 10 минут в водяную баню при 37°С.
В обе пробирки добавьте по 1 капле 1%-ного раствора йода.
Объясните полученные результаты.
Опыт 2. Определение концентрации глюкозы в биологических жидкостях ортотолуидиновым методом.
Для определения глюкозы в биологических жидкостях по данному методу в настоящее время различными фирмами выпускаются наборы реактивов. Поэтому суть работы сводится только к правильному использованию набора реактивов согласно инструкции по применению.
Глюкоза с ортотолуидином в кислой среде при повышенной температуре образует комплексное соединение сине-зеленого цвета. Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации глюкозы в исследуемой пробе.
Определение без депротеинирования.
Без осаждения белков анализируют сыворотку и плазму крови, мочу. Мочу перед анализом разбавляют дистиллированной водой в соотношении от 1:10 до 1:500 и в последующем результат умножают на степень разведения.
Приготовьте опытную, калибровочную и контрольную пробы по схеме:
|
Объем компонента (мл) | ||
опытная проба |
калибровочная проба |
контрольная проба | |
Рабочий раствор реактивов (ортотолуидиновый реактив) |
2,7 |
2,7 |
2,7 |
Исследуемый образец |
0,3 |
|
|
Калибратор (раствор глюкозы с известной концентрацией) |
|
0,3 |
|
Дистиллированная вода |
|
|
0,3 |
Перемешайте. Закройте пробирки фольгой.
Поместите пробирки в кипящую водяную баню точно на 8 минут.
Охладите пробирку под струей холодной воды.
Измерьте оптическую плотность опытной (D1) и калибровочной (D2) проб против холостой пробы при длине волны 620 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 5 мм.
Рассчитайте концентрацию глюкозы по формуле:
где Х концентрация глюкозы в калибровочном растворе.
Сравните полученные величины с нормальными значениями. Сделайте вывод о состоянии животного. В случае отклонения полученных значений от нормальных величин, предложите возможные причины, объясняющие данный результат.
Назовите факторы, вызывающие гипогликемию и гипергликемию в крови животных.
Опыт 3. Обнаружение сахара в моче с помощью качественной пробы Троммера.
Появление сахара в моче наблюдается при бешенстве, нервной форме чумы собак, нарушениях функции печени, панкреатической железы и др. У лошадей глюкозурия встречается реже, чем у собак. Лактозурия наблюдается при родильном парезе, воспалении вымени, закупорке сосудов, маститах.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Держатель для пробирок.
4. Газовая горелка.
Реактивы. 1. Моча.
2. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор.
3. Сульфат меди, 2%-ный раствор.
В пробирку налейте 3 мл мочи и 1 мл 10%-ного раствора гидроксида натрия.
Осторожно, по каплям, добавляйте 2%-ный раствор сульфата меди до появления небольшой, неисчезающей при взбалтывании голубой мути гидроксида меди (II).
Верхний слой жидкости нагрейте до кипения (не кипятите!).
В течение 1 минуты (не дольше!) оцените цвет осадка. Образование желто-красного осадка свидетельствует о наличии сахара в моче. (Изменение цвета без осадка может быть при наличии муцина, мочевой кислоты и др.).
Сделайте вывод по результатам эксперимента.
Опыт 4. Полуколичественное определение глюкозы в моче.
Приборы. 1. Ступка с пестиком.
2. Весы.
3. Предметное стекло.
4. Газовая горелка.
5. Пипетка.
Реактивы. 1. Моча.
2. Сульфат меди, кристаллический.
3. Карбонат натрия, кристаллический.
В ступке разотрите в тонкий порошок 1 г сульфата меди и 10 г карбоната натрия.
На предметное стекло насыпьте немного порошка и нанесите несколько капель мочи.
Подогрейте до кипения. Синий цвет означает, что глюкозы нет, желтовато-зеленый означает, что глюкозы не более 0,5 %, зеленый – не более 1%, коричнево-красный – до 2%, интенсивно красный – свыше 2%.
Запишите Ваши результаты. Сравните результаты с предыдущим опытом.
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________