Практическая работа

Р а б о т а №1

Цель:Изучить явление микробного антагонизма.

Задание.В середине чашки Петри с МПА сделан посев петлей протея (Proteus vulgaris), после чего полукругом вокруг посева была засеяна культураВ. cereus(посев по Перетцу), чашки инкубировали в термостате в течение 24 ч при 37°С. Учитывая культуральные особенности протея учесть результат опыта (зарисовать в альбом) и объяснить механизм микробного антагонизма.

ПРОТОКОЛ

Цель:

Вид микроорганизма	Микробный антагонизм (рисунок с обозначениями)

Вывод: (Ответить на вопросы: 1. Как растет протей в опытной чашке? Почему? 2. Что такое бактериоцины?)

Р а б о т а №2

Цель:Изучить практическое использование явления бактериоциногении.

Задача.В детском терапевтическом отделении среди группы детей от 6 месяцев до 1 года, госпитализированных по поводу пневмонии, возникла вспышка острого кишечного заболевания. Лабораторная диагностика показала, что у всех детей заболевание вызвано кишечной палочкой. Для проведения эпидемиологического анализа необходимо определить колициночувствительность выделенных штаммов кишечных палочек. Используя готовые демонстрационные посевы определить колицинотипы изучаемых культур, обозначив буквами (соответственно типам колицинов, выделяемых набором колициногенных штаммов). Оформить протокол в виде рисунка. Сделать вывод о возможном источнике инфекции.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

Колициногенные музейные культуры, выделяющие разные типы колицинов, засевают уколом в чашку Петри, разделенную на маленькие квадратики, после проращивания посевы убивают парами хлороформа. Сверху сплошным газоном засевают исследуемые штаммы бактерий, выделенные от больных и носителей (каждый на отдельной чашке).

Учет результатов проводится после суточной инкубации в термостате. При наличии колициночувствительности вокруг колициногенного штамма отмечается стерильная зона.

ПРОТОКОЛ

Цель:

Обследуемые	Рисунок	Колицинотип
Ребенок А.
Сотрудник В.
Сотрудник С.

Вывод: (Ответить на вопросы: 1. Кто стал источником инфекции? Почему? 2. Можно ли использовать колицины с лечебно-профилактической целью?)

Р а б о т а №3

Цель:Овладеть навыком постановки и оценки антибиотикограммы.

Задача.В клинику поступили больной А., 27 лет с диагнозом стафилококковой пневмонии и больной Б. Для успешного этиологического лечения при выборе эффективного антибиотика было рекомендовано определение антибиотикограммы возбудителя. Используя готовые демонстрационные посевы учесть результаты определения чувствительности стафилококка к антибиотикам диско-диффузионным методом, составить антибиотикограмму. Оформить протокол, сделать заключение.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

На поверхность плотной питательной среды засевают газоном исследуемую культуру. Накладывают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные антибиотиками, на расстоянии не менее 2-х см друг от друга (не более 6-ти дисков на чашку). После инкубации посевов в течение суток учитывают чувствительность культуры к антибиотикам по диаметрам зон отсутствия роста вокруг дисков.

Для измерения диаметра зон задержки роста чашки помещают кверху дном на темную матовую поверхность так, чтобы свет настольной лампы падал под углом 45°. Диаметр зон задержки роста с учетом диаметра самого диска измеряют с точностью до 1 мм с помощью линейки или штангенциркуля. Интерпретация результатов ведется по табличным данным предприятия-изготовителя дисков.

ПРОТОКОЛ

Цель:

Вид возбудителя	Рисунок	Величина зон задержки роста, мм (S,R,I)*
		Антибиотики
S. aureus

S– чувствительные (d>20 мм),R– резистентные (d<10 мм),I– умеренно чувствительные (20 мм >d>10 мм)

Заключение:(Ответить на вопросы: 1. Какой принцип и метод диагностики применен? 2. Какой антибиотик необходимо назначит для рациональной антибиотикотерапии? Почему?)

Р а б о т а №4

Цель:Овладеть навыком подбора терапевтических концентраций антибиотиков.

Задача.В целях назначения больному рациональной схемы лечения пенициллином необходимо определить минимальную бактериостатическую (подавляющую) концентрацию (МПК) и минимальную бактерицидную концентрацию (МБК) препарата по отношению к возбудителю – золотистому стафилококку. Учесть готовые результаты. Сделать вывод. Оформить протокол.

М е т о д и ч е с к и е у к а з а н и я

В пробирки с 1 мл МПБ добавляют исследуемый антибиотик в различных концентрациях: от 1 до 128 ед/мл. Все пробирки засевают 1 мл бульонной культуры стафилококка. Посевы инкубируют в термостате при 37° в течение 24 ч. Учитывают результаты определения МПК.

МПК – это наименьшая концентрация антибиотика, при которой не происходит размножение бактерий и содержимое пробирки остается прозрачным.

Для определения МБК из пробирок с отсутствием видимого роста и из пробирки с минимальной концентрацией антибиотика, где есть рост (контроль) делают высев секторами в чашки Петри с МПА. На секторах обозначают концентрацию антибиотика, из которой сделан высев. Посевы ставят в термостат при 37°С на 18-24 ч. Учитывают результаты определения МБК по отсутствию роста бактерий на агаре в соответствующих секторах.

ПРОТОКОЛ

Цель:

Материал	Концентрация антибиотика в МПБ, ед/мл									Результат (МПК, МБК)
	128	64	32	16	8	4	2	1	К
Наличие роста микроба в МПБ
Наличие роста микроба при высеве на МПА

«+» – рост бактерий, «–» – отсутствие роста

Вывод: (Ответить на вопросы: 1. Чему равна МПК и МБК? 2. Почему МБК выше, чем МПК? 2. Может ли быть наоборот? Почему? 3. С какой целью поставлен контроль?)

_____________________________________________________________________________



занятие №10:	Микробиота организма человека Методы изучения и оценки микробиоценозов человека. Дисбактериозы
УЧЕБНАЯ Цель:	1. Изучить количественный и качественный составы нормальной микробиоты биотопов организма человека. 2. Овладеть основными методами лабораторной диагностики дисбиоза кишечника и принципами его коррекции.