- •Міністерство освіти і науки україни національний університет харчових технологій
- •Методи контролю біотехнологічних, фармацевтичних і харчових виробництв лабораторний практикум
- •Київ нухт 2014
- •Інструкція з охорони праці при проведенні робіт у навчальних лабораторіях кафедри
- •1. Загальні вимоги до техніки безпеки
- •2. Правила техніки безпеки
- •3. Вимоги безпеки у аварійних ситуаціях
- •4. Надання першої допомоги
- •5. Вимоги до оформлення лабораторних робіт
- •Лабораторна робота 1 розділення амінокислот методом тшх на силуфолових пластинках
- •Реактиви
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Розчинність речовин у воді при різних температурах (г/100 г h2o)
- •Залежність густини і концентрації розчинів NaCl від температури
- •Густина речовин
- •Залежність густини розчинів h2so4 від її масової долі у водному розчині при 25 °c
- •Хід роботи
- •Густина розчинів NaCl та kCl в г/см3, що відповідає різним концентраціям у %
- •Завдання на виконання
- •Контрольні запитання
- •Рекомендована література
- •Хід роботи
- •Завдання на виконання:
- •Контрольні запитання
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Закон Бугера – Ламберта – Бера. При прохожденні випромінення через розчин світлопоглинаючої речовини світловий потік слабшає.
- •Фотометричні методи аналізу
- •Залежність кольору речовини від довжини хвилі поглинутого світла
- •Приготування робочих розчинів для побудови калібрувальної кривої
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Рекомендована література
- •Матеріали та обладнання
- •Загальні відомості
- •Методом Лоурі
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •Рекомендована література
- •Лабораторна робота 8
- •Коефіцієнт молярної екстинкції деяких цитохромів
- •Хід роботи
- •Завдання для виконання
- •Контрольні запитання
- •3. Методи генної інженерії.
- •Рекомендована література
Закон Бугера – Ламберта – Бера. При прохожденні випромінення через розчин світлопоглинаючої речовини світловий потік слабшає.
Зниження інтенсивності світлового потоку залежить від концентрації поглинаючої речовини і довжини шляху, пройденого світловим потоком через розчин (визначається товщиною кювети). Ця залежність виражається законом Бугера - Ламберта - Бера.
Щоб врахувати втрати світла на відбиття та розсіяння в кюветі, порівнюють інтенсивність світла, що пройшло через досліджуваний розчин і розчин порівняння (розчинник). При однаковій товщині шару розчину в обох кюветах, виготовлених з одного матеріалу, що містять один і той же розчинник, втрати на відбиття та розсіяння світла будуть приблизно однакові і зменшення інтенсивності світлового потоку, що пройшов через розчин буде залежати тільки від концентрації речовини.
Якщо інтенсивність падаючого потоку позначити як Io, а інтенсивність світлового потоку, що пройшов через розчин як I, то відношення I/Io називають величиною пропускання і позначають як Т (0 Т 1) (рис. 6.4).
I
А= lg T = lg ---- = ∙ l ∙ C,
Io
де А - поглинання речовини, або оптична густина. Для абсолютно прозорого розчину А = 0, для абсолютно непрозорого – А .
Т - пропускання зразка, тобто відношення інтенсивності світла того, що пройшло через зразок, до інтенсивності світла, що падає;
I/Iо - молярна поглинальна здатність речовини;
C - концентрація речовини (моль/л);
l – товщина світлопоглинаючого шару (товщина кювети), см;
- молярний коефіцієнт поглинання або екстинкції.
Рис. 6.4. Проходження світлового потоку через кювету з розчином
Молярний коефіцієнт поглинання дорівнює оптичній щільності одномолярного розчину з товщиною поглинаючого шару 1 см. Молярний коефіцієнт поглинання - індивідуальна характеристика речовини, він залежить від природи речовини і довжини хвилі і не залежить від концентрації розчину і товщини кювети. Значення відображає здатність речовини поглинати світло. При визначенні приводиться чисельне значення величини .Максимально можливе значення складає 105.
Фотометричні прилади поділяються на 2 великі групи: фотоелектроколориметри і спектрофотометри (таблиця 6.1).
Таблиця 6.1
Фотометричні методи аналізу
Метод |
Тип приладу |
Робоча область спектру, нм |
Спосіб монохро-матизації |
Сигнали, що реєструє прилад |
Фото-метрія |
Фотоколо-риметр |
Видима 400–750 |
Светло-фільтри |
Оптична густина (А) і пропускання (Т) в діапазоні довжини хвилі сітлофільтра |
Спектро-фото-метрія |
Спектро-фотометр |
УФ і видима 100–750 |
Монохро-матор |
Оптична густина (А) і пропускання (Т) при фиксированіой довжині хвилі; спектри поглинання |
Фотоелектроколориметри застосовуються для визначення концентрації забарвлених розчинів за їх здатністю до світлопропускання (оптична густина) або оптичної щільності забарвлених розчинів.
Колір розчину пов'язаний з довжиною хвилі поглиненої частини світлового потоку (таблиця 6.2.).
Таблиця 6.2.