Детские инфекционные болезни

1. Правила забора материала для лабораторных исследований при инфекционной патологии у детей

Забор материала при брюшном тифе

Используется для диагностики многих болезней (дизентерия, брюшной тиф и др.). Для этого испражнения забирают из горшка, подкладного судна, предварительно продезинфицированных хлорной известью и хорошо промытых горячей водой. Кал может также забираться с помощью, стерильного ватного тампона или металлической петли непосредственно из прямой кишки. Из горшков кал забирается стерильным деревянным шпателем из разных мест исследуемой порции в количестве 1-2 г, причем по возможности отбирают слизь и гной (но не кровь).

Материал помещается в стерильную пробирку или баночку с консервантом. Консервант используют в тех случаях, когда материал нельзя доставить в лабораторию в ближайшие 2 ч. Забор материала может быть осуществлен и во время ректороманоскопии с помощью стерильного ватного тампона. Используется среда Плоскирева.

Забор крови на гемокультуру

В процедурном кабинете в стерильных условиях у больного берут в/в 5-10 мл крови, иглу прокаливают над спиртовкой. Предварительно необходимо получить в лаборатории стерильную среду во флаконе в объеме 50 - 100 мл.

Верхнюю бумажную крышку снимают, нижнюю прокалывают иглой и вводят кровь во флакон. Накрывают верхней крышкой, отправляют в лабораторию. Соотношение крови со средой 1:10. Используется среда Раппопорта или желчный бульон.

Уринокультура

Берут мочу в количестве 20 - 30 мл из стерильного горшка из средней порции. Переливают в стерильную банку и отправляют в лабораторию.

Биликультура

Берут из трех порций желчи при дуоденальном зондировании в стерильные пробирки в количестве 2 - 3 мл предварительно обработав зонд спиртом.

Забор материала из розеол.

Кожа обрабатывается спиртом. Туберкулиновым шприцом вводят в розеолу 0,1 мл физиологического раствора, затем набирают обратно в шприц 0,1мл.

Правила забора и доставки материала при менингококковой инфекции

Мазок из зева

Берут натощак или через 2 часа после еды изогнутым шпателем с задней стенки глотки. У постели больного в чашку Петри (из термостата) вначале тампон прикладывают всеми сторонами к среде в центре чашки, затем штрихообразными движениями распределяют посев по всей поверхности.

Забор спинномозговой жидкости

Используют три стерильные пробирки (для бак исследования, для биохимического исследования, для клинического исследования), в каждую собирают 1,5 - 2,0 мл ликвора.

Забор крови на гемокультуру

В процедурном кабинете в стерильных условиях у больного берут в/в 5-10 мл крови, иглу прокаливают над спиртовкой. Предварительно необходимо получить в лаборатории стерильную среду во флаконе в объеме 50 - 100 мл. Верхнюю бумажную крышку снимают, нижнюю прокалывают иглой и вводят кровь во флакон. Накрывают верхней крышкой, отправляют в лабораторию. Соотношение крови со средой 1:10. Используется 1% кровяной агар.

Забор материала из петехий

Кожа обрабатывается спиртом. Туберкулиновым шприцом вводят в розеолу 0,1 мл физиологического раствора, затем набирают обратно в шприц 0,1 мл. При некрозе забор проводят микробиологической петлей в чашку Петри.Транспортировка при температуре 37,0 °С.

«Толстая капля» и мазок крови

Используются для диагностики малярии и возвратного тифа. Иглой-копьем разового пользования или толстой инъекционной иглой (стерильной) делается прокол кожи ногтевой фаланги IV пальца или мочки уха. Кожа на месте прокола обрабатывается спиртом и осушается сухим ватным шариком. Если кровь идет плохо, то надо руку опустить вниз. Выдавливать каплю нельзя, так как в этом случае с кровью выступит лимфа, что повлияет на результат исследования.

Для приготовления толстой капли первую каплю крови стирают сухим шариком, а ко второй капле прикасаются сухим обезжиренным стеклом в 2-3 местах и размазывают углом другого стекла каждый из полученных отпечатков круговыми движениями до того момента, пока диаметр капель не достигнет 10-15 мм. Для приготовления тонкого мазка к капле с края прикладывают предметное стекло, которое не должно касаться пальца. После этого стекло перевертывают каплей вверх, берут его в левую руку, а правой рукой приставляют под острым углом к капле шлифованное (или другое предметное) стекло и после растекания крови на месте соприкосновения стекол быстрым одномоментным движением размазывают кровь по поверхности предметного стекла.

Посев крови

Используется для диагностики многих инфекционных болезней, например тифо-паратифозных заболеваний. Для этого из локтевой вены с помощью шприца берут кровь в количестве 10-15 мл. После извлечения иглы из вены ее снимают стерильным пинцетом, а конец шприца обжигают над пламенем спиртовки (при отсутствии спиртовки можно зажечь на крышке стерилизатора кусочек ваты, смоченный спиртом) и выливают кровь во флакон с жидкой питательной средой (желчный, сахарный бульон). Соотношение крови и питательной среды должно быть не менее 1:10, чтобы исключить влияние бактерицидных свойств крови. Например, для объема крови в 10 мл надо взять 100 мл среды. При посеве крови нельзя допускать попадания посторонней микрофлоры из воздуха: перед процедурой медицинской сестре следует надеть маску, при сборке шприца в первую очередь на цилиндр нужно насадить иглу, после чего вставить поршень, продвинуть его до упора, не делая обратных движений. Флакон с засеянной питательной средой сразу отправляется в лабораторию. Если посев производится в вечернее или ночное время, когда лаборатория не работает, флакон ставится в термостат, имеющийся в отделении или приемном покое.

Кровь для серологических и биохимических исследований

Берут из вены натощак. Прокол вены делают иглой с достаточно широким просветом без шприца и выпускают кровь в пробирку. Насасывать кровь шприцем не рекомендуется из-за возможной травматизации эритроцитов и последующего гемолиза. На серологическое исследование кровь следует брать в стерильную пробирку. При этом для серологических исследований достаточно 3-5 мл крови, для биохимических - обычно больше, например, при вирусном гепатите 8-10 мл.

Методика забора материала для бактериологического исследования каловых масс при дисбактериозе

В практической работе о состоянии НБК в основном судят по методу Ф.Л.Вильшанской (1970) позволяющему оценить изменения качественного и количественного состава микрофлоры фекалий определить количественно наличие бифидобактерий, лактобактерий, энтерококков, различных видов кишечных палочек, условно-патогенные бактерий и грибов.

Исследуемым материалом является кал после естественной дефекации; посуда для проб фекалий должна быть стерильной. Флаконы емкостью 10-20 мл. прозрачные, с плотно завинчивающейся крышкой стерилизуются автоклавированием, сухим жаром, газовой стерилизацией. Не следую обрабатывать посуду дезинфицирующими растворами и другими химическими веществами.

Забор материала производится стеклянной или деревянной палочкой из средней порции кала в количестве не менее 2 г. Материал следует доставлять в лабораторию в кратчайшие сроки, не позднее чем через 2 часа после забора пробы (интервал между забором пробы и началом посева не должен превышать 4 часа). С момента взятия пробы и до посева оптимальные условия хранения — в холодильнике.

Для полного количественного учета после тщательного эмульгирования пробы готовят серийные десятикратные разведения. Из полученных разведении делают посевы.

Забор мочи для бактериоскопичёского исследования.

Используется при подозрении на лептоспироз. Для этого собирают мочу в количестве 10 мл в стерильную посуду при естественном мочеиспускании. У женщин перед сбором мочи необходим туалет наружных половых органов.

Забор мочи для посева.

Используется для диагностики тифо- паратифозных заболеваний. Для этого мочу собирают в стерильные банки или флаконы в количестве 20-30 мл с помощью свежепрокипяченного резинового катетера после предварительного обмывания наружных половых органов дезинфицирующим раствором, например перманганата калия. У мужчин мочу можно брать при естественном мочеиспускании без катетера после обработки головки полового члена дезинфицирующим раствором. При этом для исследования берется вторая порция мочи.

Забор испражнений для посева

Забор испражнений для посева. Используется для диагностики многих болезней (дизентерия, брюшной тиф и др.). Для этого испражнения забирают из горшка, подкладного судна, предварительно продезинфицированных хлорной известью и хорошо промытых горячей водой. Кал может также забираться с помощью, стерильного ватного тампона непосредственно из прямой кишки. Из горшков кал забирается стерильным деревянным шпателем из разных мест исследуемой порции в количестве 1-2 г, причем по возможности отбирают слизь и гной (но не кровь). Материал помещается в стерильную пробирку или баночку с консервантом. Консервант используют в тех случаях, когда материал нельзя доставить в лабораторию в ближайшие 2 ч. Забор материала может быть осуществлен и во время ректороманоскопии с помощью стерильного ватного тампона.

При заборе материала тампоном больной лежит на боку с приведенными к животу бедрами и разводит руками ягодицы; тампон осторожно вводится небольшим вращательным движением в прямую кишку на глубину 6-8 см и так же осторожно вынимается, после чего помещается в стерильную пробирку. Высеваемость патогенных микроорганизмов возрастает, если посев испражнений производится непосредственно в отделении на плотные питательные среды (среда Плоскирева, Эндо и др.).

Мазки со слизистых оболочек зева и нёбных миндалин

Используются для диагностики дифтерии, менингококковой инфекции. Больной усаживается на стул против света; в рот вводится левой рукой шпатель и придавливается корень языка книзу и кпереди. Правой рукой в полость рта вводят стерильный тампон, не касаясь поверхности языка, и снимают тампоном налет и слизь с миндалин и дужек мягкого нёба. Для микроскопического исследования материал наносится тампоном на предметное стекло, обводится стеклографом и после подсушивания отправляется в лабораторию.

Для бактериологического исследования (посев) материал из зева на BL

Используются для диагностики дифтерии, менингококковой инфекции. Больной усаживается на стул против света; в рот вводится левой рукой шпатель и придавливается корень языка книзу и кпереди. Правой рукой в полость рта вводят стерильный тампон, не касаясь поверхности языка, и снимают тампоном налет и слизь с миндалин и дужек мягкого нёба на границе между нормальной и измененной тканью. В качестве консерванта используют глицерин и физиологический раствор. Предварительный ответ приходит через 24 часа, ответ на токскигенность "+" через 48 часов, "-" через 72 часа.

Забор материала для иммунофлюоресцентной микроскопии

Мазки-отпечатки. Используются для диагностики гриппа и острых респираторных заболеваний в ранние дни болезни. До взятия материала полость носа освобождается от слизи, затем увлажненный физиологическим раствором ватный тампон небольшого размера вводится в носовой ход на 2-3 см и прижимается к нижней носовой раковине, после чего тампоном делаются отпечатки на обезжиренном Эфиром предметном стекле. Мазки подсушиваются и отправляются в лабораторию. Мазки могут приготовляться и в лаборатории после соответствующей обработки тампонов.

Смывы

Натощак деревянной палочкой со стерильным ватным тампоном берут мазок с задней стенки глотки. Помещают в стерильный флакончик от пенициллина, обламывают палку на уровне тампона. Больному дают 20 - 30 мл кипяченой воды, просят прополоскать рот. Затем ребенок сплевывает воду в стерильную банку с широким горлом. Эту воду наливают во флакончик с тампоном (на 2/3). Закрывают стерильной ватой, помещают в термос со льдом и отправляют в лабораторию.

Забор желчи на посев

Желчь на посев собирается во время дуоденального зондирования в стерильные пробирки (раздельно порции А, В и С). Перед заполнением пробирок кончик зонда протирается ватой, смоченной в спирте. Посев желчи используется для контроля бактериологического очищения реконвалесцентов, перенесших брюшной тиф, паратифы А и В, сальмонеллез.

Забор рвотных масс на посев

Используется для диагностики пищевых токсикоинфекций и холеры. Для этого рвотные массы собирают в стерильные банки или широкогорлые флаконы в количестве 50-150 г; отверстие банки или флакона закрывают целлофаном или плотной вощаной бумагой и направляют в лабораторию. Промывные воды желудка собираются аналогичным образом, но промывание следует производить кипяченой водой без применения антисептических средств, обладающих губительным действием на микробы (калия перманганат, и др.).