- •Http://vetfac.Nsau.Edu.Ru
- •Препараты живых микроорганизмов
- •Дифференциально-диагностические среды
- •Комбинированные дифференциально-диагностические среды (варианты 3-х сахарного агара)
- •Плотные элективные, дифференциально-диагностические среды для энтеробактерий
- •Обогатительные (накопительные) среды
- •Транспортные среды
- •Возбудители анаэробных инфекций
- •Биопроба при анаэробных инфекциях
- •Среды для выявления и дифференциации энтеробактерий при санитарно-микробиологических исследованиях
- •Лептоспироз
- •Кампилобактериоз
Дифференциально-диагностические среды
Дифференциально-диагностические среды Гисса (Цветной ряд)
Среда Кода для дифференциации энтеробактерий Среда Кесслера для Е.coli
Комбинированные дифференциально-диагностические среды (варианты 3-х сахарного агара)
Плотные элективные, дифференциально-диагностические среды для энтеробактерий
А. среда Эндо (малиновые колонии, часто с металлическим блеском, образуют лактозопозитивные E.coli; Б. Среда Плоскирева (желтые колонии образуют лактозонегативные Salmonella, тёмно-розовые колонии образуют E.coli).
В. Среда Левина Г. Висмут-сульфит агар
Д. Цитратный агар Симмонса Е. Хромогенный агар для дифференциации энтеробактерий
Обогатительные (накопительные) среды
Назначение – накопление искомых микроорганизмов перед высевом на плотную среду для выделения чистой культуры. Могут содержать элективный фактор для подавления роста сопутствующей микрофлоры или факторы роста, для поддержания роста требовательных микроорганизмов. Состав: Питательная основа; Элективный фактор (не всегда); Факторы роста (не всегда). Примеры:
Солевой бульон – обогатительная среда для стафилококков. Рост посторонней микрофлоры подавляется.
Селенитовый бульон – обогатительная среда для сальмонелл. Прочая кишечная микрофлора подавляется. Питательная основа - мясо-пептонный бульон, элективный фактор - селенит натрия.
Транспортные среды
Исследование объектов внешней среды
Золотистый стафилококк - Staphylococcus aureus
A.Мазок из чистой культуры S.aureus; B.Рост культуры S.aureus на МПА; С.Д.
C.Лецитиназная активность S.aureus на желточно-солевом агаре Чистовича;
Д.Нуклеазная активность S.aureus на ДНК-агаре
Е.Элективная среда для S. aureus – желточно-солевой агар с хлоридом
лития – среда Байрда-Паркера. Лецитиназная активность S. aureus – в виде зон помутнения вокруг колоний
Стрептококки - Streptococcus
А.
А.Str. agalactiae в мазке из молока (окр.по Граму)
Б. Str. pyogenes в мазке из гноя (окраска по Граму)
В. Str. equi – возбудитель мыта лошадей - в мазке из чистой культуры (окраска генцианвиолетом)
Г. Str.pneumoniae – возбудитель диплококковой септицемии – в мазке из крови (окраска по Граму)
Культурально-биохимические свойства стрептококков
Гемолиз культуры стрептококков на кровяном агаре (видны зоны просветления агара вокруг колоний).
СAMP-тест: проявление скрытой гемолитической активности культуры Str.agalactiae в виде эффекта «крыла бабочки» в зоне влияния культуры S. aureus
Синегнойная палочка - Pseudomonas aeruginosae
Мазок из культуры P.aeruginosae, окраска по Граму.
Образование сине-зеленого пигмента при росте P.aeruginosae на жидкой и плотной среде
ОФ-тест на среде Хью-Лейфсона Рост P.aeruginosae на кровяном агаре («радужный лизис»)
Возбудитель гнилостных процессов протей - Proteus vulgaris
Proteus vulgaris - полиморфные палочки, перитрихи, по Граму красятся отрицательно;
«Ползучий» рост Proteus vulgaris на пластинчатом агаре при «точечном» посеве в центр чашки;
Ферментация мочевины на среде Кристенсена.
С D
Образование сероводорода на среде «3-х сахарный агар Олькеницкого (3-я пробирка слева);
Рост Proteus vulgaris на кровяном агаре (вуалеобразная плёнка);
Возбудитель сибирской язвы - Bacillus anthracis
Сибирская язва у животных и человека
AБ
ВГ
B.anthracis в крови (окраска по на капсулу по Романовскому-Гимза);
Б. Культура B.anthracis (окраска по Граму);
Культура B.anthracis (окраска на спору по Трухильо);
Г. Культура B.anthracis (окраска на спору по Мюллеру).
Рост Bacillus anhtracis на кровяном агаре. Колонии в R-форме
Рост Bacillus anhtracis на мясо-пептонной желатине.
Выявление и идентификация Bacillus anhtracis МФА
ЛИСТЕРИОЗ
Возбудитель листериоза – Listeria monocitogenes
А Б
А. L. monocytogenes в пат. материале; Б. Культура L.monocytogenes, окраска по Граму.
ВГ Д
Рост культуры Listeria monocitogenes на плотных питательных средах: В.МПА; Г.PALCAM-агаре; Д.кровяном агаре.
В. Г.
В.CAMP-тест (проявление скрытой гемолитической активности Listeria monocitogenes в виде феномена «крыла бабочки» (3). Г. Тест на выявление лецитиназой активности листерий на лецитиново-угольном агаре.
ПАСТЕРЕЛЛЁЗ
А. Б.
А.Пастереллёз -холера кур Б.Поражение лёгких при пастереллёзе
Возбудитель пастереллёза – Pasteurella multocida
В. Г.
В. Биполярно окрашенные пастереллы в крови (окраска по Михину); Г. Пастереллы в крови (окраска по Романовскому-Гимзе).
Д.Е.
Д. Pasteurella multocida, окраска по Граму (рисунок); E. Рост культуры Pasteurella multocida на кровяном агаре.
РОЖА СВИНЕЙ (Эризипелоид)
Возбудитель рожи свиней – Erysipelothrix rusyopathiae
БРУЦЕЛЛЁЗ
А.Б.
В.Г.
Д.
А.Brucella abortus в патологическом материале, окраска по Козловскому. Б.Культура Brucella melitensis, окраска по Козловскому. В. Рост Brucella sp. на плотной питательной среде. Д. Колонии Brucella sp. на плотной питательной среде.
Е. Выявление бруцелл в мазке методом флюоресцирующих антител.
СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЁЗА
А. ПОСТАНОВКА РАЗВЕРНУТОЙ РА; Б. Постановка РБП в лунках;
СХЕМА ПОСТАНОВКИ РСК
ТУЛЯРЕМИЯ (чума зайцев)
Туляремия – антропозоонозная болезнь. Переносчиками могут быть членистоногие.
Возбудитель туляремии – Francisella tularensis
А.Б.
А. Francisella tularensis, чистая культура, окраска по Романовскому-Гимза
Б. Идентификация Francisella tularensis в мазке из патологического материала или культуры при помощи МФА.
Культуральные свойства Francisella tularensis. Рост на среде Френсиса
ТУБЕРКУЛЁЗ
Положительная туберкулиновая проба у коровы; туберкулёзное поражение лёгких;
Возбудитель туберкулёза в мазке из пат. материала. Окраска по Цилю-Нильсену.
А. Б.В.
А. Рост Micobacterium bovis на среде Петраньяни; Б. Рост микобактерий на среде Гельберга; В. Определение «Корд-фактора» патогенных микобактерий.
Колонии микобактерий на плотных питательных средах;
ПАРАТУБЕРКУЛЁЗНЫЙ ЭНТЕРИТ
Паратуберкулёз у крупного рогатого скота (истощение, хроническая диарея).
Изменения в тонком кишечнике К.Р.С. при паратуберкулёзе (складчатость)
Micobacterium paratuberculosis в мазке из патологического материала. Окраска по Цилю-Нильсену.
АНАЭРОБНЫЕ ИНФЕКЦИИ
А.Б.
В. Г.
Д.Е.
А. Cl.perfringens в патологическом материале, окраска по Граму
Б. Cl.perfringens, культура, окраска по Граму
В. Cl.chauvoei в патологическом материале, окраска по Романовскому-Гимза
Г. Cl.septicum в патологическом материале, окраска по Мюллеру
Д. Cl.nonyi в патологическом материале, окраска по Граму.
Е. Cl.tetani в патологическом материале, окраска по Мюллеру.