Вопрос 4Строение хромасом. Кариотип. Идиограмма. Уровни упаковки хромасом эукариот.

ХРОМАСОМА - это молекула ДНК в комплексе с белком, образующим ее упаковку.

Кариотип – совокупность пизнаков полного набора хромасом, пресущая клеткам данного биологического вида.

ИДИОГРАММА – схематичное изображение гаплоидного набора хромасом организма, которые распологаются в ряду в соответсятвии с их размерами.

Каждая хромасома состоит из 2 храматид. Хроматиды соедениниы в области центромеры. концевые участки хромасом называются теломерами- они препятсятвуют слипанию хромасом. участки между теломерой и центромерой называются плече.

В зависимости от расположения центромеры различают следующие типы хромасом:

1. Метацентрические – центромера расположена по середине, плечи примерно равны. (q/p=1- 1,3)

2. СУБМЕТАЦЕНТРИЧЕСКИЕ – центромера смещена от середины, плечи разной длинны. (q/p=1,3-3,0)

3. АКРОМЕТАЦЕНТРИЧЕСКИЕ – центромера очень смещена от середины. (q/p >3,0)

(где p- длинное плече.

q- короткое плече.)

Уровни упаковки хромасом эукариот:

1. ПЕРВИЧНАЯ СТРУКТУРА - последовательность НУКЛЕОТИДОВ в цепи ДНК .Полимерная цепь образуется за счет 3’-5’-фосфодиэфирной связи между 3’-гидроксилом одного нуклеотида и 5’-гидроксилом другого.

2. ВТОРИЧНАЯ СТРУКТУРА ДНК – свёрнутые в спираль ДВЕ комплементарно взаимодействующие и антипараллельные полинуклеотидные цепи. Вторичная структура образуется при проявлении эффектов КОМПЛЕМЕНТАРНОСТИ.

3. ТРЕТИЧНАЯ СТРУКТУРА ДНК многократная спирализация ДНК сопровождается образованием комплексов с белками . спирализованная двунитевая ДНК оборачивает гистоны Н2а+Н2b+H3+H4 двумя витками происходит сокрашение длинны в 7 раз. тдельно –дополнительный гистон Н1. Всё вместе - ХРОМАТОСОМ

4. ВИНТООБРАЗНАЯ СТРУКТУРА и как результат компактный хроматин.

2 типа хроматина :

1. ЭУХРОМАТИН – упакован менее плотно, генетически активен.

2 ) ГЕТЕРОХРОМАТИН упакован более плотно, генетически не активен в связи с высокой спирализацией .

Вопрос 5приготовление хромасомных препоратов. Использование Колхицина. Гипотония, фиксация и окрашивание. Дифференциальное окрашивание хромосом.

Приготовление хромасомных препаратов:

1. для определения человеческого кариотипа используется одноядерные лейкоциты.

2. плазму отстаивают. помещают в питательную среду

3. при добавлении колхицина происходит остановка деления клетки на стадии метафазы( колхицин разрушает или блокирует веретено деления)

4. получившиеся клетки фексируют либо гипотоническим шоком( происходит набухание) или жидкостью Корнуа( смесь ледяной уксусной кислоты и спирта)

5. окрашивают и фотографируют под микроскопом.

ОКРАШИВАНИЕ:

окрашивание происходит не равномерно, появляется полосатая структура в виде поперечных меток.

1. Q-окрашивание – исследуют под флюорисцентным микроскопом.

2. G-окрашивание – по РОМАНОВСКОМУ-ГИМЗЕ ( окрашивание с полосочками) как основной генетический метод

3. R-окрашивание – окрашивание красителями при увеличении температуры, окрашиваются участки не способные к окраске по РОМАНОВСКОМУ-ГИМЗЕ.

4. Т- окрашивание – анализ теломерных районов хромасом.

5. итд.

проводят анализ с выявлением внутрихромасомных перестроек и т д. Важно для медицины позволяет диагностировать хромасомные болезни.