Протокол лабораторная работа 4

Учреждение образования

«Белорусский государственный педагогический университет имени Максима Танка»

ПРОТОКОЛ

выполнения

лабораторной работы № 4

Маслянокислое брожение бактерий

по микробиологии

студента 3 курса группы 31

__________________________

ФИО

Минск 2012

Цель занятия. Изучить свойства микроорганизмов, осуществляющих маслянокислое брожение.

Материалы и оборудование.

На группу:

1.Клубни картофеля.

2. Мел.

3. Большие пробирки, ватные пробки, резиновые пробки.

4. Пипетки.

2. Спички, карандаш по стеклу.

3. Иммерсионное масло.

На рабочее место (на 2 человека):

1. Микроскоп.

2. Микробиологическая петля с петледержателем.

3. Спиртовка.

4. Предметные стекла.

5. Покровные стекла.

6. Прибор для окрашивания и промывания мазков.

7. Полоски фильтровальной бумаги.

8. Реактивы для окраски микробиологических препаратов.

9. 5% раствор хлорного железа.

Задачи.

1. Ознакомиться с основными видами микроорганизмов, осуществляющими маслянокислое брожение.

2. Создав элективные условия получить накопительную культуру бактерий рода Clostridium, осуществляющих маслянокислое брожение.

3. Провести исследование свойств бактерий, осуществляющих маслянокислое брожение.

Задание 1. Ознакомиться с основными видами микроорганизмов, осуществляющими маслянокислое брожение. Заполнить таблицу 1.

Вопрос	Правильный ответ (ответы)
Характерные признаки микроорганизмов рода Clostridium, осуществляющих маслянокислое брожение	А)Анаэробы Б)Подвижные В)Спорообразующие Г)Грамположительные Д)Грамотрицательные Е)Кокки Ж)Палочки
Для микроорганизмов рода Clostridium характерно наличие в клетках	А)Волютина Б)Гранулезы В)Крахмала
Элективные условия для выделения из окружающей среды микроорганизмов рода Clostridium, осуществляющих масляннокислое брожение, создают, используя следующие приемы	А) проведение пастеризации Б) нейтрализация среды В) создание анаэробных условий Г) использование гранулезы

Задание 2. Работа выполняется в 2 этапа.

Этап 1. Получить накопительную культуру маслянокислых бактерий.

1. Неочищенный картофель нарезать ломтиками, которые могут легко войти в пробирку.

2. Заполнить ими пробирку на 1/3 объема, добавить щепотку мела и заполнить водой почти до верха. Закрыть ватной пробкой.

3. Пробирки поместить в водяную баню при температуре 80⁰С на 10-15 мин.

4. Вынуть ватные пробки и быстро заменить их резиновыми, проводя последние через пламя спиртовки и обжигая край пробирок.

5. Затем пробирки закрыть пробками и ставить в термостат с температурой 35⁰С.

Элективные условия для прохождения в опыте маслянокислого брожения:

1) наличие крахмала как специфического источника углерода, который используется только микроорганизмами, содержащими фермент амилазу, вызывающую гидролиз крахмала до глюкозы;

2)  присутствие маслянокислых бацилл на поверхности картофеля;

3)  анаэробные условия под высоким столбиком жидкости;

4)  нейтральная среда за счёт внесения мела;

5)  пастеризация, позволяющая отделить маслянокислые бациллы от неспоровых форм.

Этап 2. Исследовать микроорганизмы маслянокислого брожения.

Задание 1. С помощью пипетки взять жидкость со дна пробирки, приготовить препарат «раздавленная капля» с добавлением раствора Люголя и «висячую каплю».

Культуру микроскопировать, в ней обнаруживается главным образом Clostridium pasteurianum – подвижные палочки с закругленными концами, одиночные и парные. В старых культурах у одного из концов клетки обнаруживается спора.

Задание 2. Исследовать спорообразование по Ауэски. Результаты занести в таблицу 1. Сделать рисунок.

Задание 3. С культуральной жидкостью проводят качественную реакцию на масляную кислоту. Для этого к 5 мл жидкости добавляют 2 мл 5%-ного хлорного железа. При нагревании образуется маслянокислое железо коричневого цвета.

Таблица 1.

Метод, использованный для изучения морфологии	Внешний вид препарата при микроскопировании	Вывод
1. «Висячая капля»
2. «Раздавленная капля» с раствором Люголя
3. Метод Ауэски для выявления спорообразования

Сделать обобщающий вывод по результатам исследования.