3 курс / Фармакология / Фармацевтическая_биотехнология_Технология_производства_иммунобиологических

 разработка и оценка способов получения питательных основ с учетом критерия технологичности и трудоемкости.

Для культивирования бифидобактерий будут использованы две среды: среда Блаурокка и казеиново-дрожжевая среда.

Среда Блаурокка. Для изготовления питательной среды используют экстракт говяжьей печени, полученный путем экстракции печени очищенной водой (при соотношении 1 : 1) с последующим кипячением в течение одного часа и стерилизацией при температуре (120 ± 1) °С в течение 20 минут при давлении 0,1 МПа. К экстракту печени прибавляют пептон (1,0 %), натрия хлорид (0,5 %), лактозу (1,0 %), агар-агар (0,2 %), цистеин (0,01 %); устанавливают рН таким образом, чтобы после стерилизации значение рН составляло (6,8 ± 0,3); кипятят, фильтруют и стерилизуют при 112 °С 30 минут при давлении 0,05 МПа. Среду хранят при температуре (6 ± 2) оС не более 2-х месяцев.

Казеиново-дрожжевая среда. Выбор казеиново-дрожжевой среды, прежде всего, связан с тем, что эта среда в значительной степени отвечает требованиям массового производства по совокупности биологических, технологических и экономических параметров. Для изготовления казеиноводрожжевой среды необходимы ферментативный гидролизат казеина и аутолизат пекарских дрожжей.

Гидролизата казеина получают путем проведения ферментативного гидролиза казеина поджелудочной железой при рН 8,0–8,2 и температуре (58–62) °С в течение 5–7 суток. В течение всего указанного срока значение рН поддерживается на указанном уровне. Начиная с 4-го дня, проводят определение аминного азота. Прекращение его нарастания свидетельствует о том, что процесс ферментативного гидролиза окончен. Содержание аминного азота в гидролизате казеина должно быть от 450 до 600 мг %. Прозрачную надосадочную жидкость отделяют и подвергают фильтрации. Гидролизат казеина подвергают стерилизации при температуре (120 ± 1) °С в течение 30 минут и давлении 0,11 МПа. Хранят гидролизат при температуре 2–10 °С.

Приготовление аутолизата пекарских дрожжей проводят путем лизи-

рования дрожжевых клеток при температуре 56–58 °С в течение 48 часов. К дрожжам прибавляют воду (в соотношении 1 : 4) и смесь стерилизуют при температуре 119–121 °С и давлении 0,11 МПа в течение 30 минут. Содержа-

ние аминного азота в аутолизате составляет 150–180 мг %. Хранят при температуре 4–10 °С не более 1,5 месяцев.

Приготовление казеиново-дрожжевой среды: ферментативный гидро-

лизат казеина, разведенный очищенной водой до содержания аминного азота (150 ± 10) мг % смешивают с дрожжевым аутолизатом (соотношение 1 : 2); прибавляют натрия хлорид (0,5 %); устанавливают рН таким образом, чтобы после стерилизации значение рН составляло (7,0 ± 0,2); кипятят, добавляют лактозу, агар-агар и цистеин. Смесь фильтруют и стерилизуют при температуре 119–121 °С и давлении 0,11 МПа в течение 30 минут.

3. Получение инокулята бифидобактерий.

Флакон или ампулу с лифилизированным штаммом бифидобактерий вскрывают в асептических условиях, вносят 2–5 мл среды Блаурокка. Растворяют содержимое флакона и осуществляют пересев на 2 пробирки, содержащие среду Блаурокка. Посевы инкубируют в термостате при температуре

(38 ± 0,5) °С в течение 24–48 часов.

На всех этапах производственного процесса проводят контроль стерильности материала, используя питательные среды для контроля бактерий и грибов.

Выросшую культуру бифидобактерий из пробирок пересевают в бутылки, содержащие 500–550 мл среды Блаурокка. Посевы второй генерации инкубируют при температуре (38 ± 0,5) °С в течение 20–24 часов. Далее, убедившись в чистоте культуры, производят пересев бифидобактерий из бутылок в биореактор, содержащий 9,0–9,5 л среды Блаурокка. Посевы инкубируют при температуре (38 ± 0,5) °С в течение 24–48 часов. Внешний вид выросшей культуры – рыхлый зернистый осадок. При микроскопии мазков, окрашенных по Грамму, видны характерные микробные клетки в виде беспорядочных скоплений.

По окончании контроля маточную культуру используют для производственного посева и получения жидкого полуфабриката бифидобактерий.

4. Получение жидкого полуфабриката бифидобактерий.

Производственную культуру выращивают методом глубинного культивирования в реакторах. Реакторы должны быть оснащены паровой рубашкой. В реакторе производят стерилизацию питательной среды. Биореактор обору-

Приготовление питательных сред

1-я генерация

24-48 часов при tº = 38 ± 0,5 ºС,

2-я генерация

40-48 часов при tº = 38 ± 0,5 ºС,

3-я генерация

24-48 часов при tº = 38 ± 0,5 ºС,

Производственная генерация

48-72 часа при tº = 38 ± 0,5 ºС,

Маркировка и упаковка препарата

Контроль качества готового препарата

Рисунок 12 – Схема получения различных форм препаратов, содержащих живые бифидобактерии

Испытания лиофилизированного препарата бифидобактерий про-

водят, используя следующие тесты:

1.Описание – кристаллическая или пористая масса различных оттенков бежевого или бело-серого цвета.

2.Растворимость – при растворении в 0,9 % растворе натрия хлорида из расчета 1 мл на одну дозу препарат должен раствориться в течение 5 минут с образованием непрозрачной гомогенной суспензии.

3.рН – 6,0 ± 0,5.

4.Потеря в массе при высушивании – не более 3,5 %.

5.Микробиологическая чистота – при микроскопии мазков, окрашенных по Граму должны обнаруживаться грампозитивные полиморфные палочки с бифуркацией на одном или двух концах. При посеве на средах не должен обнаруживаться рост грибов и бактерий.

6.Аномальная токсичность – контроль проводят пероральным введением белым мышам 1 дозы препарата.

7.Количество живых бифидобактерий в одной дозе – в одной дозе препарата не менее 107 живых бифидобактерий.

8.Активность кислотообразования бактерий – не менее 90 °Т.

Необходимо отметить, что большинство препаратов, содержащих про-

биотики, производят по аналогичной технологической схеме (см. рис. 12) с учетом определенных изменений: может варьироваться состав сред и условия культивирования, время и температура выращивания, состав криопротекторов и ряд других факторов. Методы контроля могут быть различны, но определяемые показатели достаточно близки. Мы считаем целесообразным привести несколько методов контроля препаратов пробиотиков, характеризующих специфическую активность препаратов: количество живых бактерий, активность кислотообразования и антагонистическую активность штаммов продуцентов. Приводим методы контроля ряда выпускаемых в Украине пробиотических препаратов, например, бифидобактерий, лактобактерий и аэрокков.

1. Количество живых лактобактерий в одной дозе.

Для определения количества живых лактобактерий в одной дозе препарата содержимое каждого флакона растворяют раствором 0,9 % натрия хло-

рида из расчета 1мл на 1 дозу. Полученную суспензию лактобактерий в объеме 1 мл переносят в пробирку с 9 мл 0,9 % раствора натрия хлорида, тщательно перемешивают, получая 1 дозу лактобактерий в 10 мл суспензии. Из этой пробирки получают последующие десятикратные разведения от 10-1 до 10-9. Из полученных разведений 10-6 и 10-7 высевают по 0,1 мл микробной суспензии на две чашки Петри со средой МРС-4. Биомассу втирают шпателем в питательную среду. После инкубирования при температуре (37 ± 1) °С в течение (44 ± 4) часов производят подсчет колоний живых лактобактерий. Проводят подсчет колоний для каждого разведения и вычисляют среднее арифметическое.

Пример расчета: (60 х 107 + 600 х 106):2 х 10 = 5,3 млрд (10 – учет степени разведения, т.к. высевали на чашку 0,1 мл). В одной дозе препарата должно быть не менее 4-х миллиардов живых лактобактерий.

2. Количество живых бифидобактерий в одной дозе.

Для определения количества живых бифидобактерий в одной дозе препарата содержимое каждого флакона растворяют раствором 0,9 % натрия хлорида из расчета 1мл на 1 дозу. Полученную суспензию бифидобактерий в объеме 1 мл переносят в пробирку с 9 мл среды Блаурокка, тщательно перемешивают, получая 1 дозу бифидобактерий в 10 мл среды. Из этой пробирки получают последующие десятикратные разведения от 10-1 до 10-9. Указанные пробирки инкубируют при температуре (38 ± 1) °С в течение 2–4 дней в зависимости от используемого штамма бифидобактерий. После окончания инкубации определяют разведение, в котором наблюдается рост колоний бифидобактерий в виде «зерен», «гвоздиков» и др. Препарат считается соответствующим, если рост бифидобактерий в серии десятикратных разведений определяется не менее чем в пробирке с разведением 10-7, что соответствует содержанию 107 живых бифидобактерий в одной дозе.

3. Определение активности кислотообразования бактерий.

Определение проводят титрометрическим методом при выращивании бактерий в соответствующих питательных средах. К высушенному препарату пробиотика прибавляют культуральную среду (среду МРС-1 для лактобактерий или среду Блаурокка для бифидобактерий) из расчета 1 мл среды на одну дозу препарата.

Для лактобактерий: в 2-е пробирки с 25 мл среды МРС-1 вносят по 2,5 мл суспензии препарата. Смесь перемешивают и инкубируют в течение 48 часов при температуре (37 ± 0,5) °С. После окончания инкубирования определяют кислотность в каждой пробирке путем титрования 10 мл образца 0,1 моль/л раствором натрия гидроксида в присутствии индикатора фенолфталеина до величины рН – (8,5 ± 0,1). Вычисляют средний показатель из двух определений.

Для бифидобактерий: в 2-е пробирки с 25 мл среды Блаурокка вносят по 2,5 мл суспензии препарата. Смесь перемешивают и инкубируют в течение 72 часов при температуре (38 ± 0,5) °С. После окончания инкубирования определяют кислотность в каждой пробирке путем титрования 10 мл образца 0,1 моль/л раствором натрия гидроксида в присутствии индикатора фенолфталеина до величины рН – (8,5 ± 0,1). Вычисляют средний показатель из двух определений.

Кислотность в градусах Тернера (°Т) определяют по формуле:

°Т = А · к · 10,

где А – количество мл раствора натрия гидроксида, израсходованное на титрование;

к – поправка к титру раствора натрия гидроксида.

Активность кислотообразования для лактобактерий – не менее 200 °Т, для бифидобактерий – не менее 90 °Т.

4. Определение антагонистической активности штаммов пробиоти-

ков.

Для определения антагонистической активности препаратов пробиотиков используют соответствующие каждому препарату тест-штаммы. Тестштаммы должны обладать типичными морфологическими, серологическими, ферментативными свойствами и вирулентностью. Наиболее часто при контроле препаратов используют тест-штаммы следующих микроорганиз-

мов: Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Shigella sonnei, Shigella flexneri, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica и ряд других.

Антагонистическую активность штаммов пробиотиков проводят против тест-штаммов. Одним из методов является метод перпендикулярных штрихов на питательной среде в чашках Петри. На дно чашки Петри приливают молочно-растительную среду № 5 и петлей по диаметру чашки наносят культуру пробиотика (в случае контроля бифидобактерий для создания анаэробных условий можно использовать штамм B.seraceum marescens, посеянный на мясо-пептонный агар, налитый в крышку чашки Петри). Чашки с образцами бифидобактерий инкубируют при температуре (38 ± 1) °С в течение 72 часов. Затем осуществляют посев тест-штаммов в направлении от зоны роста бифидобактерий, не касаясь культуры и перпендикулярно к ней. Чашки инкубируют в течение 24 часов при температуре (38 ± 1) °С. Через 24 часа проводят учет антагонистической активности, который учитывается по величине зоны отсутствия роста тест-штаммов. Для каждого штамма пробиотика и каждой культуры тест-штамма устанавливается зона отсутствия роста, выраженная в мм.

5. Определение оксидазной активности аэрококков.

Оксидазная активность препаратов аэрококков определяется способностью бактерий в процессе роста окислять калия иодид до иода.

Лиофилизированный препарат разводят 0,9 % раствором натрия хлорида и проводят посев штрихом по диаметру чашки Петри, заполненной калия иодид-крахмальным мясо-пептонным агаром. Ширина штриха при посеве петлей должна быть 5–7 мм. После инкубирования посева при температуре (36 ± 1) °С в течение 48 часов поверхность питательной среды обрабатывается раствором серной кислоты. Через 30 минут проводят измерение диаметра зоны темно-синего цвета, появившейся около штриха растущих бактерий. Диаметр зоны должен быть не менее 25 мм.

В табл. 17 приведены характеристики готовых препаратов «Бифидумбактерина», «Лактобактерина», «Колибактерина», «Бификола», «А-Бактерина».

Таблица 17 – Характеристика готовых лекарственных форм препаратов, содержащих пробиотики

Производство ряда других препаратов пробиотиков из различных бактерий осуществляется по вышеприведенной схеме. Так, например, для производства «Биоспорина» использована общепринятая схема получения препаратов пробиотиков: получение инокулятов культур; получение нативной биомассы; добавление криопротекторов и получение жидкой формы препарата; разлив препарата и его лиофилизация; герметизация готового препарата и его контроль в соответствии с нормативной документацией. Необходимо отметить, что использование двух технологических схем при получении «Биоспорина»: выращивание бактериальных культур на агаризованных питательных средах и выращивание глубинным культивированием на жидких питательных средах продемонстрировало идентичные результаты при сравнении образцов, полученных по двум схемам производства.

3.3.Препараты, содержащие штаммы пробиотиков и форма их выпуска

Прежде, чем перейти к описанию конкретных препаратов, содержащих пробиотики, необходимо отметить, что все препараты можно классифицировать как:

I поколение – монокомпонентные препараты, состоящие из одного штамма микроорганизмов – типичных обитателей кишечника (Бифидумбактерин, Лактобактерин, Колибактерин и др.);

II поколение – самоэлиминирующие антагонисты (Бактисубтил –

(B.cereus IP 5832), Лакбон – (B.coagulans), Флора-баланс – (Brevibaicllus l), Энтерол – (Saccharomyces boulardii) и др.;

III поколение – поликомпонентные препараты (симбиотики), состоящие из нескольких (от 2 до 30) штаммов бактерий (Бифилонг – 2 вида бифидобактерий B.bifidum и B.longum) или из нескольких видов бактерий (Ли-

IV поколение – комбинированные препараты (синбиотики), состоящие из штамма бактерий и ингредиентов, способствующих их росту, размножению и метаболической активности (Бифилиз – B.bifidum и лизоцим, Кипацид – L.acidophilus и комплексный иммуноглобулин, Биофлор – E. coli M-17, экстракты сои, овощей, прополиса) и др.;

V поколение – поликомпонентные комбинированные препараты, состоящие из нескольких видов бактерий и ингредиентов, способствующих их росту, размножению и метаболической активности (Бифиформ – B.longum,

Enterococcus faecium SF68) и др.

При конструировании лекарственной формы пробиотика необходимо учитывать форму его применения (оральную, энтеральную, ректальную, вагинальную, подкожную, накожную, на слизистую) и доставку в нужную зону организма (желудок, поджелудочная железа, тонкая, толстая или прямая кишка и др.), а также вид лекарственной формы (таблетки, капсулы, мази, спреи, суппозитории и др.). Конечный терапевтический эффект может быть усилен за счет количества клеток пробиотического штамма, выбор матрикса (носителя), увеличения реакционной площади контактной фазы локального и фазового депонирования. В качестве макроосновы препаратов целесообразно

использовать только биосовместимые, биодеградируемые, нетоксичные в процессе хранения материалы с крайне низкой иммуномодулирующей активностью. За последние годы наметился сдвиг в сторону создания аэрозольных препаратов, содержащих штаммы пробиотиков. На основе совершенствования технологических процессов активно внедряются в практику сорбированные пробиотики, в которых составляющие их основу бактериальные штаммы размещены на специальных субстанциях – сорбентах, способствующих транспортировке активного начала к месту назначения и усиливающих биологическую активность препаратов.

Необходимо отметить, что кроме традиционных форм выпуска про-

биотиков на рынке появились микрокапсулы этих препаратов. Проводят выращивание, например, бифидоили лактобактерий по известным схемам. Затем при температуре 8–16 °С проводят смешивание с наполнителем, в качестве которого используют гуммиарабик и олигосахариды. Дополнительно, в качестве наполнителя, можно вводить гидроксиаппатит и лактозу. Полученную суспензию подвергают высушиванию в распылительной сушке при температуре 60–80 °С. Получают препарат в виде микрокапсул размером от 30 до 50 мкм. Микрокапсулы помещают в жесткие желатиновые капсулы.

Гуммиарабик – смола акации Сенегал, натуральный полисахарид. Это натуральное растворимое в воде волокно, не усваиваемое верхними отделами желудочно-кишечного тракта человека, в кишечнике полностью ферментируется бактериями, является субстратом для ацидо- и бифидобактерий. В процессе ферментации гуммиарабик вырабатывает органические кислоты (короткоцепочечные жирные кислоты), которые окисляют содержимое толстой кишки. Снижение рН подавляет размножение гнилостных и патогенных бактерий. Помимо этого короткоцепочечные жирные кислоты обладают целым рядом других биологических эффектов, таких как стимуляция абсорбции воды и минералов, увеличение кишечной моторики или стимуляции механизма удаления поврежденных клеток. Стимулируя микробную сахаролитическую активность и окисляя содержимое ободочной кишки, гуммиарабик стимулирует процесс бактериальной детоксикации и снижает производство токсинов и веществ, являющихся потенциально канцерогенными. Гуммиарабик улучшает моторику желудочно-кишечного тракта человека за счет эффекта увеличения биомассы.

За последние годы препараты пробиотиков приобрели новую форму выпуска – капсульную. Применяются биосовместимые и биодеградируемые полисахаридные и другие полимеры для защитного инкапсулирования пробиотиков и их структурно-функциональных компонентов, а также в качестве носителя. При попадании в желудок кислотоустойчивых капсул сохраняются фармацевтические свойства бактерий, то есть капсулы способны защищать бактерии от влияния желудочного сока на протяжении 4 часов при кислых значениях рН. В 12-перстной кишке капсулы растворяются, бактерии регидратируются и начинают размножаться благодаря наличию в капсулах питательных веществ. Бактерии подавляют рост патогенных микроорганизмов за счет выработки антибактериальных субстанций, в том числе молочной, уксусной и других кислот.

Возможна естественная ковалентная иммобилизация пробиотиков на носителях с использованием собственных внутриклеточных поперечносшивающих метаболитов: оксиредуктаз, альдегидных и перекисных продуктов. Наиболее часто используются полимеры полимолочной кислоты, алгинатные гели, хитозаны и их комбинации с полимолочной кислотой. Получены сухие синбиотические микрокапсулярные (диаметр частиц 15–20 мкм) конструкции, защищающие штамм пробиотика в эмульсии и способные быстро высвобождать бактерии в условиях желудочно-кишечного тракта. В качестве стабилизирующих компонентов при микрокапсулировании используют лактозу (от 17 до 24 %), пептон (0,6–0,7 %), обезжиренное молоко.

Как показано на рис. 13, получение микрокапсул с живыми бактериями пробиотиков можно продемонстрировать на примере производства капсул с алгинатом натрия по экструзионной и эмульсионной технологиям. Альгинатные полисахариды, полученные из морских водорослей, превращаются в гель в присутствии поливалентных катионов, например, кальция, и поэтому применяются для мягкой иммобилизации бактерий.

Использование двух методов получения микрокапсул, содержащих бактерии, имеет как положительные, так и отрицательные характеристики. Так, экструзионная технология – более трудоемкий процесс, но менее затратный, чем использование эмульсионного способа. Выживаемость бактерий в обоих случаях составляет 80–95 %. Размер частиц при получении путем экструзии – 2–5 мм, а эмульсионным способом составляет 25 мкм – 2 мм.

рехода к активному физиологическому состоянию, что не требуется при использовании жидких форм пробиотиков. К недостаткам таких препаратов можно отнести короткий срок хранения – от 40 до 90 суток.

Обычно при приеме бифидобактерий в сквашенном молоке они сохраняют жизнеспособность, проходя через желудок в кишечник, и определяются через 8 часов после приема в дистальных отделах подвздошной кишки в количестве, составляющем 34–37 % от общего количества бифидобактерий. Принятые перорально однократно бифидобактерии появляются в фекалиях на второй день, достигая стабильного уровня на третий день. При многократном приеме бифидобактерий их выделение с фекалиями увеличивается примерно в 30 раз. Примером жидкой формы препаратов, содержащих штаммы пробиотиков, может быть Нормофлорин–Д. В составе препарата – культуры лактобактерий (Lactobacillus casei) и бифидобактерий (Bifidobacterium longum и Bifidobacterium bifidum), пребиотик – лактит. Содержание живых пробиотических микроорганизмов составляет не менее 108–109 КОЕ/мл.

Сегодня нельзя обойти вниманием ещё одно направление – создание препаратов на основе бесклеточных компонентов пробиотиков. Некоторые производители препаратов пробиотиков предусматривают очистку от среды культивирования и метаболитов, что позволяет устранить неприятные вкус и запах, присущий пробиотикам, а также значительно уменьшить риск аллергических реакций. Однако высокая концентрация биологически активных компонентов, в число которых входят бактериоцины, протеазы и т.д., позволяют рассматривать культуральную жидкость пробиотиков как перспективный материал для разработки на его основе лекарственных препаратов. Бесклеточные продукты на основе пробиотических бактерий можно оценивать как разновидность пробиотических препаратов. Бесклеточный микробный пробиотический продукт – новое поколение пробиотических препаратов на основе метаболитов и структур пробиотических штаммов и изолятов. Разрабатываются принципиально новые метаболиты для пробиотиков, например, при одновременном участии лактобацилл, бифидобактерий и хозяина человека. Является перспективным использование бацилл и лактобацилл для получения белков и мощных ферментных систем. При конструировании пробиотического препарата возможен выбор эффекторных доминант: либо уникальных полифункциональных природных компонентов (например, надмолекулярных, микро- и наночастичковых), либо более низкомолекулярных

химически или генно-инженерно синтезированных компонентов без побочных эффектов, а также их сочетание. К низкомолекулярным эффекторам относятся антимикробные, антиоксидантные и стимулирующие олигопептиды, летучие жирные кислоты, олигосахариды и пептидогликановые фрагменты. Монокультуры лактобацилл лучше продуцируют бактериоцины, чем в смешанной культуре. Летучие жирные кислоты сигнальной природы усиливают эмульгирование, диспергирование, растворение и усвоение пищи в желудоч- но-кишечном тракте, что важно при дисфункции желчного пузыря. Универсальная функция бифидобактериальных и лактобациллярных гидролаз солей желчи способствует выживанию пробиотиков в желудочно-кишечном тракте. Супернананты культуральных жидкостей лактобацилл могут использоваться как антиаллергенные, например, в составе лекарственных мазей и кремов. В смешанной культуре бацилл и гриба возможно образование антидиабетических олигосахаридов из бетаглюканов гриба. Хорошо известным препаратом, содержащим продукты метаболизма бактерий, является препарат Хилак-форте. Это комбинированный препарат, содержащий продукты жизнедеятельности молочнокислых бактерий, грамотрицательных и грамположительных симбионтов тонкого и толстого кишечника, а именно Escherichia coli DSM 4087, Streptococcus faecalis DSM 4086, Lactobacillus acidophilus DSM 4149, Lactobacillus helveticus DSM 4183. Продукты Хилак-форте оказы-

вают благоприятное влияние на функцию слизистой оболочки кишечника и способствуют восстановлению нормальной микрофлоры кишечника. Жирные кислоты, содержащиеся в препарате, оказывают лечебно-профилактическое действие при инфекциях пищеварительного тракта, способствует всасыванию в кишечнике воды и электролитов.

Вместе с тем в последние годы при применении пробиотиков достаточно часто наблюдаются негативные реакции. Это выражается в снижении терапевтической активности при лечении больных, нестабильности результатов лечения, росте числа побочных эффектов, особенно в сенсибилизированном организме, поскольку гетерогенная микробная масса может оказывать значительную антигенную нагрузку на организм так же, как вещества, входящие в препарат. Помимо этого, имеют место сложности со стандартизацией этих препаратов, а также недостаточная их защищенность при приеме во внутрь от агрессивного воздействия защитных барьеров человека, в частности, содержимого желудка и 12-перстной кишки и даже самой кишечной

микрофлоры хозяина, видовой состав которой при болезни сильно изменен и проявляет агрессивность.

Внастоящее время наметился поворот от использования пробиотиков преимущественно с профилактической целью к активному их использованию

влечении инфекций желудочно-кишечного тракта, аллергических заболеваний и вирусных инфекций.

Втабл. 18 приведены наиболее часто применяемые препараты, содержащие штаммы пробиотиков.

Таблица 18 – Характеристика наиболее часто применяемых препаратов, содержащих штаммы пробиотиков

Продолжение таблицы 18

Продолжение таблицы 18

Продолжение таблицы 18