3 курс / Фармакология / Изучение_воздействия_абиотических_стрессовых_факторов

воздействий продемонстрировано изменение содержания веществ из группы убихинонов. Отмечено увеличение содержания витамина γ-токоферола в побегах в условиях стресса и снижение его концентрации в корне (рис. 13).

Примечание: Представленные значения являются средними (±SD). Разные буквы над столбцами обозначают значимые различия, *– статистически достоверные при p ≤ 0,05; n = 5 растение для всех вариантов обработки.

Рисунок 13 − Изменение содержания γ-токоферола у R. semenowii в условиях индуцированных стрессовых условиях.

Наблюдались колебания содержания фитостеролов, проявляющих высокую биологическую активность в различных физиологических процессах. Показано увеличение содержания β-ситостерола в корне при холодовом стрессе, образование γ-ситостерола с более высоким содержанием при холодовой обработке, чем при водном дефиците. Отмечено увеличение содержания всех выявленных эфиров жирных кислот в побеге в условиях изучаемых абиотических стрессов и снижение почти всех из них, кроме этилолеата, в условиях водного стресса в корне.

Фармакологическое действие БАВ R. semenovii определяется также содержанием в их составе альдегидов, гликозидов, спиртов, углеводородов, аминокислот и их производных [206], содержание которых также изменялось под влиянием стрессоров. Хотя в побегах R. semenovii содержание тетракозилацетата (восковые моноэфиры) экспериментально не было обнаружено, в корне мы отметили достоверное его снижение при водном дефиците и увеличение при холодовом стрессе (рисунок 14).

61

Примечание: Представленные значения являются средними (±SD). Разные буквы над столбцами обозначают значимые различия *– статистически достоверные при p ≤ 0,05; n = 5 растение для всех вариантов обработки.

Рисунок 14 − Изменение содержания тетракозилацетата в корне R. semenowii в условиях индуцированного стресса.

Экспериментально выявлено изменение содержания циклических пятичленных кетонов, лактонов и их производных в условиях стресса. При водном дефиците отмечена тенденция к увеличению содержания кетонов в корне, тогда как холодовой стресс вызывал снижение концентрации некоторых из них. В условиях водного дефицита выявлено увеличение психоактивного оксибутирата 2-Гидрокси-гамма-бутиролактона в корне и снижение его концентрации в условиях холодового стресса при полном отсутствии в стрессовых условиях в побеге. Особое значение в формировании направленности и специфичности фармакологического действия препаратов R. semenovii имеют производные фурана и пирана, содержащие активные спиртовые, альдегидные и кетоновые группы, которые также проявляют высокую биологическую активность [207]. Данные представлены на рисунке

15.

62

Рекомендовано для изучения сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Примечание: Представленные значения являются средними (±SD). Разные буквы над столбцами обозначают значимые различия *– статистически достоверные при p ≤ 0,05; n = 5 растение для всех вариантов обработки.

Рисунок 15 – Изменение содержания производных фурана в корне и побеге на примере 2(5H)-фуранона у R. semenovii в условиях индуцированного стресса.

Выявлено увеличение содержания производных бензойной кислоты ароматическая карбоновая кислота в корне в стрессовых условиях. Показано значительное увеличение содержания эфира гексадекановой кислоты при стрессах в побегах и появление в условиях водного дефицита в корнях. Отмечено значительное увеличение содержания диэтилоктилового эфира фосфорной кислоты в условиях осмотического стресса, а диэтилнонилового эфира фосфорной кислоты − в условиях холодового стресса в корне. Фенолы были представлены только в побеге в контрольных условиях и в корне на фоне водного дефицита.

Абиотические стрессы вызывали увеличение содержания дитерпеновых (фитолов) в побегах и тритерпеновых (сквалена) углеводородов как в корне, так и в побегах (рисунок 16).

63

Примечание: Представленные значения являются средними (±SD). Разные буквы над столбцами обозначают значимые различия *– статистически достоверные при p ≤ 0,05; n = 5 растение для всех вариантов обработки.

Рисунок 16 – Изменение содержания сквалена в R. semenovii в условиях индуцированного стресса.

Следовательно, накопление сквалена как в побегах, так и в корнях можно рассматривать как адаптивную реакцию на стресс у видов R. semenovii.

В целом, по результатам эксперимента можно говорить о неспецифичности многих физиологических и фитохимических реакций растительных тканей R. semenovii на действие внезапного холода или водного стресса.

Таким образом, впервые проведено детальное изучение химического состава этанольного экстракта корней и побегов R. semenovii в условиях действия абиотических стрессов, которое позволяет констатировать, что антиоксидантная система в тканях растений является многокомпонентный и включает вторичные метаболиты. Все компоненты находятся в функциональном взаимодействии и обусловлены адаптивными стрессовыми реакциями организма.

Результаты, полученные для метаболитов, являющихся лекарственными биологически активными веществами, полезны как для понимания механизмов защиты от неблагоприятных условий, так и для будущих подходов к направленному синтезу вторичных метаболитов, ценных для фармацевтического применения.

3.2.2 Анализ общей и специфической токсичности химических фракций из растения R. semenovii

В таблице 7 представлен процент выживаемости животных при определении острой токсичности, в зависимости от дозы экстракта R. semenovii.

64

Рекомендовано для изучения сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

Таблица 7 – Процент выживаемости животных (крыс) в опыте по определению острой токсичности экстракта Rhodiola semenovii при дозировке 0,5 и 1,0 г

Примечание: *– выбыло из опыта из-за драки и повреждений на теле

В обоих группах отмечена 100%-ная выживаемость, только 10% животных выбыли из опыта из-за драки и повреждений на теле, из чего следует, что экстракт R. Semenovii, вводимый как дозе 0,5 г, так и в дозе 1,0 г не вызывает гибели животных и не является токсичным.

Из данных, представленных в таблице 8 следует, что общее количество лейкоцитов, моноцитов, эозинофилов, базофилов и нейтрофилов и по уровню гемоглобина не имело статистически достоверных изменений как в контрольной группе, так и в группе острой токсичности.

Таблица 8 − Гематологические показатели крыс в эксперименте по острой токсичности экстракта R. Semenovii при дозировке 0,5 и 1,0 г

65

Продолжение таблицы 9

Примечание: *– статистически достоверные изменения в группе 1 по отношению к контрольной группе, при p≤ 0.001; **– статистически достоверные изменения в группе 2 по отношению к контрольной группе, при p ≤ 0.001

АлТ – аланинаминотрансферaза, АсТ – аспартатаминотрансферaза, ЩФ-щелочная фосфатаза

Для изучения хронической токсичности экстракта R. semenovii был проведен тест ВНД – «Открытое поле» (Таблица 10).

Таблица 10 – Значения масс животных и массовые коэффициенты органов в опыте хронической токсичности экстракта R. Semenovii при дозировке 1,0 г

Примечание: *– статистически достоверные изменения в группе «хроническая токсичность» по отношению к контрольной группе, при p≤ 0,005

В динамике наблюдения за поведением экспериментальных животных изменений не было выявлено. Отмечалось удовлетворительное состояние у всех животных на основании горизонтальной и вертикальной двигательной активности, отходов от стенки арены, выходов в центр арены, груминга. При внешнем осмотре на вскрытии не было выявлено изменений со стороны жизненно важных органов, а также пищеварительной, дыхательной, выделительной систем.

Согласно представленным в таблице 10 данным по массам внутренних органов экспериментальных животных, в сравнении с контрольной группой у группы опыта хронической токсичности статистически достоверных изменений (p ≤ 0,001) не выявлено. Отмечался статистически достоверный (p ≤ 0,001) рост массы животных от (238,5±8,2), до (274,0±11,7), без изменения массы органов,

67

Продолжение таблицы 12

Примечание: *– статистически достоверные изменения в группе «хроническая токсичность» по отношению к контрольной группе, при p ≤ 0,005

АлТ – аланинаминотрансферaза, AST – аспартатаминотрансферaза

Согласно данным, представленным в таблице 11, выявлено наличие статистически достоверных различий (p≤0,001) по показателям содержания непрямого билирубина, который в контрольной группе составил (7,2±6,4 мкмоль/л), в опытной группе (4,3±0,7мкмоль/л) и аланинаминотрансферазы в контрольной группе – (23,0±3,6МЕ/л), в опытной (21,4±3,4МЕ/л.) Статистический достоверные изменения были выявлены и по показателям аспартатаминотрансферазы составляющий у контрольной группе животных (11,5±1,9МЕ/л), тогда как в опытной группе присутствует снижение на (10,7± 1,9МЕ/л). В остальных показателях статистически достоверных различий (p ≤ 0,001) не выявлено. Для оценки состояния липидного обмена и функции поджелудочной железы были проведены биохимические исследования крови экспериментальных животных. Данные представлены в (Табл. 13)

Таблица 13 – Показатели липидного обмена при хроническом введении экстракта R. semenovii при дозировке 1,0 г

Примечание::*– статистически достоверные изменения в группе «хроническая токсичность» по отношению к контрольной группе, при p ≤ 0,005

Анализ показателей липидного обмена, представленный в таблице 14 продемонстрировал отсутствие статистически значимых изменений.

Из результатов, представленных в таблице 14, следует, что статистически достоверные изменения (p ≤ 0,001) были выявлены по показателю общего белка, который в контрольной группе составил (66,0±2,4г/л), тогда как в опытной (64,7 ±2,3г/л).

Однако все эти данные находились в пределах физиологической нормы. По остальным биохимическим показателям крови статистически достоверных изменений выявлено не было.

69