3 курс / Фармакология / Диссертация_Потапова_А_А_Нефро_и_гепатозащитное_действие_сухого

121

кверцетин в концентрации 2,063×10-5 М - на 7%. Торможение гемолиза в максимальной изу-

ченных концентрациях для байкалина (9,5×10-5 М) составило 65%, для кверцетина (16,5×10-5

М) – 80%, а для -токоферола (23×10-5 М) – 98% (таблица 7.1.2).

Таблица 7.1.2

Влияние байкалина, кверцетина и -токоферола на пероксидный гемолиз, вызванный эр-

гокальциферолом

Примечание - n – количество проб для каждой концентрации

Рисунок 7.1. 3 – Зависимость процента торможения пероксидного гемолиза от концентрации байкалина в инкубационной среде

сравнима с флавоноидом кверцетином и витамином Е.

7.2 Изучение влияния курсового введения СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД здоровым животным на перекисное окисление липидов и систему антиоксидантной защиты в печени и почках

Для понимания того, каким образом байкалин в условиях организма, т.е. in vivo, препят-

ствует развитию окислительного стресса, изучения его антиоксидантной активности in vitro, а

также исследований, проведенных в условиях патологии, представляется недостаточным. Тем более что воздействие веществ на свободнорадикальные процессы при патологии, когда имеют место структурно-функциональные повреждения и нарушения метаболизма, может существенно отличаться от нормы.

В связи с этим, проведено изучение влияния СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД на системы ПОЛ/АОЗ при курсовом введении здоровым животным в терапевтических дозах в сравнении с хорошо изученным антиоксидантом – флавоноидом кверцетином, который также вводили в те-

рапевтической дозе – 85 мг/кг (см. подраздел 2.3.8). В качестве контролей служили животные,

которым вместо СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД вводили перорально (контроль1) или внутрибрюшинно

(контроль 2) эквиобъемное количество воды (здоровый контроль), контрольной группе 3 (кон-

троль3) вводили внутрибрюшинно только 2-ГП-β-ЦД в дозе 15 мг/кг. Значения показателей у этих животных достоверно не отличались от таковых у интактных крыс (см. таблицы А.2, А.4,

А.7, А.8 приложения А), поэтому их значения расценивались, как соответствующие норме.

Было установлено, что в почках крыс, получавших СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД, интенсив-

ность Fe2+-аскорбатиндуцированного ПОЛ в ПЯФ была достоверно ниже, чем у контрольных крыс на 36% и 35% соответственно. Содержание же ДК в гомогенатах почек было достоверно снижено только у животных, получавших СЭ-2-ГП-β-ЦД на 48% по сравнению с соответствую-

щим контролем (рисунок 7.2.1, таблица А.12 приложения А).

Интактные Контроль1 СЭ ШБ Контроль 3 СЭ-2-ГП-β-ЦД

*- достоверно по отношению к контролю1 (Р<0,05) тест Манна-Уитни, парный t-тест ∆ - достоверно по отношению к контролю 3 (Р<0,05) тест Манна-Уитни, парный t-тест

Рисунок 7.2.1 - Влияние курсового введения СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД в терапевтических дозах на интенсивность ПОЛ в почках крыс

124

Курсовое введение СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД не привело к изменению в почках активно-

стей ферментов АОС и содержания GSH, их значения достоверно не отличались от соответ-

ствующих контролей (таблица А.13 приложения А) и нормы (рисунок 7.2.2). Следует подчерк-

нуть, что активации ферментов Г-S-Т и Г-6-ФДГ у здоровых животных под влиянием СЭ ШБ не наблюдалось, как при пероральном, так и внутрибрюшинном введениях.

Рисунок 7.2.2- Влияние курсового введения СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД в терапевтических дозах на АОС почек крыс

При изучении влияния СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД на интенсивность ПОЛ и антиоксидант-

ную систему печени при курсовом введении здоровым животным установлено достоверное снижение интенсивности Fe2+-аскорбатиндуцированного ПОЛ в ПЯФ по сравнению с соответ-

ствующими контрольными группами на 52% и 37% соответственно. Содержание ДК в гомогена-

тах печени у животных, получавших СЭ ШБ, было снижено на 30%, а у животных, получавших СЭ-2-ГП-β-ЦД, уровень ДК достоверно не отличался от соответствующего контроля (рисунок

7.2.3, таблица А.11 приложения А).

*- достоверно по отношению к контролю 1 (Р<0,05) тест Манна-Уитни, парный t-тест ∆ - достоверно по отношению к контролю 3 (Р<0,05) тест Манна-Уитни, парный t-тест

Рисунок 7.2.3 - Влияние курсового введения СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД в терапевтических дозах на интенсивность ПОЛ в печени крыс

125

В результате курсового введения СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД достоверно повысилось в пе-

чени содержание восстановленного глутатиона на 40% и 51% соответственно в сравнении с контрольными группами (рисунок 7.2.4, таблица А.11 приложения А).

Интактные Контроль 1 СЭ ШБ Контроль 3 СЭ- 2-ГП-β-ЦД

*- достоверно по отношению к контролю 1 (Р<0,05) парный t-тест

∆ - достоверно по отношению к контролю 3 (Р<0,05) тест Манна-Уитни, парный t-тест

Рисунок 7.2.4 - Влияние курсового введения СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД в терапевтических дозах на АОС печени крыс

Активность ферментов АОС, таких как Г-S-Т, Г-6-ФДГ, каталаза, ГП и СОД, под влияни-

ем курсового введения исследуемых субстанций не изменилась по сравнению с интактными жи-

вотными (достоверно значимых различий при этом по сравнению с нормой не выявлено) и по сравнению с соответствующими контрольными группами (рисунок 7.2.4, таблица А.11 приложе-

ния А). Нужно отметить, что внутрибрюшинное введение только 2-ГП-β-ЦД (контроль 3 в дан-

ной экспериментальной серии) не оказало влияния на систему ПОЛ/ АОЗ как в печени (таблица А.11 приложения А), так и в почках (таблица А.12 приложения А).

Как видно из данных, представленных на рисунках 7.2.5-7.2.8 и в таблицах А.11 и А.12

приложения А, выявленные изменения в системе ПОЛ/АОС печени и почек при курсовом вве-

дении кверцетина носили такую же направленность, что и при введении СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-

ЦД: в почках выявлено снижение Fe2+-аскорбатиндуцированного ПОЛ в ПЯФ на 35% без изме-

нения содержания ДК (рисунок 7.2.5), а в печени наблюдалось как достоверное снижение Fe2+-

аскорбатиндуцированного ПОЛ в ПЯФ на 50%, так и содержания ДК на 35% (рисунок 7.2.7). В

отношении изменения показателей АОС у животных, которым вводили кверцетин, как и у жи-

вотных, которые получали СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД, выявлено достоверное повышение содержа-

ния GSH в печени на 27% (рисунок 7.2.8), тогда как остальные изученные показатели достоверно не отличались от соответствующего контроля 1 и нормы (интактные животные).

126

Интактные Контроль1 Кверцетин

*- достоверно по отношению к контролю1 (Р<0,05) тест Манна-Уитни, парный t-тест

Рисунок 7.2.5 - Влияние курсового введения кверцетина в терапевтической дозе на интенсивность ПОЛ в почках крыс

Рисунок 7.2.6 - Влияние курсового введения кверцетина в терапевтической дозе на АОС почек крыс

*- достоверно по отношению к контролю 1 (Р<0,05) тест Манна-Уитни, парный t-тест

Рисунок 7.2.7 - Влияние курсового введения кверцетина в терапевтической дозе на интенсивность ПОЛ в печени крыс

127

Рисунок 7.2.8 - Влияние курсового введения кверцетина в терапевтической дозе на АОС печени крыс

Таким образом, проведённое исследование по изучению влияния курсового введения СЭ ШБ, СЭ-2-ГП-β-ЦД и кверцетина на процессы ПОЛ и активность эндогенной АОС показало, что в организме животных регистрируется снижение интенсивности ПОЛ в печени и почках и повы-

шение содержания GSH в печени. Подавление накопления продуктов ПОЛ при введении СЭ ШБ и СЭ-2-ГП-β-ЦД является, скорее всего, проявлением прямого антиоксидантного действия бай-

калина, входящего в состав СЭ ШБ, в условиях in vivo. Подобные изменения, которые отмеча-

ются при введении кверцетина (вещества, для которого хорошо изучены и доказаны антиокси-

дантные свойства), могут быть подтверждением данного заключения.

7.3 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На основании исследований, проведенных в модельных системах in vitro, нами установ-

лено, что основной компонент СЭШБ байкалин, относящийся к флавонам, обладает антиокси-

дантной активностью в липосомальной системе при Fe2+- индуцированном ПОЛ сравнимой с кверцетином (IС50 21,7 × 10-6 М и 35,8 ×10-6 М соответственно), а, следовательно, способен либо связывать Fe2+, либо «гасить» липидные радикалы, а также байкалин обладает мембраностаби-

лизирующим действием сравнимым с кверцетином и -токоферолом по торможению перекисно-

го гемолиза эритроцитов (IС50 6,8×10-5 М, 9,7×10-5 М и 11,9×10-5 М соответственно), что свиде-

тельствует о способности байкалина проявлять свое действие в липидной фазе мембран.

Полученные нами результаты согласуются с известными в литературе сведениями о вы-

раженных антиоксидантных свойствах байкалина, изученных в разных системах in vitro. Так,