6 курс / Судебная медицина / Судебно_медицинская_экспертиза_отравлений_антихолинэстеразными_веществами
.pdf
В настоящее время лечебное действие армина широко изучается. Армии начали применять при миастении, дет ском параличе и при некоторых других заболеваниях. Армии вошел в медицинскую практику как средство про тив глаукомы. Армии обладает способностью вызывать сильный и стойкий миоз и снижать внутриглазное дав ление. При глаукоме он является более мощным лечеб ным средством, чем пилокарпин, фосфакол (минтакол), фурамон и др. С. И. Локтионов (1960) показал, что армии не обладает пря мым холиномиметическим действием на мышцу радужки, а миотический эффект обус ловлен аитихолинэстеразным действием.
Как было обнару жено И. В. Семеновым
(1958), армии |
в дозе |
0,4 мг/кг при |
внутри |
венном введении вызы вает полный бронхоспазм у кошки (рис. 23). Арминовый бропхоспазм не снимается, а только немного уменьшается перерез кой блуждающих нер вов; после их предвари тельной перерезки ми нимальная доза, вызы вающая полный спазм, не увеличивается, но только спазм развива ется медленнее. Отсюда
автор делает предположение, что наряду с антихолинэстеразным действием в механизме арминового бронхоспазма имеет значение и прямое холиномиметическое действие.
В проведенных нами опытах на кошках (Я. С. Смусин, 1963) армии вводили внутримышечно в дозах 0,75 мг/кг. Через 10—15 минут после введения наступали явления отравления в виде двигательной активности, агрессив-
109
ности, атаксии, дрожания, одышки, миоза, дефекации, мочеиспускания. Затем появлялись клонико-тонические судороги, фибриллярные сокращения, слюнотечение, сле зотечение. Обычно при резко выраженных явлениях от равления животные погибали.
Мы исследовали активность холинэстеразы крови, миокарда левого желудочка, ягодичных мышц, легких (краевые отделы), печени, коры больших полушарий го ловного мозга, хвостатого ядра, среднего мозга, мозжеч ка, продолговатого мозга, спинного мозга (шейный отдел).
Активность холинэстеразы определялась биохимиче ским методом Хестрина. Определения производили на фотоэлектроколориметре ФЭК-М.
Результаты проведенных опытов приведены в табл. 19 и на рис. 24. Из табл. 19 видно, что армии значительно угнетает активность холинэстеразы всех органов и тка ней, за исключением печени. Активность холинэстеразы печени (ложный фермент) не только не угнетается, а, на оборот, повышается на 41,4%. Этот результат является для нас неожиданным и трудно объяснимым. Полученные наблюдения требуют дальнейшего анализа. Имеются данные (Б. И. Кадыков, 1957), что при хроническом отравлении незначительными дозами ФОС стимули руется образование холинэстеразы печенью, что при водит к увеличению содержания энзима в крови и тканях.
Угнетение активности холинэстеразы периферических
тканей |
(миокард, мышечная ткань, легкие) составляет |
от 44,2 |
до 66,5% от исходной. Однако наиболее угне |
тение |
активности холинэстеразы происходит в крови |
и в |
центральной нервной системе: холинэстераза |
коры, хвостатого ядра, среднего мозга, мозжечка, про долговатого мозга, спинного мозга и крови угнетена на 64,6-79%.
Сильное угнетение активности холинэстеразы цент ральной нервной системы может быть объяснено тем, что армии находится в организме в виде незаряженного осно вания, проникающего из крови в мозг.
Отравление изомеркаптофосом и его метилсульфометилатом. Еще в 1939 г. Schweitzer, Stedman и Wright показали, что эзерин, содержащий третичный азот, в от личие от прозерина, содержащего четвертичный азот,
ПО
хорошо проникает в центральную нервную систему, где вызывает угнетение активности холинэстеразы и тем са
мым стаоилизацию ацетилхолина. Ути различия авторы объясняют тем, что вещества с третичным атомом азота
112
хорошо растворимы в липоидах, а потому способны про никнуть через клеточные мембраны. Наоборот, вещества с четвертичным атомом азота нацело ионизированы и пото му нерастворимые липоидах. Это лишает их способности проникнуть через липоидные мембраны клеток централь ной нервной системы. К аналогичным выводам пришли Koelle и Steiner (1956). Это явление имеет значение и для распределения в организме серусодержащих фосфорорганических соединений.
Не только теоретическое и фармакологическое, но и большое судебно-медицинское значение для посмертной диагностики представляет вопрос об общих закономер ностях в изменении центрального и периферического дей ствия при переводе третичных аминов в четвертичные аммониевые соединения, а также при превращении ве ществ с двухвалентной серой в соответствующие сульфониевые соединения.
В 1957 г. Э. В. Зеймаль, М. Я. Михельсон и Р. С. Рыболовлев обобщили большой фактический материал, по лученный в лаборатории, руководимой М. Я- Михельсоном, и охватывающий несколько групп веществ, различа ющихся как по химическому строению, так и по характеру действия на холинергические системы. Авторы при шли к выводу, что все холинолитические вещества с тре тичным азотом (хлоргидраты пентафена, дифазина, аль- фа-метилдифазина и арпенала) обладают выраженным центральным действием, в то время как йодметилаты и метилсульфометилаты во всех группах холинолитических веществ практически лишены центрального действия. Эти факты подтверждены и в клинике.
При изучении холиномиметических веществ, содержа щих азот, обнаружилась та же закономерность — при переводе третичного азота в четвертичный путем йодметилирования центральное действие их практически исчеза ет (Э. В. Зеймель, Р. С. Рыболовлев, 1957; Н. Я. Лукомская, 1957; А. С. Рыболовлев, 1953).
В отношении антихолинэстеразных веществ также имеются данные, что йодметилирование веществ группы эзерина и его синтетических заменителей приводит к ос лаблению и качественному изменению центрального дей ствия (Schweitzer, Stedman и Wright, 1939).
Для проверки этих данных мы сравнили антихолинэстеразное действие изосистокса и его метилсульфомети-
8 Я. С. Смусин |
I in |
лата, синтезированных Т. А. Мастрюковой в лаборатории, руководимой М. И. Кабачником.
Изосистокс (0,0-диэтил- S-бета-эти л мер каптоэтил фос
фат) содержит двухвалентную |
серу, а его метилсульфо- |
метилат — это сульфониевое |
соединение, содержащее |
трехковалентную серу, несущую на себе положительный заряд.
И з о с и с т о к с (изомеркаптофос)—слабо летучая бесцветная жидкость с неприятным запахом. В воде рас творим плохо. Растворы высоких концентраций могут быть приготовлены на органических растворителях. Мел кодисперсная водная эмульсия может быть получена с эмульгатором ОП-7.
Изосистокс обладает сильным контактным инсекти цидным действием, но очень опасен для человека и других теплокровных животных. Он способен проникать в орга низм через дыхательный и пищеварительный тракт, а так же всасываться через неповрежденную кожу. Так, ДЛ50 для крысы при пероральном введении равняется 2,5— 6,2 мг/кг, а при накожной аппликации — 8,2—14 мг/кг (Metcalf, 1957).
По данным Metcalf (1957), ДЛМ (минимальная ле тальная доза) тиолового изомера систокса для человека составляет приблизительно 20 мг/кг. Г. Л. Таранович (1956), изучавший токсичность изосистокса для мышей при подкожном введении, приводит следующие цифры: ДМП (максимально переносимая доза) равняется 5 мг/кг, ДЛ5 0 = 6,98 мг/кг, ДЛ,оо = 9 мг/кг.
Изосистокс сильно угнетает холинэстеразу. Концент рация, угнетающая истинную холинэстеразу на 50%, со-
114
ставляла в опытах разных авторов от 3-10 7М до
1,2-10 6 М.
При длительном хранении препарат спонтанно мети лируется по атому серы, находящемуся в бета-положении, который в результате приобретает положительный заряд.
М е т и л с у л ь ф о м е т и л а т и з о с и с т о к с а — си ропообразная масса, легко растворимая в воде. Очень сильное антихолинэстеразное вещество. По данным раз
ных авторов, J50 истинной холинэстеразы колеблется от 2-10-9М до 3,9-10-8М.
Сочетание сильного антихолинэстеразного действия с высокой растворимостью в воде позволило зарубежным авторам предложить этот препарат в качестве системно го (внутрирастительного) сельскохозяйственного инсекти цида.
Фармакологические свойства препарата впервые изу чались в лаборатории, руководимой М. Я- Михельсоном.
Мы определяли степень торможения холинэстеразы в мозгу и в мышцах при действии изосистокса и его метилсульфометилата (Я- С. Смусин, 1957). Соотношение степени торможения холинэстеразы в центральной нерв ной системе и в периферических тканях дает возможность судить о распределении изучавшихся антихолинэстеразных препаратов в организме.
Было установлено, что доза, вызывающая смерть в те чение первых суток у 50% мышей при подкожном введе нии (ДЛБО), оказалась для изомеркаптофоса равной 6,7 мг/кг, что почти соответствует данным Г. Л. Тарановича (1956), а для его метилсульфометилата—0,057 мг/кг, т. е. метилсульфометилат оказался в 118 раз токсичнее изомеркаптофоса.
Степень торможения холинэстеразы сравнивалась при действии равных по эффекту доз обоих веществ. При определении активности холинэстеразы по Платтнеру вводили дозы, соответствующие ДЛБО- Результаты опреде ления степени торможения активности холинэстеразы при
действии изомеркаптофоса и его |
метилсульфомети |
лата методом Платтнера приводятся |
в табл. 20 и на |
рис. 25. |
|
При действии изомеркаптофоса холинэстераза в моз гу и в мышцах угнеталась соответственно на 81 и 92,7% от исходного. Если у контрольных здоровых животных активность холинэстеразы мозга выше активности холин-
эстеразы мышц в 6,3 раза, то при отравлении изомеркаптофосом холинэстераза мозга оказалась активнее холинэстеразы мышц в 16,3 раза.
При действии метилсульфометилата изомеркаптофоса холин эстераза мышц угнета лась в 2,4 раза сильнее, чем холинэстеразная активность мозга. Если у контрольных живот ных холинэстеразная активность мозга в 6,3 раза выше, чем актив ность холинэстеразы мышц, то у животных, отравленных метилсульфометилатом изомеркаптофоса, холин эстеразная активность мозга в 30,1 раза выше активности мышц. Как видно из табл. 20, при действии метилсульфометилата изомеркаптофоса сильное угнетение активности холинэсте разы отмечено только в мышцах (снижение до 13,6% по сравнению с контролем), а в мозгу сохранилось 65,2% ак тивности энзима.
Таким образом, при отравлении мышей изомеркаптофосом отмеча лось угнетение актив
ности холинэстеразы головного мозга и мышечной ткани соответственно на 81 и 92,7%. При отравлении метилсульфометилатом изомеркаптофоса эти соотношения соответ ственно составили 34,8 и 86,4%.
То же подтвердилось и при исследовании гистохими ческим методом. Однако здесь для удобства сравнения
117
оказалось целесообразным вводить мышам не ДЛ50, a только 0,1 или 0,25 указанной дозы. При этом выяснилось, что изомеркаптофос сильно угнетает холинэстеразу и
вмышцах, и в мозгу, а метилсульфометилат изомеркаптофоса вызывает сильное угнетение холинэстеразы только
вмышцах, в то время как в мозгу холинэстераза остается хорошо выраженной (рис. 26, 27).
Таким образом, перевод серы из двухвалентной в трехковалентную при метилсульфометилировании изомеркаптофоса вызывает сильные изменения в распределении ве щества в организме. Эти изменения сходны с теми, которые происходят при метилсульфометилировании азот содержащих холинолитических и холиномиметических веществ: по-видимому, резко ослабляется проникновение этих веществ в центральную нервную систему.
Schweitzer и др. (1939) именно на примере антихолинэстеразных веществ показали, что перевод третичного
118