2 курс / Нормальная физиология / Практикум_по_нормальной_физиологии_Зинчук_В_В_,_Балбатун_О_А_,_Емельянчик

ПОКАЗАТЕЛИ СИСТЕМЫ КРОВИ ВЗРОСЛОГО ЧЕЛОВЕКА

11

ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ:

1.Ознакомление с контролирующе-обучающей программой в компьютерном классе кафедры (тренинг) и интернет-тестирование на WEB-странице кафедры: http://www.grsmu.by/faculties/hp/index.htm (компонент дистанционного обучения).

2.Инструктаж по технике безопасности и работа на ПК с контролирующе-обучающей программой по теме: "Техника безопасности".

3.«Форменные элементы крови» (видеофильм, 20 минут).

4.Подсчёт количества эритроцитов в периферической крови человека.

Эритроциты – красные кровяные тельца, имеющие форму двояковогнутого диска, не имеющие ядра и содержащие в своем составе гемоглобин. Количество эритроцитов у мужчин – 4,0-5,0× 1012/л, у женщин – 3,9-4,7× 1012/л. Увеличение количества эритроцитов в крови человека называется эритроцитозом, уменьшение их количества – эритропенией. Выделяют относительный и абсолютный эритроцитоз. Относительный – за счет потери плазмы и сгущения крови, при этом общее количество эритроцитов в организме остается в пределах нормы. Абсолютный – истинное увеличение количества эритроцитов, за счет усиленной их продукции костным мозгом. Эритропения также бывает относительной и абсолютной. Относительная – увеличение объема плазмы (разведение крови) без уменьшения общего количества эритроцитов. Абсолютная – уменьшение общего количества эритроцитов в результате усиленного разрушения эритроцитов или снижения их продукции костным мозгом.

Оснащение: микроскоп, кровь, капилляр от гемометра Сали, штатив с пробирками, 3% раствор NaCl, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.

Ход работы: в сухую, чистую пробирку наливают 4 мл 3% раствора NaCl для разведения крови. Кровь набирают в капилляр от гемометра Сали до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, тщательно перемешивают, достигая разведения в 200 раз. Затем суспензией эритроцитов заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет эритроцитов в 5 больших квадратах (разделенных на 16 маленьких квадратиков) расположенных по диагонали. При подсчете количества эритроцитов руководствуются правилом Егорова: «Относящимися к данному квадратику считаются эритроциты, лежащие как внутри квадратика, так и на его верхней и левой границе.

14

Эритроциты, лежащие на правой и нижней границе в данном квадратике не подсчитываются».

Количество эритроцитов (Эр) в 1 л крови рассчитывают по формуле:

Эр = А • 4000 • 200 × 106 , 80

где А – сумма эритроцитов в 80 маленьких квадратиках, 1/4000 мм3 – объем камеры Горяева над одним маленьким

квадратиком,

200 – разведение крови в 3% NaCl,

80 – число маленьких квадратиков, в которых подсчитывают эритроциты.

Результаты работы:

15

Вывод:

5. Подсчёт количества лейкоцитов в периферической крови человека.

Лейкоциты – белые кровяные тельца, имеющие ядро. Выделяют следующие формы лейкоцитов: гранулоциты – эозинофилы, базофилы, нейтрофилы. Агранулоциты – моноциты, лимфоциты. Увеличение количества лейкоцитов в крови человека – лейкоцитоз, уменьшение их количества – лейкопения. Различают физиологические лейкоцитозы: пищеварительный (возникает после еды), миогенный (при физической нагрузке), эмоциональный, при болевых воздействиях. В норме количество лейкоцитов в крови человека (4,0-9,0)× 109 /л.

Оснащение: микроскоп, кровь, капилляр от гемометра Сали, штатив с пробирками, 5% раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим, счетная камера Горяева с покровным стеклом, стеклянная палочка, ватные шарики, марлевые салфетки.

Ход работы: в сухую, чистую пробирку наливают 0,4 мл 5% раствора уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим. Кислота разрушает оболочки форменных элементов, а краска окрашивает ядра лейкоцитов. Кровь набирают в капилляр от гемометра Сали до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку, тщательно перемешивают, достигая разведения в 20 раз. Затем полученным раствором заполняют камеру Горяева и, поместив ее под микроскоп, производят подсчет лейкоцитов в 25 больших квадратах, каждый из которых условно состоит из 16 маленьких квадратиков.

Количество лейкоцитов (Л) в 1 л рассчитывают по формуле:

Л = В • 4000 • 20 × 106 , 400

где В – сумма лейкоцитов в 25 больших квадратах, 1/4000 мм3 – объем камеры Горяева над одним маленьким

квадратиком, 20 – разведение крови в 5% растворе уксусной кислоты,

400 – число маленьких квадратиков, в которых подсчитывают лейкоциты.

16

Результаты работы:

Вывод:

6.Определение концентрации гемоглобина в крови фотоколориметрическим методом.

Гемоглобин – сложный белок, состоящий из двух α- и двух β- полипептидных цепей каждая из которых содержит гем (Fe 2+). В физиологических условиях гемоглобин в крови содержится в виде оксигемоглобина, карбгемоглобина и восстановленного гемоглобина (дезоксигемоглобина). В норме концентрация гемоглобина у мужчин –

130-160 г/л, у женщин – 120-140 г/л.

Оснащение: фотоэлектроколориметр (ФЭК), кюветы, кровь, капилляр, две пробирки с 5 мл трансформирующего раствора (калий железосинеродистый, ацетонциангидрин, натрий двууглекислый), калибровочный график.

Ход работы: в капилляр набирают кровь до метки (0,02 мл) и добавляют в пробирку с 5 мл трансформирующего раствора (разведение 250 раз) и тщательно перемешивают. Через 10 минут смесь переливают в кювету и измеряют показания на ФЭК при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр). Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин, образующий с ацетонциангидрином окрашенный гемиглобинцианид, интенсивность окраски раствора пропорциональна количеству гемоглобина. Расчет содержания гемоглобина производят по калибровочному графику. Контрольная проба – трансформирующий раствор.

17

Результаты работы:

Вывод:

7.Расчет цветового показателя.

Цветовой показатель характеризует соотношение между количеством гемоглобина крови и числом эритроцитов. Цветовой показатель позволяет оценить степень насыщения эритроцитов гемоглобином. Цветовой показатель здорового человека равен 0,85-1,05. Если цветовой показатель выше нормы – гиперхромия. Если ниже нормы – гипохромия.

Ход работы: Цветовой показатель рассчитывают по формуле:

ЦП = Hb × 3 ,

Эр*

где Hb – концентрация гемоглобина, г/л;

Эр* – первые три цифры числа эритроцитов, если количество эритроцитов меньше 1,0× 1012 /л,то первые две цифры.

Результаты работы:

Вывод:

18

8.Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ).

СОЭ – показатель, характеризующий оседание эритроцитов крови при добавлении антикоагулянта. Главным фактором, от которого зависит СОЭ, является соотношение белковых фракций плазмы. Альбумины, имеющие самую мощную гидратную оболочку, уменьшают СОЭ. При увеличении содержания крупнодисперсных белков (фибриноген, глобулины) СОЭ увеличивается. Зависит СОЭ от заряда самих эритроцитов, чем слабее заряжены эритроциты, тем выше их способность к агрегации и СОЭ. Определяется СОЭ также размерами эритроцитов, чем меньше диаметр эритроцитов, тем выше СОЭ. В норме у мужчин СОЭ – 1-10 мм/час, у женщин – 2-15 мм/час.

Оснащение: штатив Панченкова, капилляры, кровь, 5% раствор цитрата натрия, часовое стекло, ватные шарики.

Ход работы: капилляр промывают 5% раствором цитрата натрия. Затем набирают цитрат натрия в капилляр до метки Р и выдувают на часовое стекло. В тот же капилляр двукратно набирают кровь до метки К. Обе порции крови выдувают на часовое стекло, тщательно смешивая с имеющимся там цитратом натрия. Полученную таким образом на часовом стекле смесь крови с цитратом натрия в соотношении 4 : 1 набирают в капилляр до метки 0 и ставят капилляр в штатив Панченкова. Через час оценивают высоту в мм образовавшегося слоя плазмы в капилляре.

Рекомендации к оформлению работы: зарисуйте прибор Панченкова, определите СОЭ исследуемой крови, сделайте вывод о соответствии данного результата с нормой и клиническом значении данного показателя.

Результаты работы:

Вывод:

19