2 курс / Нормальная физиология / ВИРТУАЛЬНЫЙ_ПРАКТИКУМ_ПО_НОРМАЛЬНОЙ_ФИЗИОЛОГИИ

Содержание гемоглобина в пробе крови может определяться при перемешивании крови специальной палочкой для разрушения или лизиса эритроцитов. Интенсивность цвета лизированной крови является результатом количества присутствующего в пробе гемоглобина. Гемоглобинометр позволяет сравнить цвет пробы со стандартной цветовой шкалой, чтобы определить содержание гемоглобина в пробе.

Гемоглобинометр пропускает зеленый свет через гемолизированную пробу крови. Количество света, которое проходит через образец, сравнивают с интенсивностью стандартного цвета. Зеленый свет используют потому, что глаз человека способен легко определить даже незначительные различия в зеленой цветовой гамме.

В меню «Эксперимент» выберите раздел «Определение гемоглобина». Перед Вами откроется экран с лабораторной работой (рис. 16). Используя обзорный экран, в меню, с использованием «Помощь», познакомьтесь самостоятельно с оборудованием для работы.

Рис. 16. Экран работы «Определение гемоглобина»

61

https://t.me/medicina_free

Вправом верхнем углу экрана находится полка с пятью образцами крови.

Всередине экрана помещается лабораторный стол и контейнер с палочками для гемолиза, которые используются для перемешивания образцов крови, чтобы лизировать эритроциты и освободить из них гемоглобин.

Влевом нижнем углу экрана находится распределитель чистых камер для анализа крови. В левой передней части экрана находится гемоглобинометр.

Теперь щелкните кнопкой «Зарегистрировать результат» рядом с табло результатов, которое находится в нижней части экрана. Табло покажет количество в граммах на 100 мл крови.

Внижнем правом углу экрана находится контейнер для удаления загрязнений. Вся стеклянная посуда и палочки для гемолиза, находившиеся в контакте с кровью, должны быть помещены в этот контейнер для обработки.

Практическая часть

Работа № 3. Определение гемоглобина

Для тестирования используется кровь следующих пациентов: Образец 1: здорового мужчины Образец 2: здоровой женщины

Образец 3: женщины с железодефицитной анемией Образец 4: мужчины с полицитемией

Образец 5: женщины – олимпийской чемпионки по легкой атлетике.

Ход работы:

1.Щелкните мышкой и переместите чистую камеру для крови от распределителя камер к лабораторному столу.

2.Щелкните по капельнице с образцом крови № 1 и переместите ее к углублению на камере. Капля крови будет помещена

ввыемку камеры.

3.Щелкните по гемолитической палочке и переместите к капле крови. Палочка будет перемешивать образец крови в течение 45 с, разрушая эритроциты и освобождая гемоглобин.

4.Переместите гемолитическую палочку к контейнеру для удаления загрязнений.

62

https://t.me/medicina_free

5.Переместите камеру для крови к темному прямоугольному отверстию на гемоглобинометре.

6.Вы можете увидеть, как внезапно появляется окно, показывающее внутреннее содержимое гемоглобинометра. Левая половина круглого поля демонстрирует интенсивность зеленого света, передаваемого образцом крови № 1. Правая половина круглого поля показывает интенсивность зеленого света для известных уровней гемоглобина, присутствующего в крови.

7.Щелкните по рукоятке, находящейся в верхнем правом углу гемоглобинометра и медленно перемещайте ее вниз, пока правая половина поля не достигнет зеленого оттенка, как на левой стороне поля.

8.Щелкните кнопкой «Зарегистрировать результат», которая расположена рядом с табло результатов. Искомая величина будет зафиксирована в граммах гемоглобина на 100 мл крови для первой пробы. Щелкните кнопкой «Х», чтобы закрыть окно гемоглобинометра.

9.Теперь щелкните кнопкой «Отдача», чтобы удалить камеру для крови с образцом № 1 из гемоглобинометра.

10.Переместите камеру с образцом крови № 1 в контейнер для удаления загрязнений.

11.Повторите этапы 1–10 для оставшихся образцов крови.

12.Заполните в своих отчетах таблицу 8, используя величины в граммах гемоглобина на 100 мл крови. Используя результаты указанного в таблице гематокрита, можно рассчитать соотно-

шение гематокрита к гемоглобину (калькулятор можно запустить в работу щелчком по клавише «Инструменты» в меню).

Отдельные индивидуумы могут иметь нормальные или почти нормальные значения и все-таки страдают от анемии, если эритроциты не содержат достаточного количества гемоглобина. Нормальное соотношение гематокрита к гемоглобину в граммах составляет ≈ 3:1.

13. На основании полученных результатов ответьте на поставленные вопросы и сделайте соответствующие выводы в своих отчетах.

Каким является значение нормального гематокрита у здорового мужчины?_______________________________________________

Каким является значение нормального гематокрита у здоровой женщины?_______________________________________________

63

https://t.me/medicina_free

Каким является соотношение гематокрита к Hb у женщин с железодефицитной анемией?_______________________________

Имеет ли мужчина с полицитемией нормальное соотношение гематокрита к Hb?_______________________________________

Основываясь на этих результатах, сделайте заключение: могут ли эритроциты у этих людей содержать достаточное количество гемоглобина? Почему? _______________________________

Имеет ли женщина – олимпийская чемпионка, нормальное соот-

ношение гематокрита к Hb? _______________________________

Содержат ли её эритроциты достаточное количество Hb и по-

чему? ___________________________________________________

Таблица 8

Результаты работы «Определение гемоглобина»

Теоретическая часть

Группы крови

Все клетки тела человека, включая эритроциты, окружены плазматической мембраной. Плазматическая мембрана содержит определенные гликопротеины, так называемые антигены, которые являются своеобразными маркёрами клеток. В мембране эритроцитов эти антигены называются агглютининогенами.

Определение групп крови важно для выполнения правильного переливания крови, чтобы предупредить смешивание несовме-

64

https://t.me/medicina_free

стимой крови. В мембранах эритроцитов присутствуют разные агглютининогены, но, в основном, АВО и Rh антигены, которые вызывают пагубные и потенциально смертельные последствия ошибочной трансфузии. Если реципиент трансфузируемой крови имеет в крови специфические антитела (называемые агглютининами) к антигенам, которые находятся на трансфузируемых клетках крови, то эритроциты будут осаждаться и склеиваться, или агглютинировать, а затем лизировать. Именно поэтому эта реакция является весьма важной при переливании крови.

АВО группы крови определяются по присутствию или отсутствию двух антигенов: типа А и В. Эти антигены генетически детерминированы, так как человек имеет 2 аллели гена для этих белков, по одной копии от каждого родителя. Присутствие этих антигенов является следствием доминантного гена, а их отсутствие – следствием рецессивного гена.

Человек с типом крови А может иметь аллели двух генов для антигена А, или он может иметь одну генную аллель для типа антигена А, а другую аллель при отсутствии антигена А или В. Человек с типом крови В может иметь две генных аллели для антигена В, или может иметь одну генную аллель для антигена типа В, а другую аллель при отсутствии А или В-антигена. Человек с типом крови АВ имеет одну генную аллель для антигена А, а другую аллель – для антигена В. Человек с типом крови О будет иметь две рецессивные генные аллеи и не иметь ни А, ни В типа антигена.

Антитела для А и В-антигенов были обнаружены в плазме крови. Эти белки взаимодействуют с антигенами, которые присутствуют, когда человек с типом крови А будет иметь анти-В антитела. Все это можно свести в таблицу 9.

Резус (Rh) – фактор является другим, генетически детерминированным белком, который может присутствовать в мембранах

65

https://t.me/medicina_free

эритроцитов. Около 85% людей имеет положительный резусфактор (Rh+), то есть имеет этот белок. Антитела к Rh-фактору не обнаруживаются в плазме. Они продуцируются только после экспозуры Rh-фактора людям, которые имеют отрицательный ре-

зус (Rh–).

Отдельные капли проб крови смешиваются с антисывороткой, содержащей антитела к А и В-типам антигенов, и с реагентом, содержащим антитела к Rh-фактору. Реакция агглютинации свидетельствует о присутствии белков.

В этом эксперименте Вы будите определять группы крови в 6 образцах. В меню «Эксперимент» выберите работу «Группы крови». Перед Вами откроется экран для работы (рис. 17). Используйте обзорный экран в меню «Помощь», чтобы познакомиться с оборудованием на экране.

Рис. 17. Экран работы «Группы крови»

В верхнем правом углу экрана находится полка с 6 образцами крови. В нижнем левом углу экрана находится полка, содержащая бутылочки с анти-А сывороткой (голубой цвет), анти-В сывороткой (желтый цвет) и анти-Rh реагент (белый цвет). Эти бу-

66

https://t.me/medicina_free

тылочки содержат антитела к А и В-антигену, а также Rh антигену, соответственно. В центре экрана размещается лабораторный стол для проведения работы. Слева от него расположен распределитель предметных стекол для определения группы крови.

Выше распределителя находится контейнер с палочками для перемешивания. Эти палочки кодируются по цвету: голубой цвет используется с анти-А сывороткой, желтый цвет используется с анти-В сывороткой, и белый цвет используется с анти-Rh сывороткой.

Справа от лабораторного стола находится световой бокс для обзора образцов по группам крови. Когда Вы делаете щелчок по кнопке «Свет», раскрывается световой бокс, показывая образцы с группами крови. Слева от светового бокса находится табло результатов, где регистрируются полученные данные.

В нижнем правом углу экрана расположен контейнер для удаления загрязнений. Вся стеклянная посуда и палочки, находившиеся в контакте с кровью, должны быть помещены в этот контейнер для очистки.

Практическая часть

Работа № 4. Определение групп крови

Шесть человек с разными группами крови сдали кровь для этого теста.

Ход работы:

1.Щелкните мышкой и переместите часовое стекло из распределителя стекол к лабораторному столу. Заметьте, что три стекла помечены А, В и Rh, соответственно.

2.Щелкните по капельнице с пробой крови № 1 и переместите ее к углублению часового стекла, помеченного символом «А». Капля крови переместится в это углубление.

3.Повторите этот этап работы, распределяя капли крови пробы № 1 в углубления двух оставшихся часовых стекол.

4.Щелкните по капельнице с анти-А сывороткой и переместите ее к углублению часового стекла с меткой «А». Капля анти-

Асыворотки будет добавлена в углубление часового стекла.

67

https://t.me/medicina_free

5.Повторите этап 4 с анти-В сывороткой. Следите, чтобы сыворотка была добавлена точно в углубление часового стекла с меткой «В».

6.Повторите этап 4 с анти-Rh сывороткой. Убедитесь, что сыворотка была добавлена в углубление часового стекла с меткой «Rh».

7.Возьмите палочку для перемешивания голубого цвета и переместите ее к углублению в часовом стекле с символом «А». Теперь смешайте кровь и анти-А сыворотку.

8.Переместите использованную для перемешивания палочку в контейнер для удаления загрязнений.

9.Теперь выберите палочку желтого цвета и переместите ее

куглубления часового стекла «В».

10.После перемешивания не забудьте переместить палочку в контейнер для удаления загрязнений.

11.Теперь палочку белого цвета переместите к углублению в часовом стекле «Rh».

12.После перемешивания удалите ее в контейнер для очистки.

13.Теперь, часовое стекло, помеченное меткой А, переместите в световой бокс и щелкните по кнопке «Свет». При этом экран будет разворачиваться, показывая результат определения группы крови.

14.Просмотрите результат крови, маркированный символом «А», на экране. Если агглютинация или «агрегация» присутствует, щелкните кнопкой «Положительный». Если агглютинация не произошла (образец выглядит гладкой и хорошо перемешанной субстанцией), то надо нажать кнопку «Отрицательный».

15.Повторите этап 14 с пробами крови, отмеченными символами «В» и «Rh». В каждом случае выберите результат «Положительный», если в пробе имеется агглютинация и «Отрицательный», если проба не агглютинирует.

16.Теперь щелкните кнопкой «Зарегистрировать результат», рядом с табло результатов, и внесите полученный результат по образцу крови № 1.

17.Переместите часовое стекло в контейнер для удаления загрязнений.

18.Теперь щелкните по кнопке «Х» в верхнем правом углу развернутого экрана, чтобы закрыть его.

68

https://t.me/medicina_free

19.Повторите этапы 1–18 для 5 оставшихся проб крови. Используя данные, полученные в этой работе, определите группу крови каждого образца и заполните в своих отчетах таблицу

№10; (отмечайте результат, как «Положительный» или «Отрицательный»).

20.На основании полученных результатов ответьте на поставленные вопросы и сделайте соответствующие выводы в своих отчетах.

Если анти-А антитело вызывает агглютинацию крови, то какой антиген присутствует на клетках крови? ___________________

Если человек имеет группу крови АВ, то какие антигены присутствуют на эритроцитах? _________________________________

Какие антитела присутствуют в плазме человека с группой кро-

ви АВ? __________________________________________________

Имеет ли человек с группой крови 0 антигены А или В на эритро-

цитах? _________________________________________________

Таблица 10

Результаты работы «Определение групп крови»

Теоретическая часть

Холестерин крови

Холестерин является липидной субстанцией, которая играет важную роль в жизни человека. Он является важным компонентом всех клеточных мембран и основой для синтеза стероидных гормонов, витамина Д и солей желчных кислот.

Холестерин синтезируется в печени человека и присутствует в пище животного происхождения, такой как молоко, мясо и яйца. Поскольку холестерин является водонерастворимым, то он должен быть упакован в белковую оболочку – эта конструкция

69

https://t.me/medicina_free

называется липопротеином. Липопротеины поступают в кровь из печени и органов пищеварения к клеткам организма.

Один из видов липопротеинов, названный LDL (липопротеин низкой плотности), определяется как потенциальный источник повреждения сосудов, провоцирующий развитие артериосклероза. Определение общего холестерина крови не измеряет уровень LDLs, но дает ценную информацию об общем количестве холестерина в крови.

Менее 200 мг общего холестерина на децилитр крови считается нормой. Значение от 200 до 239 мг/дл считается погранично высоким холестерином. А значение выше 240 мг/дл считается высоким холестерином в крови и ассоциируется с повышенным риском сердечно-сосудистых заболеваний. Аномально низкие уровни холестерина в крови (общий холестерин 100 мг/дл) могут также быть проблемой, т.к. низкие уровни холестерина могут показывать гипертиреоидизм (сверх активная функция щитовидной железы), заболевания печени, неадекватную абсорбцию пищевых веществ из тонкого кишечника. Гипохолестеринемию связывают с депрессией, тревогой и нарушенным пищеварением, которые, вероятно, контролируются уровнем серотонина, который является нейротрансмитером в ЦНС. Это свидетельствует о взаимосвязи между низким уровнем холестерина крови и низкими уровнями серотонина в мозге.

Вданной работе по определению содержания общего холестерина крови образец крови смешивается с энзимами, что вызывает цветную реакцию. Интенсивность цвета показывает количество присутствующего холестерина. Тест на холестерин подвергается сравнению с цветом образцов, у которых заведомо известны уровни холестерина (стандартные значения).

Из меню «Эксперимент» выберите работу «Определение общего холестерина». Перед Вами откроется экран для выполнения работы (рис. 18). Используйте обзорный экран из меню «Помощь» для самостоятельного знакомства с оборудованием, необходимым для работы.

Вверхнем правом углу экрана находится распределитель скарификаторов, то есть инструментов, которые используются для прокола пальца и получения капли крови.

Под распределителем скарификаторов находится рука человека с приготовленным для взятия крови пальцем. Смена пациен-

70

https://t.me/medicina_free