Результаты исследования и их обсуждение

На первом этапе исследования широкое внедрение параллельной бикомпонентной карантинизации крови и своевременные медотводы от донаций по единой компьютерной базе данных доноров края привели к снижению в течение 7 лет суммарного первичного брака донорской крови с учетом всех исследуемых параметров с 9,0 до 6,5%. Первичный брак по маркерам гемотрансмиссивных инфекций ВИЧ, гепатитов В, С и сифилиса в среднем за это время составил 4,64±0,13%. Уменьшение суммарного брака напрямую связано со снижением выявления частоты маркеров инфекций у доноров с 4,95 до 2,95% (р<0,01, распределение Фарадея), так как выявление повышенных АЛТ и других биохимических параметров осталось практически прежним (табл. 1).

Таблица 1

Структура первичного и вторичного абсолютного брака донорских гемокомпонентов в 2000–2006 гг.

Структура брака донорских гемокомпонентов	Первичный брак, %	Вторичный брак у повторно обследованных, %
HBsAg	1,19 ±0,02	0,48 ± 0,004*
HCV	2,31 ± 0,02	0,74 ± 0,004*
HIV	0,06 ±0,01	0,05 ±0,001*
Сифилис	1,08±0,02	0,24 ± 0,004*
Абсолютный брак (без АЛТ)	4,64 ±0,1	1,51 ±0,05*

Примечание: * (р<0,01) – достоверность различий при определении донорского брака.

Структура первичного и вторичного брака, выявляемого у доноров в процессе карантинного хранения гемокомпонентов, статистически достоверно не отличалась (рис. 2). Так, основной массив инфекций, выявляемых при первичном и повторном исследованиях (вторичный брак), составляли образцы, контаминированные вирусом гепатита С, что в структуре занимает почти 50%. Количество образцов, отбракованных по гепатиту В, сифилису и ВИЧ, также относительно равно выявлялось в первичном и вторичном браке.

За семь лет целенаправленной работы по внедрению промышленной двухкомпонентной системы карантинизации донорской крови выявлено 6976 доз гемокомпонентов от 3458 «зараженных» доноров, что составляет в среднем 1,5% от доноров, пришедших на повторное обследование (от 1 до 2%) (табл. 2).

Рис. 2. Вторичный брак донорской крови при карантинизации

При карантинизации эритромассы было выявлено 403 новых случая гемотрансмиссивных инфекций. От этих доноров было заготовлено 100,375 литров эритромассы (806 доз), в дальнейшем забракованных.

При параллельном динамическом сравнении результатов повторного исследования донорских образцов плазмы, заложенной на карантин, дополнительно выявлено 3055 случаев носительства вышеуказанных гемотрансмиссивных инфекций. От этих доноров было заготовлено 783,67 литров плазмы (6170 доз), в дальнейшем забракованных. Следовательно, до введения карантинизации крови в лечебную сеть и на фармпредприятия могли попасть потенциально зараженные компоненты крови.

Таблица 2

Динамика вторичного брака плазмы

Изучаемыепараметры	Годы наблюдения
	2000	2001	2002	2003	2004	2005	2006
Абсолютный вторичный брак в донорской плазме (от карантинизированных), %	1,00± 0,02	1,37± 0,03*	1,14± 0,02*	0,94± 0,03*	1,65± 0,03*	1,31± 0,03*	2,00± 0,03*
Уровень карантинизации, %	80	71	74	71	70	67	65

Примечание: * (р<0,01) – достоверность различий при определении донорского брака.

Снижение выявления гемотрансмиссивных инфекций доноров при первичном обследовании связано с улучшением отбора донорских кадров, а уменьшение числа потенциально зараженных доноров в целом, на наш взгляд, обусловлено внедрением промышленной карантинизации. Так, совмещение компьютерных баз данных Единого донорского центра на станциях переливания крови и специализированных лечебных учреждений – ГУЗ «Алтайский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями», кожно-венерологического диспансера, краевого инфекционного отделения и Роспотребнадзора – позволило запретить донации уже отведенным лицам.

Существенную лепту в снижение брака донорской крови внесло внедрение донорского аппаратного и стандартного (на центрифугах) плазмацитафереза. Постоянно, каждые две недели, сдающие плазму и тромбоциты доноры с неизменно отрицательными результатами на маркеры инфекций составили «элитную» когорту кадровых доноров.

Повторная явка доноров составила за 7 лет 69,1%. Из 330542 доноров повторно через 6 месяцев были обследованы 225066 человек, чьи плазма, эритроцитная масса были заложены в карантин. Неявка на повторное обследование более чем в 30% случаев дала основание для исследования по интеграции NAT-технологий в систему вирус-безопасности гемотрансфузий.

Практически чрезвычайно важно было выяснить, какова должна быть минимальная продолжительность карантинизации гемокомпонентов.

На рисунке 3 показано, что за 3 месяца карантинизации удавалось выявить 1,1% образцов вторичного брака у повторно обследованных доноров. За весь период карантина было выявлено 1,5%, что на 26,7% больше, чем при 3-месячной карантинизации.

Рис. 3. Динамика выявления вторичного брака заложенных на карантин гемокомпонентов

Из представленных данных по выявлению образцов гемопрепаратов, контаминированных вирусами гепатитов В, С, ВИЧ и сифилисом, видно, что 3-месячный срок карантина недостаточен.

Нами была выполнена работа по изучению динамики выявления помесячного абсолютного вторичного брака как по среднему бракеражу образцов гемокомпонентов, находящихся в карантине, так и по официальным ИФА-маркерам гемотрансмиссивных инфекций.

Исследование проведено методом ретроспективного анализа результатов выявления маркеров гепатитов, сифилиса и ВИЧ у доноров плазмафереза ежемесячно в течение полугода. Выявление суммарного вторичного брака по всем маркерам инфекций нарастало помесячно почти на половину в равном темпе в первые 3 месяца карантина. Затем темп прироста замедлился и вышел на «плато» к пятому месяцу хранения плазмы и эритроцитов в карантине (рис. 4).

Рис. 4. Динамика детекции маркеров инфекций при 6-месячном карантине

Динамика прироста отбракованных образцов на шестом месяце карантина составила всего 2% и достоверно не отличалась от предыдущего периода. Прирост за первые 4 месяца составлял ежемесячно около 0,4%, с постепенным снижением к окончанию срока карантина почти в 10 раз (до 0,03%), составив в итоге 1,5% (табл. 3).

Таблица 3

Динамика выявления абсолютного вторичного брака у повторно обследованных доноров по месяцам

Изучаемые параметры	1 мес.	2 мес.	3 мес.	4 мес.	5 мес.	6 мес.
Прирост абсолютного вторичного брака, %	0,43± 0,01*	0,38± 0,02*	0,33± 0,02*	0,22± 0,03*	0,12± 0,03*	0,03± 0,01
Суммарный абсолютный вторичный брак, %	0,43± 0,01*	0,81± 0,03*	1,14± 0,04*	1,36± 0,04*	1,48± 0,05*	1,51± 0,05

Примечание: * (р<0,01) – достоверность различий при определении донорского брака.

Мы проанализировали динамику выявления вторичного абсолютного брака от повторно обследованных доноров по каждой инфекции отдельно. В процессе 6-месячной карантинизации дополнительно выявляются 0,74±0,04% случаев гепатита С в гемопрепаратах, заложенных на карантинизацию.

Динамика помесячного прироста выявления маркеров гепатита С практически полностью совпадает с динамикой помесячного выявления суммарного вторичного брака (по всем инфекциям). Чрезвычайно интересным оказалось, что достоверно отмечено выявление маркеров гепатита С между каждым из первых 4 месяцев карантинизации (30–120 дней). Согласно представленным на рисунке 4 данным кривая, отражающая прирост выявления маркеров гепатита С, практически выходит на «плато» после 4-месячного карантина. Следовательно, минимальный срок карантинизации гемопрепаратов для обеспечения вирус-безопасности по гепатиту С должен составлять не менее 4 месяцев (120 дней).

В течение 6 месяцев карантина гемопрепаратов было выявлено вторичного абсолютного брака по маркерам гепатита В в среднем 0,48±0,02%. Как видно из рисунка 4, основное количество выявленных маркеров гепатита В распределено нарастающим итогом равномерно между 2–5-м месяцами карантина (60–150 дней). Достоверные различия выявлены между каждым месяцем карантина. «Плато» выявления маркеров гепатита В обнаружено с 5-го месяца. Следовательно, минимальный срок карантина для обеспечения вирус-безопасности гемопрепаратов по гепатиту В должен быть не менее 5 месяцев.

При 6-месячной карантинизации дополнительно выявляются 0,05±0,001% случаев ВИЧ-инфекции в гемопрепаратах, заложенных на карантинизацию. Чрезвычайно интересным оказалось, что достоверно отмечено выявление маркеров ВИЧ-инфекции между каждым из первых 3 месяцев карантинизации (30–90 дней). Согласно представленным на рисунке 4 данным, кривая, отражающая прирост выявления маркеров ВИЧ-инфекции, выходит на «плато» после 3-месячного карантина.

Абсолютный повторный брак через 6 месяцев карантинизации по сифилису составил 0,24±0,04% (см. рис. 4). Основное число выявленных антител при сифилисе у доноров при их повторном обследовании происходит до 3 месяцев (при 3-месячном сроке карантинизации) – 0,22±0,03%. Причем, в течение первых 3 месяцев достоверность различий выявления обнаружена между каждым месяцем карантина гемопрепаратов (р<0,01). По данным Американской ассоциации банков крови (AABB, техническое руководство, 2000 г.), жизнеспособность Treponema Pallidum вне человеческого организма – 72–96 часов. Контаминированные образцы крови, находящиеся на хранении в карантине, представляли опасность только пирогенными реакциями. Тем не менее концепция безопасности трансфузионной терапии предполагает апирогенные трансфузии, что позволяет получить технология промышленной карантинизации крови.

Согласно нормативной документации доноры, отстраненные по отклонению АЛТ, могут прийти на повторное обследование через месяц, и если уровень АЛТ приходит к норме, донор допускается к кроводаче, а его гемокомпоненты могут закладываться на хранение в карантин.

При исследовании биохимических показателей крови у 346598 доноров (96,55%) все показатели укладывались в норму, у 12375 доноров (3,45%) были отклонения биохимических параметров.

Мы исследовали частоту выявления вторичного брака у доноров, как имевших в анамнезе транзиторное повышение АЛТ, так и без него. Анализ проводился ретроспективно, учитывалось появление в 6-месячной динамике гиперферментемии у доноров с выявленными в карантине маркерами гемотрансмиссивных инфекций. Полученные данные представлены в таблице 4.

Суммарный брак по АЛТ за 6 месяцев составил 5,87±0,16%. Исследование в течение полугодового периода показало, что со 2-го по 4-й месяц обнаружение положительных АЛТ было практически одинаковым в течение каждого месяца.

Таблица 4

Процент выявления повышенного уровня АЛТ у повторно обследованных доноров по месяцам

Изучаемые параметры	1 мес.	2 мес.	3 мес.	4 мес.	5 мес.	6 мес.
Прирост брака по АЛТ, %	1,11± 0,12*	1,21± 0,14*	1,23± 0,11*	1,18± 0,13*	0,78± 0,12*	0,35± 0,11*
Суммарный относительный вторичный брак, %	1,11± 0,12*	2,32± 0,17*	3,56± 0,14*	4,74± 0,15*	5,52± 0,14*	5,87± 0,16*

Примечание: * (р<0,01) – достоверность различий при определении донорского брака.

Начиная с 5-го месяца темпы прироста абсолютного повторного брака по АЛТ замедляются, и самыми меньшими они оказались на 6-м месяце карантина (рис. 5).

Рис. 5. Динамика детекции повышенного уровня АЛТ при 6-месячном карантине

Мы сравнили графики суммарного абсолютного брака по АЛТ и по маркерам гепатита В, С, ВИЧ, сифилиса (см. рис. 4 и 5). График на рисунке 5 отразил общую тенденцию помесячного нарастания суммарного брака до 4-го месяца и снижение частоты выявляемости признака инфекции к 6-му месяцу, что коррелирует с данными детекции маркеров инфекций за этот же период.

На наш взгляд, проба определения АЛТ может применятся как скрининговый метод на первичном этапе диагностики. Детекция повышенных трансаминаз дает дополнительный резерв к уже имеющейся системе выявления гемотрансмиссивных инфекций.

Выше нами было показано, что основой метода карантинизации компонентов донорской крови является выявление маркеров гемотрансмиссивных инфекций у доноров в ИФА-исследовании. В начале нашей работы было неясно, насколько выявленные в динамике карантина положительные результаты по ИФА-маркерам инфекций оправдывают бракераж донорских гемокомпонентов.

Напомним, что при первом исследовании доноров, чьи гемокомпоненты закладывались на карантинное хранение, ИФА-маркеры инфекций были отрицательными. Перед нашей группой исследователей совместно с Алтайским краевым центром по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями стояла задача по проведению исследований на наличие нуклеиновых кислот NAT-технологией у доноров с ИФА-положительными маркерами на гепатит С и ВИЧ.

Исследования проведены в группе доноров из 107 человек. ИФА-маркеры гепатита С были у 106 человек, и у одного донора обнаружены маркеры ВИЧ-инфекции. Положительные ПЦР-результаты обнаружены у 83 человек, что составило 77,5%. В соответствии с правилами исследования ВИЧ-инфицированных окончательный диагноз выставляет окружной центр. В нашем случае диагноз ВИЧ-инфекции был подтвержден методом иммуноблота в Омском окружном центре по борьбе со СПИДом и другими инфекционными заболеваниями.

Таким образом, в начале широкого внедрения в Алтайском крае метода карантинизации донорской крови было показано, что в 3/4 случаев выявление ИФА-маркеров совпадает с данными ПЦР по ВИЧ и ВГС, что свидетельствует о наличии у донора гемотрансмиссивной инфекции.

Учитывая мировой и отечественный опыт по диагностике вирусных инфекций, а также наличие остаточного риска инфицирования после диагностики ИФА доноров (в период серонегативного окна), одной из важнейших задач нашего исследования было проведение ПЦР-диагностики на ВИЧ, гепатиты В и С у доноров с отрицательными ИФА-маркерами данных инфекций.

В разработку включены данные ПЦР-лабораторий АКСПК, Бийской и Рубцовской СПК с 2007 по 2009 г. Всего проведено 157547 исследований образцов донорской крови, имевших отрицательные результаты ИФА-диагностики гепатитов В и С, ВИЧ. Данные по исследованию каждого вида инфекции с обнаружением частоты выявления нуклеиновых кислот вирусов представлены в таблице 5. NAT-диагностика на ВИЧ, ВГВ и ВГС проводилась методом «real-time ПЦР» в тот же день, что и ИФА-исследования. Было выявлено 15 доноров с наличием вирусных нуклеиновых кислот: ДНК ВИЧ – у 1 донора, ДНК гепатита В – у 1 донора, РНК гепатита С – у 13 доноров.

Таблица 5

ПЦР-диагностика в ИФА-отрицательных образцах донорской крови

Исследуемый параметр, метод ПЦР	Количество ИФА-отрицательных образцов	Количество выявленных положительных проб	Данные ПЦР-положитель­ных проб на 100000 ИФА-отрицательных образцов
ВИЧ	84498	1	1,2
Гепатит В	4656	1	21,5
Гепатит С	68393	13	19
Всего	157547	15	9,5

Таким образом, остаточный риск инфицирования по трем гемотрансмиссивным инфекциям в ИФА-отрицательных образцах составил 9,5 : 100000 исследований.

При решении поставленной задачи по исследованию наличия нуклеиновых кислот ВИЧ, ВГВ и ВГС методом ПЦР в заведомо ИФА-положи­тельных и ИФА-отрицательных образцах гемокомпонентов доноров можно предположить, что NAT-технология не может быть единственным референтным методом оценки остаточного риска инфицирования гемокомпонентов. Подтверждением тому служат и данные мировой литературы, в которых также указаны случаи заражения через компоненты донорской крови, проверенные методом ПЦР (Prati D., 2006; Stramer S.L., 2007; Arico M., 2008).

При ретроспективной оценке этих ПЦР-положительных, но ИФА-отрицательных на гемотрансмиссивные инфекции проб донорской крови, оказалось, что из 15 случаев инфекты чаще выявлены не у первичных доноров, а при последующих их кроводачах. При этом первые образцы их гемокомпонентов находились на карантинном хранении (табл. 6.)

Таблица 6

Динамическое исследование ПЦР-методом у ИФА-отрицательных на гемотрансмиссивные инфекции доноров

Исследуемый параметр, метод ПЦР	Первичные доноры	Доноры 2-й и более кроводач
ВИЧ	1	0
Гепатит В	0	1
Гепатит С	3	10
Всего	4	11

Таким образом, при разработке схем обеспечения вирусной безопасности в трансфузиологии необходимо учитывать возможные недостатки диагностических лабораторных методов. В связи с наличием остаточного риска инфицирования донорской крови после использования каждого из методов, на наш взгляд, надо применять комплексное исследование, при котором эти недостатки методов ИФА и ПЦР-диагностики будут взаимно минимизированы. Не следует забывать, что нормативными документами Службы крови Российской Федерации регламентированы исследования только на вышеперечисленные инфекции, хотя гемотрансмиссивных инфектов значительно больше.

Карантинизация донорской крови предоставляет дополнительные временные, ситуационные и клинико-лабораторные возможности для наилучшей реализации диагностического этапа обеспечения безопасности гемотрансфузий.

Несмотря на совершенствование процедур обследования доноров крови, передача инфекционных агентов с гемокомпонентами, как было приведено нами выше, остается реальным риском. Этот риск может быть сведен до минимального за счет внедрения процедур вирусинактивации гемокомпонентов. В мировой практике для этих целей используется несколько основных обеззараживающих систем: солвент-детергентные методы, использование различных рН-контрастных методик, применение принципа фотоинактивации вирусов и другие.

В 2009 г. Алтайский край был выбран Министерством здравоохранения и социального развития Российской Федерации одной из экспериментальных площадок реализации в стране сегмента Приоритетного национального проекта «Здоровье», его раздела «Кровь». В рамках этого проекта на АКСПК поставлена и внедрена в практику система инактивации вирусов в плазме крови «ТЕРАФЛЕКС-МБ-ПЛАЗМА» – совместная разработка «ТЕРАФЛЕКС» компанией «МакоФарма» и рядом российских научно-исследовательских институтов: ФГУ «Российский ордена Трудового Красного Знамени, ордена Дружбы народов научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Росмедтехнологий», ГУ «Научно-исследовательский институт гриппа РАМН», ГУ «Гематологический научный центр РАМН», ГУ «Научно-исследователь­ский институт полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П. Чумакова РАМН», ГУ «Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии РАМН», ГУ «Российский национальный центр хирургии РАМН».

В рамках продукции «ТЕРАФЛЕКС» разработан соответствующий аппарат «МАКОТРОНИК», который, используя принцип фотоинактивации вирусов метиленовым синим, позволяет уничтожить гемотрансмиссивные агенты ВИЧ, гепатитов В и С и другие в одной дозе донорской плазмы.

Апробация данной системы показала, что методика «ТЕРАФЛЕКС-МБ-ПЛАЗМА» легко воспроизводима в условиях станции переливания крови. Вирусинактивация оказалась возможной как в только что заготовленной плазме, так и в размороженной плазме. Вместе с тем выяснилось, что система «ТЕРАФЛЕКС-МБ-ПЛАЗМА» – достаточно дорогостоящая методика обеспечения вирусной безопасности. Она лимитирована и возможностью обеззараживать только плазму, тогда как клеточные донорские среды остаются при изолированном ее применении с остаточным риском инфицирования гемотрансмиссивными инфекциями ВИЧ, гепатитами В и С.

Безопасность гемотрансфузий в Российской Федерации осуществляется на основе регламентирующей нормативной документации Минздравсоцразвития, включающей принципиальные блоки: тщательный отбор доноров, лабораторное определение у них иммуногематологического статуса и маркеров гемотрансмиссивных инфекций, применение медицинских технологий карантинизации, фильтрации и вирусинактивации плазмы.

Тем не менее инфекционная безопасность донорской крови обеспечивается региональными станциями переливания и центрами крови самостоятельно с учетом отдельных, а не всех принципиально важных технологий. Примерами тому служат: разрешенная технология карантинизации, которая используется большинством СПК только для карантина СЗП, а не всех гемокомпонентов. Также ПЦР-обследование проводится только у доноров плазмы для фракционирования, а не при всех донациях. Вирусинактивация плазмы ограниченно проводится в отдельных регионах страны.

В связи с разработкой оптимальной схемы обеспечения инфекционной безопасности донорских гемокомпонентов на основе поэтапного внедрения методов их противовирусной защиты нами были проанализированы основные этапы внедрения технологий вирусной безопасности гемотрансфузий в Алтайском крае. На рисунках 6–8 представлены три схемы, соответствующие этим этапам: «начальная» – с использованием ИФА-метода диагностики доноров, «базисная» – с дополнительным применением параллельного карантина плазмы и эритроцитов, и «оптимальная» – с включением ПЦР-диагностики и вирусинактивации.

Рис. 6. Начальная схема обеспечения безопасности донорской крови

При использовании начальной схемы среди первично отведенных доноров было 28431 человек от всех 358973 доноров (7,92%). Эти лица были обнаружены на аналитическом этапе диагностики. Из них по относительным показаниям на этом этапе было отведено 11774 человека (3,28%). Первичное обследование доноров включает преаналитический этап с медотводами при входном контроле и клиническом обследовании и аналитический этап, где идет выбраковка образцов гемопрепаратов и их утилизация на основе лабораторных исследований, в первую очередь ИФА-маркеров ВИЧ, гепатитов В, С и сифилиса. Эта начальная схема обеспечения безопасности донорской крови не учитывает период серонегативного окна.

Образцы донорских гемокопонентов, выданные службой крови края до 1999 г., имели максимальный остаточный риск инфицирования по всем донорским гемокомпонентам. Об этом свидетельствуют данные, полученные в процессе карантинизации.

За семь лет (до 2007 г.) целенаправленной работы службы крови края по внедрению промышленной двухкомпонентной системы карантинизации донорской крови выявлено 6976 доз гемокомпонентов от 3458 потенциально зараженных доноров (с ИФА-маркерами ВИЧ, гепатитов В, С и сифилиса), что составляет 1,5% от доноров, пришедших на повторное обследование.

Базисная схема обеспечения безопасности донорской крови (рис. 7) как раз и обоснована этим количеством потенциально зараженных гемокомпонентов, не пропущенных в лечебную сеть и в производство иммунобиологических препаратов. Схема достаточно проста, экономична и воспроизводима не только на региональных СПК и центрах крови, но и в отделениях переливания крови больниц, где замороженные образцы хранятся в электрохолодильниках при умеренно низкой температуре (–40 ^оС).

Вместе с тем существенным недостатком технологии карантинизации является неявка доноров на повторные обследования. В нашей работе на повторное исследование (данные 7 лет) не явилось 31,9% доноров. Приказом МЗ РФ №193 от 07.05.2003 г. «О внедрении в практику работы службы крови в Российской Федерации метода карантинизации свежезамороженной плазмы» определено, что срок хранения плазмы в карантине не должен превышать 1 год, а в последующем СЗП может быть выдана в лечебную сеть.

Таким образом, базисная схема сохранила остаточный риск инфицирования по клеточным средам и плазме доноров, не явившихся на повторное исследование. Тромбомасса, тромбоконцентрат на данном этапе развития трансфузиологии не проходили карантинные мероприятия из-за сложности процедур замораживания и их хранения. Карантинизация эритроцитной массы до настоящего времени не регламентирована соответствующими приказами Минздравсоцразвития, несмотря на наличие соответствующего разрешения на применение размороженных эритроцитов.

Рис. 7. Базисная схема обеспечения безопасности донорской крови

Оптимальная схема обеспечения безопасности донорской крови (рис. 8) включает вирусинактивацию и дополнительные возможности лабораторной диагностики гемотрансмиссивных инфекций. За счет внедрения входного ПЦР-контроля донорской крови оказалось возможным минимизировать остаточный риск инфицирования донорских гемокомпонентов. Обследование методом «real time – ПЦР» позволяет с учетом одновременного экспресс-обследования донора методами ИФА и ПЦР выдавать в лечебную сеть донорские тромбоциты не позже 3 часов после донации.

Внедрение в практику способа инактивации вирусов в плазме крови фотодинамическим методом с последовательным проведением лейкофильтрации и УФО-облучения плазмы, обработанной метиленовым синим, позволяет использовать этот донорский гемокомпонент также в первые несколько часов после плазмодачи.

Рис. 8. Оптимальная схема обеспечения безопасности донорской крови

Вместе с тем изолированное применение этих двух технологий без использования метода карантинизации гемокомпонентов, на наш взгляд, более затратно и не лишено остаточного риска их вирусинфицирования. Как было показано нами ранее, сохраняется остаточный риск инфицирования в образцах гемокомпонентов с ИФА- и ПЦР-отрицательными пробами на ВИЧ. По данным мировой литературы известны случаи заражения гепатитом С при гемотрансфузии от ПЦР-отрицательного на гемотрансмиссивные пробы донора. Более того, технология плазменной вирусинактивации не позволяет проводить данную процедуру в донорских клеточных средах.

В нашей оптимальной схеме совмещены достоинства параллельной карантинизации плазмы и эритроцитов, а также инактивации вирусов фотодинамическим методом в СЗП от доноров, не прошедших процедуру карантинизации. Таким образом, менее затратная технология карантинизации позволяет дополнительно сохранить для выдачи в лечебную сеть и заводы до 30% вирус-безопасных образцов.

Проведенный нами финансовый расчет показал, что себестоимость одного некарантинизированного, проверенного ИФА- и ПЦР-методами донорского образца крови, составляет 3500 руб. Карантинизированный образец стоит 3700 руб. Обследованный теми же методами образец плазмы, прошедший УФО-вирусинактивацию, стоит уже 32000 руб. В этой связи использование предложенной схемы является, на наш взгляд, оптимальным с экономической и клинической точки зрения по соотношению «цена – качество».

Минимальный остаточный риск инфицирования в данной схеме возможен, на наш взгляд, в клеточных донорских средах по гемотрансмиссивным инфекциям, не обеспеченным соответствующими лабораторными диагностиками. Таким образом, очевидно, что представленная схема будет расширена за счет перечня лабораторных проб на вирус Эпштейн-Барр и других известных возбудителей.

ВЫВОДЫ

1. Первичный инфекционный брак донорской крови в Алтайском крае составил в целом 4,64%. В структуре брака в 49% выявлены маркеры гепатита С; маркеры гепатита В, сифилиса и ВИЧ обнаружены соответственно в 26, 24 и 1% случаев.

2. Карантинизация крови позволяет выявить дополнительно 1,5% инфицированных доноров, успешно прошедших первичную диагностику. В структуре уничтоженных образцов вторичного брака в 49% случаев обнаружены маркеры гепатита С, маркеры гепатита В – в 32%, сифилиса – в 16%, и ВИЧ – в 3% случаев.

3. Использование технологии параллельной карантинизации компонентов донорской крови существенно снижает гемотрансфузионный риск в сравнении с однокомпонентной карантинизацией плазмы. При карантинизации эритромассы дополнительно выявлено и не допущено в лечебную сеть 1,9% эритроцитсодержащих образцов от потенциально зараженных доноров.

4. Срок карантина крови в 6 месяцев значительно увеличивает его эффективность против 3-месячного хранения гемокомпонентов. При этом с 4-го по 6-й месяц карантина дополнительно выявляется не менее 25% маркеров гемотрансмиссивных инфекций.

5. Использование ПЦР-скрининга на маркеры гемотрансмиссивных инфекций для определения вирусной контаминации образцов крови позволяет значительно снижать остаточный риск посттрансфузионного инфицирования реципиентов за счет сокращения периода серонегативного окна.

6. Показаниями к применению дорогостоящей технологии вирусинактивации инфекционных патогенов в донорской плазме служат случаи невозможности использования карантинизации либо завершения этой процедуры.

7. Оптимизация схемы промышленного обеспечения инфекционной безопасности донорской крови должна включать входной ПЦР-контроль, параллельную карантинизацию гемокомпонентов и вирусную инактивацию патогенов плазмы крови.