Получение цитратной крови. К крови добавляют вещество,

предотвращающее ее свертывание, - 5% раствор натрия цитрата в соотношении 1:10 (на 10 мл крови 1 мл 5% раствора натрия цитрата).

Получение плазмы. Жидкую часть крови получают из цитратной крови, которую центрифугируют или ставят в холодильник на 18-20 ч. В результате над осадком образуется слой жидкости желтоватого цвета - плазма.

Получение сыворотки крови (см. главу 12).

Получение взвеси эритроцитов. Взвесь эритроцитов получают из цельной и дефибринированной крови.

Кровь центрифугируют в течение 15-20 мин при 2000-3000 об/мин. Эритроциты оседают на дно, образовавшуюся над ними желтовато-красную жидкость сливают, а в пробирки добавляют стерильный изотонический раствор натрия хлорида до первоначального объема и вновь центрифугируют. Такое промывание эритроцитов производят 2-3 раза, пока надосадочная жидкость не станет совершенно бесцветной. Последнюю порцию надосадочной жидкости удаляют, а в пробирке остается взвесь эритроцитов, которую можно использовать в течение 2-3 дней. Для сохранения эритроцитов

втечение более длительного срока их подвергают обработке формалином. Для получения 50% взвеси к одному объему эритроцитов добавляют два объема буферного раствора, имеющего рН 7,2, и при постоянном помешивании такое же количество 3% раствора формалина. Полученную смесь выдерживают на водяной бане при 37° С 2 -3 ч, помешивая ее каждые 15-20 мин, а затем в термостате (всего 20 ч при 37° С). На следующий день смесь центрифугируют

втом же растворе, сливают надосадочную жидкость, а осадок доводят до первоначального объема буферным раствором, разливают по флаконам, плотно закрывают и хранят при 4° С.

Контрольные вопросы

1.Какова техника взятия крови у кроликов, морских свинок, крыс, мышей и какие из них чаще служат донорами?

2.Что такое тотальное кровопускание?

3.Какие максимальные количества крови можно получить от лабораторных животных при одномоментном и тотальном кровопускании?

4.Как получить нитратную и дефибринированную кровь и составные части крови: плазму, сыворотку, взвесь эритроцитов?

Задание

Возьмите пробирку с кровью и получите из нее сыворотку.