2 курс / Микробиология 1 кафедра / Доп. материалы / Mikra_Teoria_dlya_2_kolka
.pdf
3) Культуры клеток:
Первичные |
Полуперевиваемые |
Перевиваемые |
(неперевиваемые) |
|
|
|
|
|
Готовят из: |
Готовят из: |
Готовят из: |
- быстро ростущих эмбриональных тканией |
- диплоидных |
- злокачественных |
птиц (например, фибробласты) и животных; |
клеток человека. |
клеток (например, клетки |
- чаще из ткани абортированных |
|
HeLa, первоначально |
8-14-недельных плодов человека. |
|
выделенные из |
Приготовление: |
|
карциномы шейки матки, |
- ткани обрабатывают трипсином, который |
|
Нер-3 (из лимфоидной |
разъединяет клетки; |
|
карциномы), |
- проводят отмывку; |
|
- нормальных линий |
- помещают суспензию |
|
клеток (например, амниона |
клеток в специальную |
|
человека, почек обезьяны). |
питательную среду. |
|
|
|
|
|
- Мало пассажей (отбор небольшого количест |
- Больше пассажей; |
- Неограниченное |
клеток для выращивания в другом лабораторн |
- Растут быстрее; |
число пассажей; |
сосуде); |
- Мутации редко. |
- Быстрый рост; |
- Медленно растут; |
|
- Частые мутации. |
- Нет мутаций. |
|
|
|
|
|
ЭТАПЫ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ:
1)Заражение лабораторных живоных/куриных эмбрионов/культур клеток (одна из моделей).
2)Индикация (выяляем наличие возбудителя);
– лабораторые животные: клиника/гибель + РГА (реакция гемагглютинации);
-куриные эмбрионы: внешние изменения/ гибель + РГА;
-культура клеток: цитопатическое действие (ЦПД): внутриклеточные включения,
внутриядерные включения, образования симпласта, образование синцития, бляшкообразование, гибель и дестракция монослоя и др.; + РГА, возможны и другие реакции (реакция
гемадсорбции, цветная проба (наличие метаболитов клеток)).
3) Идентификация (что за возбудитель?): происходит при помощи реакций иммунитета (PH наиболее специфическая, менее специфичны РТГА и РСК, режеприменяют РИФ, РИА и др.)