6 курс / Клинические и лабораторные анализы / ИФА_диагностика_сифилиса_Ткачёв_В_К_,_Вяткина_Т_Г_

Рис. 3. Схема иммуноферментного анализа на суммарные антитела.

1 – носитель (поверхность лунки планшета);

2 – антиген;

3 – специфические IgG;

4 – специфические IgM;

5 – антиген, меченый пероксидазой хрена (конъюгат).

рабо­ та­ ю­ щие­ по такой­ схеме­ , напри­ мер­ , тест-сис­те­ ма­ «Реком­ би­ Бест­ анти­ пал­ ли­ дум­ –IgM –стрип» произ­ вод­ ст­ ва­ ЗАО «Век­ тор­ -Бест».

ТретьясхемаИФА(рис.3)используетсявнекоторыхтест-систе­ махдлявыявлениясуммарныхантител,специфическихдляопреде­ ленно­ го­ антигена, независимо от их класса. Её суть заклю­ чается­ в том, что специфические сывороточные антитела одновре­ менно­

взаимодействуют­ с антигеном, зафиксированным на твердофазном носителе, и с тем же антигеном, меченым ферментом, при совместной инкубации сыво­ ротки­ и конъюгата.

Взависимостиоттого,какиеантигеныиспользуются,всеиммуноферментные­ тест-системы для выявления антител подразде­ -­ ляются­ на:

11

• лизатные – в которых в качестве антигена, иммобилизо­ ван­ ­ ного­ на твердой фазе или входящего в состав конъюгата, исполь­ зуется­ нативный антиген (лизированный или обрабо­ танный ультразвуком возбудитель инфекции, полученный в культуре);

• рекомбинантные – в которых используются полученные генноинженерным­ способом белки – аналоги определенных белко­вых антигенов возбудителя;

• пептидные – использующие химически синтезированные фраг­ менты белков.

Общее направление развития ИФА-диагностикумов – это на­­ правление­ от лизатных тест-систем, которые принято называть тест-системами первого поколения, к рекомбинантным и пептид­ ным­ .

Основными факторами, определяющими качество лизатной тест-системы, являются антигенная природа возбудителя и ка­ чество­ очистки лизата от посторонних примесей. В случае си­фи­ лиса­ первый фактор имеет особое значение. Антигенная природа бледной спирохеты такова, что наряду со специфическими, свой­ ст­венными только ей, антигенами, существуют и такие, которые гомологичны антигенам других спирохет, антитела к которым могут присутствовать в организме человека. В трепо­ немном­ лизате представлены как одни антигены, так и другие, что может послу­ ­ жить причиной ложноположительных результатов при работе с лизатными тест-системами на сифилис. Так как антиген, ис­поль­ зуемый в таких тест-системах, аналогичен антигену, приме­няе­­ мому в РСК или РИФ, природа получаемых ложнопо­ложи­ тель­ ных­ результатов та же, что и в указанных тестах.

Технологияполучениярекомбинантныхбелковпозволяетполу­ ­ чить в достаточно чистом виде аналог любого отдельного ан­тигена. Для создания высококачественной рекомбинантной тест-системы необ­ ходимо­ извсегоантигенногомногообразиявозбудителявыбрать антигены­ , которые отвечали бы следующим требованиям:

• они должны быть высоко иммуногенными, т.е. в организме ин­ фицированного человека должны вырабатываться антитела к этим антигенам в достаточно большом количестве;

• антитела к этим антигенам должны присутствовать в опреде­ ляемых­ количествах в крови больного в течение всего заболе­ вания;

12

• эти антигены должны быть высоко специфичными, т.е. харак­ терными лишь для данного возбудителя и не дающими пере­ крестных­ реакций с антителами другой природы.

Кроме того, большое значение имеет качество очистки реком­ бинантных белков.

В идеальном случае (при выполнении всех указанных тре­бо­ ваний) возможно получение рекомбинантной тест-системы прак­ти­ чески со 100%-ной специфичностью при высокой чувствитель­ нос­ ти­ . Напрактикеэтогоневсегдаудаётсядостичь,однакоспеци­ фичность­ лучших рекомбинантных тест-систем приближается к 100%.

13

ИММУНОФЕРМЕНТНЫЕ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА

В на­стоя­ ­щее вре­мя Мини­ ­стер­ст­вом здраво­ ­ох­ра­не­ния России­ реко­ ­мен­дова­ ­ныкпри­ме­не­ниювме­ди­цин­скойпра­кти­ ­ке10им­му­но­ фермент­ ­ныхтест-сис­­темдлядиаг­ ­но­сти­кисифи­ ­ли­саотече­ ­ст­вен­но­го произ­ ­вод­ст­ва:

•«Реком­ ­биБест­ ан­типал­ ­ли­дум», ЗАО «Ве­ктор­ -Бест», п. Кольцо­ ­во, Новосибир­ ­ская обл.;

•«Реком­ ­биБест­ ан­типал­ ­ли­дум – суммар­ ­ные анти­ ­те­ла», ЗАО «Век­­тор-Бест», п. Коль­цо­во, Ново­ ­си­бирская­ обл.;

•«ИФА–АНТИ–LUIS», НПО «Диаг­ ­но­сти­че­с­кие сис­ ­те­мы», г. Ниж­ ­ний Новгород;

•Тест-сис­ ­те­ма имму­ ­но­фер­мент­ная для выяв­ ­ле­ния анти­ ­тел к возбу­ ­ди­те­лю сифи­ ли­ ­са (Treponema pallidum) на ос­нове­ реком­ ­бинант­ ­ных бел­ков, БТК «Биосер­ ­вис», г. Мос­ ­ква­ ;

•«Люис­ ­Ск­рин», ЗАО «Ниар­ ­ме­дик» и АЗОТ «Диа­ ­к­лон», г. Мос­ ­ква­ ;

•«ЭКОлаб–ан­типал­ ­ли­дум–скрин», ТОО «ЭКОлаб», г Элект­­ро­горск, Мос­ ­ков­ская обл.;

•«ИФА–ан­ти-трепо­ ­не­ма», ЗАО «Век­­тор-Майстар­ », п. Кольцо­ ­во, Ново­ ­си­бирская­ обл.;

•«АТ–Треп.–ИФТС», ГП «Аллер­ ­ген», г. Ставро­ ­поль;

•«Сиф–Ат–№1, 2», ТОО НИИ «Аква­ ­паст», г. Санкт-Петер­ ­бург;

•«ИФАанти-СИФ», НПК «Препа­ ­рат», г. Ниж­ ­ний Новго­ ­род.

Все эти тест-системы прошли государственные испытания в Центральном­ научно-исследовательском кожно-венерологичес- ком институте (ЦНИКВИ), имеют утверждённую Фармакопейным комитетом Минздрава РФ нормативно-техническую документацию и Приказом № 87 Министерства здравоохранения рекомендованы к практическому применению.

Большин­ ст­ во­ изпере­ чи­ с­лен­ ных­ тест-сис­тем­ явля­ ют­ ся­ реком­ би­ ­ нантны­ ми­ .Внихвкаче­ ст­ ве­ специ­ фи­ че­ с­ко­ го­ анти­ ге­ на­ ,иммо­ би­ ли­ зо­ ­ ванно­ го­ на поверх­ но­ сти­ планше­ та­ , исполь­ зу­ ют­ ся­ ре­комби­ нант­ ные­ белки­ – анало­ ги­ отдель­ ных­ анти­ ге­ нов­ Treponema pallidum­. Две тест-сис­те­ мы­ («АТ–Треп.–ИФТС» и «Люис­ Ск­ рин­ ») – лизат­ ные­ . Осно­ ву­ тест-сис­те­ мы­ «Сиф–Ат–№1,2»соста­ в­ ля­ ют­ хими­ че­ с­ки­ синте­ ­ зиро­ ван­ ные­ пеп­ ти­ ды­ .

Часть пере­ чи­ с­лен­ ных­ тест-сис­тем­ предна­ зна­ че­ на­ для выяв­ ле­ ­ ниятрепо­ не­ мо­ с­пе­ ци­ фи­ че­ с­ких­ иммуноглобулиновклассаG.Одна­ ко­

14

следу­ ет­ отме­ тить­ , что благо­ да­ ря­ высо­ кой­ чувст­ ви­ тель­ но­ сти­ , прису­ ­ щейимму­ но­ фер­ мент­ но­ му­ мето­ ду­ ,поз­во­ ля­ ю­ щей­ выяв­ лять­ анти­ те­ ла­ в ни­зкой­ кон­цент­ ра­ ции­ , такие­ тест-сис­те­ мы­ не ус­тупа­ ют­ в сро­ках диаг­ но­ сти­ ро­ ва­ ния­ забо­ ле­ ва­ ния­ теммето­ дам­ серо­ ди­ аг­ но­ сти­ ки­ сифи­ ­ лиса­ , кото­ рые­ выяв­ ля­ ют­ суммар­ ные­ анти­ те­ ла­ (РСК, РПГА), но при их более­ высо­ кой­ концен­ т­ ра­ ции­ .

Без­ у­ с­лов­ но­ , этот пере­ чень­ дале­ ко­ не полный­ . С каж­ дым­ годом­ список­ разре­ шен­ ных­ к приме­ не­ нию­ тест-сис­тем­ для се­ роди­ аг­ но­ сти­ ки­ сифи­ ли­ са­ растет­ и видо­ из­ ме­ ня­ ет­ ся­ . Сего­ д­ ня­ на отече­ ст­ вен­ ном­ рынке­ присут­ ст­ ву­ ют­ заре­ ги­ ст­ ри­ ро­ ван­ ные­ имму­ ­ нофер­ мент­ ные­ тест-сис­те­ мы­ для выяв­ ле­ ния­ имму­ ног­ ло­ бу­ ли­ нов­ класса­ М, кото­ рые­ поз­ во­ ля­ ют­ диаг­ но­ сти­ ро­ вать­ приоб­ ре­ тён­ ную­ инфек­ цию­ в наибо­ лее­ ранние­ сроки­ (IgM появляются уже через 2 недели после заражения, тогда как IgG – обычно через 4 недели). Выработ­ ка­ IgM в значительных количествах происходит не только при первичном заражении, но и при рецидивах и реинфекции, поэтому персистенцию IgM рассматривают как показатель наличия в организме вирулентного возбудителя [13]. Снижение титра и исчезновение­ IgM являются крите­ рием­ эффективности терапии. Но особенно ценны такие тест-систе- мы для диагностики врождён­ ного­ сифилиса. Серологическое подтверждение­ врождённого сифилиса в ранние сроки после рождения ребёнка возможно лишь при выявлении в его крови возбудителя инфекции или специфи­ чес­ ких­ антитрепонемных IgM, которые, в отличие от IgG, не передаются от матери ребёнку, и их присутствие свидетельствует о наличии возбудителя инфекции в организме самого ребёнка [13].

В настоящее время утверждены и разрешены к применению отечес­ твенные тест-системы для выявления специфических IgM: «ЛюисСкрин­ » (ЗАО «Ниармедик» и АЗОТ «Диаклон») и «Реком­ ­ биБест антипаллидум–IgM–стрип» (ЗАО «Вектор-Бест»).

Министерством здравоохранения и медицинской­ промыш­ ленности­ России, с учётом мировой и отечественной практики, рекомендуется более широкое использование ИФА как в скри­нин­ говых исследованиях (в том числе при проверке донорской крови), так и в диагностических целях. В последнем случае он может быть использован как специфи­ чес­ кий­ подтверждающий тест наравне с РИФ, а рекомбинантные ИФА-тест-системы могут быть особенно ценны для распознавания ложнополо­ жительных результатов, по-

15

лучаемыхвтестах,использующихнативный­ трепонемныйантиген. РекомендуетсязаменаобщепринятогоКСРнасифилис­ комплексом ИФА с МР преципитации с кардиоли­ пи­ но­ вым­ антигеном­ .

Иммуноферментные тест-системы для диагностики сифилиса выпускаются в виде многокомпонентных наборов, содержащих все реагенты, необходимые для проведения анализа, и инструкцию­ по их применению. В каждом диагностическом наборе содержат­ ся­ положительный­ и отрицательный контрольные образцы сывороток­ , которые позволяют оценить качество набора и правиль­ ность­ проведения анализа. Оптическая плотность (ОП) в лунках­ с контрольными образцами должна соответствовать нор­ мам, предусмотренным нормативно-технической документацией­ (НТД) на данную тест-систему и указанным в инструкции по при­

менению­ диагностического набора. Только в этом случае набор счита­ ется­ пригодным к использованию, а полученные результаты состоя­ тельными­ .Ккаждойпартиинаборовпроизводителемдолжен­ прилагаться паспорт ОБТК на данную серию наборов, в ко­тором отражаетсяеёсоот­ ветствие­ требованиямНТДиосновныеконтрольные показатели, полученные­ при выпуске тест-системы. Значительные отклонения получаемых контрольных значений ОП от паспортных свидетельствует либо об изменении качества наборов, либо о допу­ щенных при постановке анализа ошибках.

Хотя­ всеИФА-тест-сис­те­ мы­ длядиаг­ но­ сти­ ки­ сифи­ ли­ са­ постро­ ­ ены­ по единой­ схеме­ , ка­ждая­ тест-сис­те­ ма­ имеет­ свои особен­ но­ сти­ . Разли­ чия­ могут­ заклю­ чать­ ся­ встепе­ ни­ рабо­ че­ го­ разве­ де­ ния­ образ­ ца­ (1:10,1:100,1:200),вподхо­ де­ копре­ де­ ле­ нию­ критиче­ с­кой­ опти­ че­ с­кой­ плотно­ сти­ (ОПкритилиCut’off),поот­ноше­ нию­ кко­торой­ оце­нива­ ­ет­ ся ре­зультат­ реак­ ции­ . Пре­дос­та­ в­ ля­ е­ мые­ анали­ ти­ че­ с­кие­ возмо­ ж­ но­ ­ сти отдель­ ных­ тест-сис­тем­ также­ могут­ быть разли­ ч­ ны­ (напри­ мер­ , т/с «Реком­ би­ Бест­ анти­ пал­ ли­ дум­ » произ­ вод­ ст­ ва­ ЗАО «Век­ тор­ -Бест» поз­ во­ ля­ ет­ иссле­ до­ вать­ не только­ сыво­ рот­ ку­ или плазму­ крови­ , ноилик­ вор­ ).Кро­метого,раз­личать­ ­сямо­гутсо­ставы­ испо­со­быприго­ ­ тов­ ле­ ния­ исполь­ зу­ е­ мых­ раство­ ров­ ,мето­ ди­ че­ с­кие­ дета­ ли­ прове­ де­ ния­ анали­ за­ (чис­ло­ промы­ вок­ планше­ та­ на каж­ дой­ стадии­ , продол­ жи­ ­ тельность­ инку­ ба­ ций­ , усло­ вия­ хра­нения­ рабо­ чих­ раство­ ров­ и т.д.), поэ­то­ му­ прира­боте­ слю­бойтест-си­сте­ мой­ не­обхо­ ди­ мо­ стро­гоесо­блю­ дение­ требо­ ва­ ний­ инст­ рук­ ции­ по её приме­ не­ нию­ .

Втожевремясуществуютобщиетребования,соблюдениекоторыхспособноснизитьвероятностьполучениянеправильныхрезуль-

16

татованализа(см.раздел«Требованияирекомендации,соблюде­ ние­ которых повышает достоверность результатов анализа»).

При оценке результатов ИФА необходимо помнить о сущест­во­ вании «серой зоны» – зоны сомнительных результатов, тре­бующих дополнительныхисследований.Есливинструкциипоприменению тест-системы рамки «серой зоны» особо не оговорены, «серой зоной» следует считать интервал ОПкрит±10%. Те зна­чения­ ОП, которые лежат выше этой зоны, соответствуют поло­жительному ре­зультату­ , те, которые ниже, – отрицательному. В зависимости от конкретных условий и конкретных задач исследования рамки «серой зоны» могут быть расширены (напри­ мер­ , до 20%). Это имеет смысл при скрининговых­ исследо­ ва­ ниях­ , особенно при скрининге донорской­ крови, а также при использовании­ оборудования с повышен­ ной­ ошибкой измерения.

Образцы, для которых получен сомнительный результат (со­ ответствующая им ОП находится в пределах «серой зоны») подле­ ­ жат повторному анализу. Рекомендуется также повторить анализ­ образцов, давших положительный результат. При использова­ нии­ ИФА в качестве скринингового теста воспроизводящийся сомнительный результат, так же как и положительный результат, является основанием для направления­ на обследование к дерматовенерологу и для исследования сыворотки крови другими мето­да­ ми. При этом необходимо иметь ввиду высокую чувствитель­ ность­ ИФА – часто подтвердить результат можно только в РИФабс, а при использовании других методов (МР, РСК) – лишь через не­ которое время (в случае IgG – примерно через 1 неделю, в слу­чае суммарных антител – через 1—2 недели). При использова­ нии­ ИФА в качестве диагностического теста в случае получения воспроиз­ ­ водящегося­ сомнительного­ результата рекомендуется повторить анализ с новой порцией сыворотки крови, взятой через 3—7 дней. Относительное возрастание оптической плотности свидетельствует о ранней стадии инфекции­ ; сохранение её на том же уровне возможно в двух случаях: сифилис в анамнезе, когда­ сомнительный результатсвязансналичиемвсывороткекрови­ остаточныхантител, или ложноположительный ре­зультат­ .

Обра­ зец­ , давший­ поло­ жи­ тель­ ный­ резуль­ тат­ , может­ быть рас­ тит­ро­ ван­ – при этом ИФА ставят­ с пос­ле­ до­ ва­ тель­ ны­ ми­ 2-кратны­ ми­ разве­ де­ ни­ я­ ми­ образ­ ца­ , начи­ ная­ с рабо­ че­ го­ разве­ де­ ния­ сыво­ рот­ ки­ вданной­ тест-сис­те­ ме­ .Затитранти­ тре­ по­ нем­ ных­ анти­ тел­ прини­ ма­ ют­

17

наиболь­ шее­ разве­ де­ ние­ сыво­ рот­ ки­ крови­ , даю­ щее­ поло­ жи­ тель­ ный­ резуль­ тат­ . Титр явля­ ет­ ся­ коли­ че­ ст­ вен­ ным­ пока­ за­ те­ лем­ уров­ня спе­ цифи­ че­ с­ких­ ан­тител­ в дан­ном об­разце­ и сте­пени­ его по­зитив­ но­ сти­ . Он обоз­на­ ча­ ет­ ся­ выра­ же­ ни­ ем­ , ха­рак­ те­ ри­ зу­ ю­ щим­ степень­ разве­ де­ ­ ния испы­ ту­ е­ мой­ сыво­ рот­ ки­ : 1:10, 1:20, 1:40 и т.д. (в тест-сис­те­ ме­ с рабо­ чим­ разве­ де­ ни­ ем­ сыво­ рот­ ки­ 1:10) или 1:100, 1:200, 1:400 и т.д. (втест-сис­те­ ­месрабо­ чим­ разве­ де­ ­нием­ сы­ворот­ ки­ 1:100).Прямое­ тит­ро­ ­ вание­ образ­ ца­ значи­ тель­ но­ увели­ чи­ ва­ ет­ стои­ мость­ анали­ за­ .Вцелях­ сокра­ ще­ ния­ финан­ со­ вых­ и трудо­ за­ трат­ отдель­ ные­ произ­ во­ ди­ те­ ли­ пред­лага­ ют­ исполь­ ­зо­ватьсо­кращен­ ­нуюсхе­муоп­реде­ ­ления­ тит­ра­ ан­ тител­ .Таквтест-сис­те­ ме­ «Реком­ би­ Бест­ анти­ пал­ ли­ дум­ »произ­ водст­ ва­ ЗАО «Век­ тор­ -Бест» возмо­ ж­ но­ опре­ де­ ле­ ние­ тит­ра­ ан­тител­ с ис­поль­ зова­ ни­ ем­ коэф­ фи­ ци­ ен­ та­ пози­ тив­ но­ сти­ (КП). Для этого поло­ жи­ тель­ ­ ныйобра­ зец­ анали­ зи­ ру­ ет­ ся­ вдвухразве­ де­ ни­ ях­ –1:10и1:100.Затем­ коэф­ фи­ ци­ ент­ пози­ тив­ но­ сти­ вычи­ с­ля­ ет­ ся­ по форму­ ле­ :

КП = ОПобр.(1:100) / ОПкрит. ,

где ОПобр.(1:100) – опти­ ­че­с­кая плотность­ образ­ ­ца в разве­ ­де­нии 1:100; ОПкрит. – крити­ ­че­с­кая опти­ ­че­с­кая плотность­ .

Соответствие между полученным значением КП и титром антител определяется по таблице:

Опре­ ­де­ле­ние уров­ня специ­ ­фи­че­с­ких ан­тител­ имеет­ значе­ ­ние при наблю­ ­де­нии за дина­ ­ми­кой инфек­ ­ци­он­но­го процес­ ­са и при оценке­ эффе­ ­к­тив­но­сти проти­ ­во­си­фи­ли­ти­че­с­ко­го лече­ ­ния. Эффе­ ­ ктив­ ­ным следу­ ­ет считать­ сниже­ ­ние тит­ ­ра анти­ ­тел не ме­нее чем в 4 раза. Бы­строе­ сни­же­ние ти­тра­ анти­ ­тел при на­чаль­ном его вы­со­ ком значе­ ­нии сви­детель­ ­ст­ву­ет об ус­пешно­ ­сти тера­ ­пии. Одна­ ­ко при этом анти­ ­те­ла в ни­зком­ тит­ ­ре могут­ сохра­ ­нять­ся длитель­ ­ное вре­мя (догода­ иболее­ ),полная­ нега­ ­ти­ва­циярезуль­ ­та­товвИФАнасту­ ­па­ет позднее­ по сравне­ ­нию с МР или РСК.

Учитывая, что каждая иммуноферментная тест-система для диагностики сифилиса имеет свои особенности и титр антител

18

в одном и том же образце может быть различным в разных тест-сис- темах,необходимоисследованиесывороткикровикаждогобольного в динамике­ проводить в одной тест-системе.

Практически все отечественные ИФА-тест-системы для диаг­ ностики сифилиса выпускаются в нескольких вариантах комплек­ ­ тации.Какправило,это:вариантдляодновременноготестирования­ большого количества образцов, в котором использованы­ цельные 96-луночные планшеты, и вариант со стрипированными (разборными) планшетами, позволяющий делать несколько независимых постановок ИФА меньшего объёма.

19

Реко­ мен­ ду­ е­ мый­ алго­ ритм­ серо­ ло­ ги­ че­ с­ кого­ обсле­ до­ ва­ ни­ Я на сифи­ лис­

Имею­ щий­ ся­ на рынке­ широ­ кий­ выбор­ имму­ но­ фер­ мент­ ных­ тест-сис­тем­ , поз­во­ ля­ ю­ щих­ выяв­ лять­ как суммар­ ные­ анти­ те­ ла­ , так и анти­ те­ ла­ опре­ де­ лен­ ных­ классов­ , требу­ ет­ осознан­ но­ го­ подхо­ да­ и раци­ о­ наль­ но­ го­ исполь­ зо­ ва­ ния­ предла­ га­ е­ мых­ тес­тов­ дляполу­ че­ ния­ наибо­ лее­ объе­ к­ тив­ ной­ серо­ ло­ ги­ че­ с­кой­ карти­ ны­ сифи­ ли­ ти­ че­ с­ко­ го­ процес­ са­ и эффе­ к­ тив­ ной­ серо­ ди­ аг­ но­ сти­ ки­ сифи­ ли­ са­ . Рассмо­ т­ рим­ алго­ ритм­ серо­ ло­ ги­ че­ с­ко­ го­ обсле­ до­ ва­ ния­ на сифи­ лис­ с исполь­ зо­ ва­ ­ нием­ мето­ да­ имму­ но­ фер­ мент­ но­ го­ анали­ за­ на приме­ ре­ тест-сис­тем­ произ­ вод­ ст­ ва­ ЗАО «Век­ тор­ -Бест».

Имму­ но­ фер­ мент­ ные­ тест-сис­те­ мы­ для выяв­ ле­ ния­ суммар­ ­ ных анти­ тел­ , как прави­ ло­ , выяв­ ля­ ют­ анти­ те­ ла­ одно­ вре­ мен­ но­ к несколь­ ким­ ан­тиге­ нам­ , с одной­ сторо­ ны­ , с другой­ – они вы­яв­ ляют­ анти­ те­ ла­ разных­ классов­ , кото­ рые­ выра­ ба­ ты­ ва­ ют­ ся­ в раз­ лич­ ные­ сроки­ от момен­ та­ инфи­ ци­ ро­ ва­ ния­ . Такие­ сис­те­ мы­ нуж­ но­ исполь­ зо­ вать­ для прове­ де­ ния­ скринин­ го­ вых­ иссле­ до­ ва­ ний­ на сифи­ лис­ и каче­ ст­ вен­ ной­ оценки­ образ­ цов­ . Резуль­ тат­ анали­ за­ следу­ ет­ расце­ ни­ вать­ только­ как «по­ложи­ тель­ ный­ » или «от­рица­ ­ тельный­ ». Тит­ ро­ ва­ ние­ образ­ цов­ в таких­ тест-сис­те­ мах­ не имеет­ прак­ ти­ че­ с­ко­ го­ смыс­ла­ , так как в разные­ пери­ о­ ды­ инфекци­ он­ но­ го­ процес­ са­ бу­дут опре­ де­ лять­ ся­ ан­тите­ ла­ к раз­лич­ ным­ анти­ ге­ нам­ , кро­ме то­го, эти ан­тите­ ла­ бу­дут при­на­дле­ ­жать к раз­ли­чным­ клас­ сам. В этом случае­ концен­ т­ ра­ ция­ суммар­ ных­ анти­ тел­ может­ со­ хранять­ ся­ на одном­ уровне­ в тече­ ние­ длитель­ но­ го­ проме­ жут­ ка­ време­ ни­ , и иссле­ до­ ва­ тель­ не сможет­ полу­ чить­ нуж­ ную­ инфор­ ма­ ­ цию о ходе­ инфек­ ци­ он­ но­ го­ процес­ са­ .

При отри­ ца­ тель­ ном­ резуль­ та­ те­ скринин­ го­ во­ го­ тес­та­ обсле­ до­ ­ вание­ паци­ ен­ та­ с суще­ ст­ ву­ ю­ щим­ рис­ком­ недав­ не­ го­ зара­ же­ ния­ сифи­ ли­ сом­ следу­ ет­ пов­ то­ рить­ через­ 1—2 неде­ ли­ . Образ­ цы­ , давшие­ поло­ жи­ тель­ ный­ резуль­ тат­ в тест-сис­те­ ме­ для выяв­ ле­ ния­ суммар­ ­ ных анти­ тел­ , необ­ хо­ ди­ мо­ проана­ ли­ зи­ ро­ вать­ в сис­те­ мах­ , выяв­ ля­ ю­ ­ щих конкрет­ ные­ классы­ имму­ ног­ ло­ бу­ ли­ нов­ (IgG и/или IgM). Поло­ ­ житель­ ный­ резуль­ тат­ на IgG или IgM явля­ ет­ ся­ подтвер­ жде­ ни­ ем­ поло­ жи­ тель­ но­ го­ резуль­ та­ та­ , полу­ чен­ но­ го­ в скринин­ го­ вом­ тес­те­ , и свиде­ тель­ ст­ ву­ ет­ о нали­ чии­ специ­ фи­ че­ с­ких­ анти­ тре­ по­ нем­ ных­ ан­ тител­ .Образ­ цы­ ,содер­ жа­ щие­ IgGи/илиIgM,подле­ жат­ тит­ ро­ ва­ нию­ , если­ это пре­ду­ смо­ ­тре­ ­но ин­струк­ ­ци­ей по при­ме­нению­ к им­му­нофер­ ­ ментной­ тест-сис­те­ ме­ . Опре­ де­ ле­ ние­ тит­ ров­ анти­ тел­ в конкрет­ ном­

20