5 курс / Инфекционные болезни / Доп. материалы / частная вирусология

231

образовавшихся вирионов), либо абортивная инфекция (полное отсутствие выхода вирионов из клетки).

2.Персистирующая инфекция отмечается при замедленной скорости репродукции вируса. Эта форма инфекции протекает хронически, бессимптомно.

3.Трансформирующая инфекция возникает при заражении лабораторных животных аденовирусами человека. В этих случаях у животных развиваются опухоли.

Клиника. Инкубационный период при аденовирусной инфекции в среднем составляет 6 суток, хотя может быть от 2-3 суток (при фарингоконъюнктивите) до 3-22 суток (при эпидемическом кератоконъюнктивите).

Основными клиническим формами аденовирусной инфекции являются ринофаринготонзиллит, фарингоконъюнктивальная лихорадка, вирусная пневмония, эпидемический кератоконъюнктивит. Начало заболевания острое. К основным симптомам относятся субфебрильная температура, вялость, головная боль, кашель, отечность век и слизистых оболочек, слезотечение, увеличение шейных лимфоузлов, конъюнктивит (рисунок 191).

Рисунок 191 – Аденовирусный конъюнктивит. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Заболевание протекает доброкачественно, лихорадочный период в среднем длится 5-6 суток. Наиболее тяжело протекает аденовирусная инфекция у больных с иммунодефицитами (энцефалиты).

У детей младшего возраста наблюдаются также аденовирусные гастроэнтериты. К редким формам аденовирусной инфекции относятся менингоэнцефалиты и геморрагические циститы (у детей старшего возраста).

232

Иммунитет. Перенесенное заболевание оставляет непродолжительный типоспецифический иммунитет, который носит клеточно-гуморальный характер.

Диагностика. Исследуемый материал: отделяемое носоглотки, зева, конъюнктивы, фекалии в зависимости от клинической формы болезни. Выделение аденовирусов проводят в культуре клеток человека (Hep-2, HeLa). Для идентификации вирусов используют РИФ, ИФА, РИА, РСК, РТГА, РН. Выявление вирусного антигена возможно с помощью метода флюоресцирующих антител (МФА). В настоящее время широко используется метод ИФА. ПЦР позволяет выявить ДНК вируса в крови или в мазке из зева.

Лечение. Лечение аденовирусной инфекции симптоматическое. Рекомендуются обезболивающие, противокашлевые, жаропонижающие средства. Применяются также интерферон, дезоксирибонуклеаза, глазные мази с теброфеном, оксолином и другие противовирусные препараты.

Профилактика. Для профилактики аденовирусной инфекции проводят санитарно-гигиенические и противоэпидемические мероприятия. Средства специфической профилактики аденовирусной инфекции отсутствуют.

Вопросы для контроля усвоения материала

1.Таксономическое положение аденовирусов.

2.Структура аденовирусов.

3.Цикл репродукции аденовирусов.

4.Патогенез и клиническая картина аденовирусной инфекции.

5.Диагностика аденовирусной инфекции.

6.Профилактика и лечение аденовирусной инфекции.

Тренировочные тесты

1.Аденовирусы человека относятся к роду:

1.1.Atadenovirus

1.2.Aviadenovirus

1.3.Ichtadenovirus

1.4.Mastadenovirus

1.5.Siadenovirus

2.Геном аденовирусов представлен:

2.1. фрагментированной ДНК

233

2.2.фрагментированной плюс-РНК

2.3.фрагментированной минус-РНК

2.4.двуспиральной линейной ДНК

2.5.нефрагментированная минус-РНК

3.Для аденовирусов характерно:

3.1.отсутствие суперкапсида

3.2.наличие суперкапсида

3.3.сферическая форма

3.4.РНК-геном

3.5.фрагментированный геном

4.Для аденовирусной инфекции характерно:

4.1.вертикальная передача

4.2.аэрогенный механизм передачи

4.3.контактный механизм передачи

4.4.фекально-оральный механизм передачи

4.5.парентеральный механизм передачи

5.Для аденовирусной инфекции характерно:

5.1.воздушно-капельный путь передачи

5.2.контактно-бытовой путь передачи

5.3.алиментарный путь передачи

5.4.трансплацентарный путь передачи

5.5.воздушно-пылевой путь передачи

6.Для профилактики аденовирусной инфекции используют:

6.1.инактивированную вакцину

6.2.не разработана

6.3.живую ослабленную вакцину

6.4.убитую вакцину

6.5.субвирионную вакцину

Правильные ответы: 1.4; 2.4; 3.1, 3.3; 4.2, 4.3, 4.4; 5.1, 5.2, 5.3; 6.2.

234

2.2. Гепаднавирусы (семейство Hepadnaviridae)

Гепаднавирусы относятся к семейству Hepadnaviridae. По классификации Балтимора гепаднавирусы включены в группу VII: дцДНК-ОТ-вирусы. Семейство Hepadnaviridae объединяет 2 рода:

Avihepadnavirus и Orthohepadnavirus. Виды, входящие в состав рода Avihepadnavirus, поражают птиц. В состав рода Orthohepadnavirus

включены виды, вызывающие заболевания у человека и животных (сусликов, летучих мышей, сурков, обезьян).

2.2.1. Вирус гепатита В

Изучение вируса гепатита В началось с исследований американского ученого Б.С. Бламберга (рисунок 192), который в 1964 г. в крови австралийских аборигенов с желтухой обнаружил необычные белковые вирусоподобные сферические и филаментозные (палочковидные) частицы, названные им австралийским антигеном.

Рисунок 192 – Барух Самуэль Бламберг (Baruch Samuel Blumberg, 1925 – 2011 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Наиболее часто в таких случаях обнаруживаются сферические частицы около 20 нм в диаметре, реже – филаментозные формы около 20 нм в диаметре и 50-230 нм в длину. Эти вирусоподобные частицы не проявляют инфекционных свойств. В ходе дальнейших исследований было установлено, что австралийский антиген представляет собой

235

поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg – Hepatitis B surface antigen), образующийся в избытке во время репродукции вируса в виде незаконченных (неполных) частиц. Вирусоподобные структуры встречаются одновременно с вирусными частицами (рисунок 193).

Филаментозные частицы HBsAg

Сферические частицы HBsAg

Вирусные частицы

Рисунок 193 – Вирусоподобные и вирусные частицы при гепатите В. Заимствовано и адаптировано из Интернет-ресурсов.

В 1970 г. в сыворотке крови больных с пост-трансфузионным гепатитом британский ученый Д. Дейн (David Maurice Surrey Dane, 19231998 гг.) с сотрудниками при электронной микроскопии обнаружили крупные частицы (42 нм), названные “частицами Дейна” (рисунок 194).

Рисунок 194 – Частицы Дейна. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

236

Частицы Дейна проявляют выраженную инфекционность. Последующее изучение показало, что эти частицы представляют собой не что иное, как полноценные вирионы вируса гепатита В.

В 1979 г. Ф. Галиберт (рисунок 195) с сотрудниками секвенировали полный геном вируса гепатита В.

Рисунок 195 – Ф. Галиберт (Francis Lucien Galibert, род. в 1934 г.).

Заимствовано из Интернет-ресурсов.

В 1986 г. чилийский биохимик П. Валенсуэла (рисунок 196) создал генно-модифицированную (рекомбинантную) вакцину против гепатита В.

Рисунок 196 – Пабло Валенсуэла (Pablo Valenzuela, род в 1941 г.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

238

Геном

Липидный

бислой

Рисунок 198 – Строение вируса гепатита В. Заимствовано и адаптировано из Интернет-ресурсов.

В суперкапсидной оболочке различают 3 типа HBs-антигена: S- HBsAg или S-гликопротеин (англ. small - маленький), M-HBsAg или М- гликопротеин (англ. middle – средний) и L-HBsAg или L-гликопротеин (англ. large - большой). S-HBsAg является главным антигеном оболочки вируса, составляет 70% от общего количества поверхностных гликопротеинов. L-HBsAg включает в себя полный S-HBsAg и дополнительную аминокислотную последовательность на N-конце. L- HBs-антиген отвечает за связывание вириона с клеточным рецептором.

HBsAg обнаруживается в крови через 1,5 месяца после инфицирования. Наличие HBs-антигена свидетельствует об инфицированности организма вирусом гепатита В. Наличие антител к HBs-антигену связано с невосприимчивостью к гепатиту В в результате формирования постинфекционного или поствакцинального иммунитета.

HBcAg в кровеносном русле в свободном виде не обнаруживается. Он может быть обнаружен только при морфологическом исследовании биоптатов печени (маркёр репликации вируса в гепатоцитах).

HBeAg обнаруживается в крови больного в активной фазе болезни и свидетельствует о высокой заразительности больного. Обнаружение HBeAg у пациентов с хроническим гепатитом указывает на активацию инфекционного процесса.

Нуклеокапсид имеет кубический тип симметрии. Капсид состоит из 180 белковых субъединиц (капсомеров). Геном вируса образован двунитевой молекулой ДНК с дефектом одной нити (одна нить короче

239

другой на 1/3). Короткая нить ДНК является неполной плюс-нитью. Длинная нить ДНК является минус-нитью. Длинная нить связана с ДНКполимеразой, которая достраивает плюс-нить до полноценной структуры. ДНК-полимераза способствует синтезу новых нитей ДНК на матрице как ДНК, так и РНК.

В составе генома присутствует 4 гена (S, C, P и X). Открытые рамки считывания определенных генов частично перекрывают друг друга. Ген S кодирует синтез HBs-антигена. Гену S предшествуют 2 участка: pre-S1и pre-S2. Ген S и указанные 2 участка кодируют 3 белка: белок S-HBsAg кодируется S-геном, белок M-HBsAg кодируется pre-S2 и S-геном, а белок L-HBsAg кодируется pre-S1, pre-S2 и S-геном. Ген С кодирует белок нуклеокапсида HBcAg. Перед геном С расположен участок preCore, детерминирующий синтез регуляторного белка. Ген Р кодирует РНК-зависимую ДНК-полимеразу. Ген Х определяет синтез белка, ответственного за регуляцию синтеза матричных РНК, являющихся основой для всех вирусных протеинов. Схема строения генома вируса гепатита В представлена на рисунке 199.

Рисунок 199 – Схема строения генома вируса гепатита В. Заимствовано и адаптировано из Интернет-ресурсов.

Строение вируса гепатита В представлено на рисунке 200.

240

Сердцевина

Геном

Рисунок 200 – Строение вируса гепатита В. Заимствовано с сайта

ViralZone.

Жизненный цикл вируса гепатита В. Репродукция вируса гепатита В начинается со специфического связывания L-гликопротеина с клеточными рецепторами и проникновения сердцевины вируса путем эндоцитоза внутрь клетки. После этого происходит слияние суперкапсидной оболочки с мембраной эндосомы и высвобождение нуклеокапсида в цитоплазму клетки. Освободившийся нуклеокапсид транспортируется к ядру клетки. В нуклеоплазму проникает вирусная геномная ДНК. В ядре клетки с участием клеточной РНК-полимеразы образуется шесть видов иРНК. Одна иРНК (прегеномная РНК) является матрицей для синтеза ДНК дочерних вирионов (прегенома). При этом синтез минус-нити ДНК протекает под действием РНК-зависимой ДНКполимеразы вируса на матрице прегенома, а образование плюс-нити ДНК происходит затем на основе минус-нити ДНК.

Остальные пять разновидностей иРНК служат матрицей для синтеза вирусных белков. Белки сердцевины вируса собираются вокруг ДНКпрегенома. Синтез вирусных белков несбалансирован: в огромном количестве синтезируется HBs–антиген, который выходит в кровь (антигенемия) одновременно с выходом дочерних вирионов.

Сборка суперкапсидных оболочек дочерних вирионов происходит на НВs-содержащих мембранах эндоплазматической сети. Выход вирионов из клетки проходит путем экзоцитоза.

В некоторых случаях вирусная ДНК встраивается в клеточный геном в виде провируса. В таком случае развивается интегративная