6 курс / Диетология и нутрициология / ОСТАТОЧНЫЕ_СОДЕРЖАНИЯ_ПЕСТИЦИДОВ_В_ПИЩЕВЫХ_ПРОДУКТАХ_МЕТОДЫ

Продолжение таблицы 1

Фактор

Уровень

Номер анализа или

критерий

примечания

тип необходимого

Количественный

Скрининговый

испытания

метод

метод

1.6 Гомогенность ана­

работе с другими образцами

лита в аналитической

со сходными физическими

пробе

характеристиками вне зави­

(окончание)

симости от аналита.

Тест может сочетаться с

тестированием стабильности

анализируемого вещества

(см. раздел 1.7 данной

таблицы). Необходимо опре­

деление постоянной отбора

проб3,4 при подсчете разме­

ра аналитической части для

удовлетворения критериям

качества, обусловленных

CVSp ≤ 10%. Может отсутс­

твовать необходимость в

определении CVSp отдельно,

если CVL остатков, подвер­

гнутых внешним воздейс­

твиям, находится в пределах

ограничений, уточненных в

таблице 2.

1.7 Стабильность

Около ДП

Добавка известного

Нет необходимости

Аналит, добавленный

Температура пробы во вре­

аналита при обработке

количества аналитов

уточнять стабиль­

на НПК, продолжает

мя обработки может быть

пробы

в анализируемые про­

ность аналита, если

оставаться определяе­

критической. Процесс вали­

дукты до обработки

суммарное среднее

мым после обработки

дации применяют с любой

пробы. Анализ ≥5

извлечение аналита,

последующей процедурой.

параллельных каждо­

добавленного до обра­

Валидация может быть спе­

го продукта, последу­

ботки пробы (включая

цифичной для определенно­

ющая обработка.

производственное

го аналита вещества и/или

извлечение) и CVA

матрицы пробы.

Применение ус­

в пределах диапазо­

Определения среднего

тойчивого маркера

нов, обозначенных в

значения извлечения и CVL

соединения вместе

таблице 3.

лабильного и стабильного

с надежными ана­

Определение стабиль­

маркерных соединений для

литами. Для МОМ и

ности, если суммарное

испытания стабильности.

группо-специфичных

извлечение и проце­

Применение этих соедине­

методов (ГСМ) можно

дурное извлечение

ний для испытания внутрен­

испытовать несколько

существенно отлича­

него контроля качества (см.

аналитов, которые

ются (Р=0,05).

Раздел 4).

могут быть хорошо

Выражение соотношения

разделены.

средней концентрации

лабильных и стабильных

соединений, чтобы показать

устойчивость остаточных

содержаний. CV стабильных

соединений также покажет

внутрилабораторную вос­

производимость

1.8 Эффективность

Около ДП или пол­

Анализ ≥€5 пораллель­

Для проб продуктов,

Среднее значение ос­

Температура экстракта,

экстракции

ностью измеряемые

ных частей проб или

загрязненных остаточ­

таточных содержаний,

скорость измельчителя или

остатки

эталонного материала

ными содержаниями,

о которых известно,

диспергатора Ultra Turrax,

с добавленными ос­

средний результат,

что они будут присутс­

время извлечения и соотно­

таточными содержа­

полученный в эта­

твовать на уровне или

шение растворитель/вода/

ниями.

лонной процедуре и

около ПКО или НПК,

матрица могут существенно

Сравнение эталонной

испытуемой процедуре

фактически определя­

повлиять на эффективность

(или другой) проце­

не должен существенно

емо в пробах.

экстракции. Эффект этих

дуры с результатами

отличаться при приме­

параметров может быть про­

испытаний.

нения расчета CVL. при

верен с помощью испытания

Для МОМ ипытуемые

уровне Р = 0,05

устойчивости результатов.

аналиты предпочти­

Или согласованное

Оптимизированные усло­

тельно должны иметь

значение эталонного

вия необходимо сохранять

широкий диапазон

материала и среднего

постоянными насколько

значений коэффици­

остатка не должно

возможно.

ентов распределения.

существенно отличать­

Валидация в целом приме­

Это определение

ся от уровня Р = 0,05

нима к продуктам одной

неоходимо проводить,

при расчете с CVA испы­

группы и представленным

используя только

туемого метода. Если

анализируемым веществам

продукты, загряз­

CVA метода больше

со сходными физико-хими­

ненные остаточными

10%, число повторений

ческими свойствами.

содержаниями.

анализов должно

Продолжение таблицы 1

Фактор

Уровень

Номер анализа или

критерий

примечания

тип необходимого

Количественный

Скрининговый

испытания

метод

метод

1.8 Эффективность

быть увеличено для

Валидация независима от

экстракции

сохранения относи­

последующих процедур

(окончание)

тельной стандартной

метода.

средней ошибки <5%.

Среднее извлечение для

В остальных случаях

каждого метода будет оп­

определить количес­

ределено из аналитических

тво и зарегистриро­

частей с введенными добав­

вать эффективность

ками. Поправка результатов

экстракции (исключая

со средним значением

извлечение аналити­

извлечения, если оно сущес­

ческой фазы, следую­

твенно отличается от 100%.

щей за экстракцией).

В соответствии с некоторы­

ми нормативами скрининго­

вые наборы должны быть

протестированы на положи­

тельное определение с 95%

достоверностью.

1.9. Стабильность

Около ДП

Анализ свежегомоге­

Нет существенных

Аналит, добавленный

Хранение оценивается для

аналита при хранении

низированных проб,

потерь аналита при

на нижнем пределе

применения с любыми пос­

пробы

содержащих остаточ­

хранении (Р = 0,05)

градуировки остается

ледующими процедурами.

ные содержания, или

определяемым после

Валидация применима для

гомогенизированных

хранения

испытываемого аналита.

и холостых пробы с

Однако, в целом, данные о

добавками известного

стабильности при хранении,

количества оста­

полученные с использо­

точных содержаний

ванием репрезентативных

(время 0), и затем

матриц пробы могут быть

анализ проб, храни­

рассмотрены как обосно­

мых в соответствии со

ванные для сходных матриц.

стандартными проце­

Матрицы отбираются с

дурами лаборатории

учетом химической стабиль­

(обычно при ≤–18 oC).

ности (например, гидролиз)

Время хранения долж­

аналита и предполагаемого

но быть больше

использования вещества.

или равно, чем на­

Полезная информация

ибольший интервал,

может быть получена из

предусмотренный

оценок ССОП5 или из дан­

между взятием проб и

ных, представленных при

анализом.

регистрации аналита.

≥€5 повторений в каж­

Регистрация исходной и

дой временной точке.

конечной концентрации

Если сохраненные час­

остаточного содержания,

ти анализируются ≥ 4

и извлечения аналита ве­

раз, испытывают ≥€2

щества.

частей с добавкамии

Предотвратить не являюще­

≥ 1 холостой части,

еся необходимым хранение

в которую добавка

можно при тщательном

введена во время ана­

планировании отбора проб и

лиза. Аналитические

последующего

части должны быть

анализа посредством адми­

разморожены только

нистративного устройства,

непостредственно

что не является частью ана­

перед или во время

литического метода.

экстракции

2. Усовершенствование утвержденного метода

2.1. Стабильность

См. 1.1, 1.2 и 1.9

Только если информация

аналита при хранении

о стабильности в условиях

проб, процессах пробо­

обработки и о репрезента­

подготовки и анализа,

тивной матрице не доступна.

в экстрактах и стандар­

тных растворах.

2.2. Градуировочная

НПГ до 2 (3) ДП

Три точки градуиров­

Для линейной градуи­

Для линейной градуи­

Валидация метода может не

функция, матричный

ки, охватывающие

ровки: коэффициент

ровки: коэффициент

предоставить определенной

эффект

ДП с аналитическими

регрессии стандарт­

регрессии (r) ≥ 0,98.

информации о влияниях

стандартами, согласо­

ного аналитического

Относительное стан­

матрицы, поскольку влияния

ванными и не согласо­

раствора (r) ≥ 0,99.

дартное отклонение

матрицы зависят от време­

ванными с матрицей.

Относительное стан­

остатков (Sy/x) ≤ 0,2.

ни, пробы (иногда), колонки

дартное отклонение

Для полиноминальной

и т.д.

остатков (Sy/x) ≤€0,1.

функции (r) ≥€0,95.

Для полиноминальной

функции (r) ≥ 0,98.

Продолжение таблицы 1

Фактор

Уровень

Номер анализа или

критерий

примечания

тип необходимого

Количественный

Скрининговый

испытания

метод

метод

2.3 Точность, прецизи­

На ДП

Предварительное

Извлечение оста­

Аналиты, добавленные

Применяют CVAtyp, обос­

онность, НПО, ПКО

планирование:

точных содержаний

к холостым пробам на

нованное при валидации

а) Анализ аналитичес­

должно быть в пре­

целевом сообщаемом

метода.

ких частей репре­

делах повторяемости

уровне, должны быть

Метод должен быть испы­

зентативных проб

метода:

измеримы во всех

тан только с продуктами,

матрицы при интере­

3 части: Cmax- Cmin ≤

испытаниях

которые предполагают

сующем увеличении

3,3CVAtyp*Q

использование (возможно,

уровня ДП.

2 части:

неправильное) аналита

Непредвиденно най­

Cmax- Cmin ≤

дены:

2,8*CVAtypQ

Введите 2, предпоч­

CVAtyp – типичный

тительно 3, допол­

воспроизводимый

нительных частей

коэффициент вари­

аналитической пробы

ации адаптируемого

приблизительно на

метода.

уровне нового анали­

Q – среднее извле­

та. Расчет «извлече­

чение нового анали­

ния» добавленного

зируемого вещества;

аналита вещества.

должно соответство­

Применение сходных

вать таблице 3.

матриц пробы для

испытания извлече­

ния, если недоступно

соответствующее

количество аналити­

ческой пробы.

2. 4 Специфичность и

На НПГ

Идентификация с по­

Измеренный отклик

Частота ошибок вто­

Если планируется усовер­

селективность опреде­

мощью масс-спектро­

обусловлен исключи­

рого рода (β ошибка)

шенствование для нового

ления аналита

мертии или соответс­

тельно анализируемым

при ДП должна быть

аналита, применимость ме­

твующей доступной

веществом.

< 5%

тода должна быть проверена

комбинацией техно­

Применяемая система

для всех репрезентативных

логии разделения и

определения должна

матриц пробы, в которых

определения.

иметь детектор с ана­

может быть аналит.

логичными или

Предварительное

лучшего качества

планирование:

техническими харак­

а) Анализ одной репре­

теристиками, чем при

зентативной холос­

валидации метода.

той пробы из каждой

Остаточные содер­

интересующей

жания, измеренные

группы продуктов

на двух различных

(в которой анализи­

колонках, должны

руемое вещество,

быть в пределах кри­

вероятно, при­

тического диапазона

сутствует). Анализ

повторных хроматог­

новой матрицы с

рафических опреде­

репрезентативными

лений. Относительные

соединениями.

величины удержива­

Непредвиденнонайдены:

ния репрезентативных

б) проверка отклика

аналитов, полученные

холостой пробы

при валидации ме­

(если возможно) или

тода, и измеренные

демонстрация, что

должны быть в пре­

измеренный отклик

делах 2% для ГЖХ и

соответствует только

5% для ВЭЖХ опре­

анализируемому

делений.

веществу, примене­

ние наиболее качес­

твенной технологии,

доступной в данной

лаборатории.

Проверка δ и ФОЧ

определения и ОВу

репрезентативного

аналита. Сравнение

ОВу и отклика нового

аналита с другими

аналитами, испытан­

ными при валидации

метода и с холостыми

откликами, получен­

ными при усовер­

шенствовании метода

и при предыдущей

валидации метода.

44

Окончание таблицы 1

Фактор

Уровень

Номер анализа или

критерий

примечания

тип необходимого

Количественный

Скрининговый

испытания

метод

метод

3.5 Специфичность и

На ДП

Проверка технических

Измеренные отклики

Частота ошибкок

Относительная чувствитель­

селективность опреде­

характеристик приме­

относятся только к

второго рода при ДП

ность специфических детек­

ления аналита.

няемого детектора и

аналиту. Технические

должна быть обычно

торов может существенно

сравнение их с теми,

характеристики

< 5%.

изменяться в зависимости

что определены для

детектора (чувстви­

от модели. Надлежащая

данного метода.

тельность и селектив­

проверка специфичности

Проверка отклика

ность) должны быть

определения необходима

одной холостой пробы

аналогичны или луч­

для получения надежных

каждого репрезента­

ше, чем определены

результатов.

тивного продукта, в

для данного метода.

Сравнение холостого от­

остальных случаях вы­

См. раздел 1.4.

клика, наблюдаемого при

полнение испытаний

стандартных пиках, заре­

как описано в разделе

гистрированных в холостых

1.4.

экстрактах.

См. другие комментарии в

разделе 1.4.

3.6 Гомогенность

На уровне ДП или

Тестируют два репре­

CVSp<10%

CVSp<15%

Испытания выполняются

аналита

хорошо определяемые

зентативных продукта

Для скрининговых

для подтверждения подобия

остаточные содер­

различного происхож­

методов желательно

условий эксплуатации и

жания

дения

взять часть, в которой

использования параметров,

ожидается наиболее

полученных лабораторией,

высокий уровень

подтверждающей достовер­

остатков (например,

ность метода. Если резуль­

кожура цитрусовых)

таты испытания аналогичны

и необходимости в

зарегистрированным CVSp,

достижении гомоген­

условия обработки пробы

ности не будет.

могут считаться подобны­

ми и нет необходимости в

дальнейших испытаниях для

валидации метода.

3.7 Стабильность

См. 1.1

См. 1.1

См. 1.1

См. 1.1

Данное испытание можно

аналита в экстрактах и

исключить, если с методом

стандартных растворах

предоставляется полная

Концентрация

Сходимость

Вопроизводимость

Правильность2

CV % 3

CV

%4

CV %3

CV

%4

Диапазон среднего % извлечения

A

L

A

L

≤1 мкг/кг

35

36

53

54

50 − 120

> 1 мкг/кг ≤ 0,01 мг/кг

30

32

45

46

60

− 120

> 0,01 мг/кг ≤

0,1 мг/кг

20

22

32

34

70

− 120

> 0,1 мг/кг ≤ 1 мг/кг

15

18

23

25

70

− 110

> 1 мг/кг

10

14

16

19

70

− 110

1.

Для методов определения множественных остатков пестицидов могут быть определенные аналиты,

где эти количественные критерии выполнения не могут быть точно соблюдены. Приемлемость данных,

полученных в этих условиях, будет зависеть от цели анализов, например, если при проверке на

соблюдение ПДК указанные критерии должны быть выполнены насколько это технически осуществимо,

в то время как любые данные существенно ниже ПДК могут быть приемлемы с более высокой

погрешностью.

2.

Данные диапазоны извлечения подходят для методов определения множественных остатков пестицидов.

Более жесткие критерии могут быть необходимы для некоторых целей, например, методов для

отдельных анализируемых веществ или остатков ветеринарных лекарственных препаратов (см. том 3

Кодекса, 1996).

3.

CVA: коэффициент изменения анализа, за исключением обработки пробы. Данный параметр может быть

оценен по тестам, выполненным с эталонными материалами или аналитическими частями, мечеными

до экстракции. Приготовленный в лаборатории эталонный материал может быть использован при

отсутствии сертифицированного эталонного материала.

4.

CVL: суммарный коэффициент изменчивости лабораторных результатов, включающий до 10%

изменчивости остатков между аналитическими частями (CVSp). Примечание: изменчивость остатков

между аналитическими частями может быть подсчитана из погрешности измерения повторных частей

45

проб (CVL), содержащих остатки; CVL = CVSp+ CVІA .

46

Таблица 4. Требования к выполнению поверки

Фактор

Уровень(-ни)

Номер анализа или

критерий

примечания

тип требуемого

испытания

Количественный

Скрининговый

анализ

метод

4. Качественный контроль (выполнение поверки)

4.1. Постоянно используемые методы

4.1.1 Соответствие

Для каждой новой

Нет мешающего

Нет мешающего

Вперемешку, если холостая проба,

химических ве­

партии: тестирова­

отклика ≥0,3 НПК

отклика ≥0,5 ДП.

калибровка и извлечение удовлетвори­

ществ, адсорбентов

ние холостого реа­

тельны, то пригодность реагентов и т.д.

и реагентов

гента, пригодность

подтверждена.

ад(аб)сорбентов и

реагентов.

Получение произ­

водных (без пробы)

4.1.2 Калибровка

Может быть ис­

Аналитическая

Аналит определя­ Стандартные раствор и пробы следует

и аналитический

пользована одното­

партия может быть

ется при НПГ.

вводить поочередно.

диапазон

чечная калибровка

подвергнута статис­

Это может обеспечить времясберега­

со стандартными

тическому контро­

ющую альтернативу многоточечной

смесями, если ка­

лю, если аналити­

калибровке, особенно при отсутствии

либровочная функ­

ческие стандарты

автоматического пробоотборника.

ция пересекает оси

и экстракты проб

Поскольку реакция системы часто изме­

координат около

введены поочеред­

няется, регулярно должна выполняться

нуля.

но, и вычисленное

многоточечная калибровка для подтверж­

Применение мно­

относительное

дения, что калибровочная функция пере­

готочечной граду­

стандартное от­

секает оси координат около нуля.

ировки (3x2) для

клонение остатков

Необходимость в многоточечной калиб­

количественного

≤0,1.

ровке отсутствует, если концентрация

подтверждения.

стандартного вещества в калибровочном

растворе очень близка к концентрации к

аналита в пробе.

4.1.3 Точность и

В пределах аналити­

Включает в каждой

Технические характеристики детектора

Добавка к аналитической части стан­

прецизионность

ческого диапазона.

аналитической

и хроматографической колонки должна

дартной смеси (смесей). Изменение

партии ≥1 пробы с

быть аналогичными или лучше, чем опре­

стандартных смесей в различных партиях

добавкой стандар­

делено для данного метода.

для получения извлечений для всех

тной смеси, либо

Предпочтительно, чтобы все извлечения

интересующих аналитов в необходимых.

повторный анализ

были в пределах предупредительной

Выполнение поочередных исследований

положительной

границы контрольной карты, построенной

извлечений при ДП, а также при НПК и

пробы.

согласно описанию в параграфе 4.5.2. В

2-кратном ДП соответствующим образом

большой партии одна из каждых 20 или

для подтверждения применимости мето­

100 проб могут быть вне предупредитель­

да в пределах аналитического диапазона.

ных границ и пределов, соответственно.

Частота исследований извлечений при ДП

Аналитическая партия должна быть

должна быть в 2-3 раза выше, чем при

проанализирована повторно, если любое

других уровнях.

из извлечений выходит за пределы, или

Повторный анализ положительных проб

результаты повторных анализов положи­

может заменить испытание извлечения

тельной пробы превышают критический

в определенной партии Для МОМ гото­

интервал.

вят стандартные специальные смеси из

Cmax– Cmin > 2,8*CVLtypQ

продуктов или/и аналитов, которые могут

Q – среднее остаточное содержание,

быть в какой-либо специфичной пробе.

полученное при повторных измерениях,

Выбранные для одной смеси аналиты

CVLtyp – оценка внутрилабораторной

должны быть безусловно качественно и

воспроизводимости, которая включает

селективно разделимы и определимы.

суммарные погрешности пробоподготов­

Для предварительной идентификации:

ки и анализа.

подготовка аналитических партий, содер­

жащих соответствующие смеси для испы­

тания определения, и образцов проб.

Для количественного определения /

подтверждения в аналитическую партию

включают стандартную смесь для опре­

деления, соответствующее количество

градуировочных смесей, концентрирован­

ных холостых проб или одну повторную

положительную пробу и новые положи­

тельные пробы.

Поочередно вводят стандарты и пробы.

50

Продолжение таблицы 4.

Фактор

Уровень(-ни)

Номер анализа или

критерий

примечания

тип требуемого

испытания

Количественный

Скрининговый

анализ

метод

4.3. Методы, применяемые при нерегулярных интервалах

Тесты описаны в 4.1 за исклчением следующих

4.3.1. Точность и

На ДП и НПГ

Включает одну

Минимум два извлечения не должны

Приемлемые результаты также доказыва­

прецизионность

концентрированную

превышать предупредительной границы,

ют пригодность применяемых химичес­

(воспроизводи­

на уровне НПГ про­

одно может быть менее предела на конт­

ких веществ, адсорбентов и реагентов.

мость)

бу и две пробы на

рольной карте.

Подтверждение результатов выше 0,5 ДП.

уровне ДП в каждой

Остаточные содержания, измеренные в

Если критерии выполнения были неудов­

аналитической

повторных частях должны быть в крити­

летворительными, метод должен быть

партии. Используют

ческом пределе:

перепроверен, его технические характе­

добавки стандарт­

Cmax – Cmin ≤2,8*CVLtypQ or Cmax –Cmin

ристики (Q, CVAtyp, CVLtyp) должны быть

ных образцов, если

≤ f(n)*CVLtypQ

обоснованы еще раз во время частичной

нет необработанной

Q – среднее остаточное содержание, полу­

повторной валидации метода.

пробы (сходной с

ченное при повторынх измерениях, CVLtyp

анализируемыми в

– получен при валидации метода, f(n) – фак­

партии).

тор для расчета крайнего предела, завися­

Выполняют анализ

щий от количества повторных проб.

с ≥2 аналитически­

ми частями.

4.4. Изменения при реализации метода

Изменение

Испытуемые

Для методов испытания и приемлемости критериев см. соответствующие разделы Приложения 1.

факторы

4.4.1. Хроматогра­

Испытывают селек­ Нельзя менять рабочие характеристики

Применение соответствующих аттестован­

фическая колонка

тивность разделе­

ных смесей для получения информации о

ния, разрешение,

рабочих характеристиках колонки.

инерционность,

значения RRt ОВу.

4.4.2. Оборудование

Гомогенность под­

Должно быть выполнено испытание, описанное в 1.6 и 1.7,

Испытание на определение гомогенности

для пробоподго­

готовленной пробы;

и должны быть получены результаты, подтверждающие соот­

необходимо, если степень измельчения

товки

Стабильность ана­

ветствующие критерии.

и/или смешивания хуже, чем на исходном

литов.

оборудовании. Необходимо испытание ста­

бильности аналита, если время пробоподго­

товки и температура существенно выше.

4.4.3. Оборудование

Сравнение совокуп­

Средние результаты определения остаточных содержаний не

Испытание необходимо, если применяет­

для экстракции

ности продуктов,

должны существенно отличаться при р = 0,05.

ся новый тип оборудования.

загрязненных

остаточными

содержаниями на

детектируемых

уровнях, которые

были определены

на старом и новом

оборудовании в ≥ 5

повторениях.

4.4.4. Определение

Тестирование

Технические характеристики должны быть аналогичными или

Тестируют также возможность обнаруже­

селективности

лучше, чем уточненные в описании метода.

ния раздельно с новыми реагентам опре­

разделения и

деления.

селективности и

чувствительности

определения.

4.4.5.

≥€5 испытаний

Все результаты должны быть в предупредительных границах,

Это минимальное требование.

Химик-аналитик

извлечения на каж­

уточненных для данного метода в лаборатории.

Лаборатории в некоторых областях

дом уровне (НПК,

Повторный анализ проб должен быть в критическом пределе.

работы с остаточными содержаниями

ДП и 2(3)ДП), пов­

используют более детальные протоко­

торный анализ хо­

лы, которые включают: (1) построение

лостых проб и двух

калибровочной кривой в пределах прием­

положительных

лемых критериев; (2) минимум две ана­