6 курс / Диетология и нутрициология / ОСТАТОЧНЫЕ_СОДЕРЖАНИЯ_ПЕСТИЦИДОВ_В_ПИЩЕВЫХ_ПРОДУКТАХ_МЕТОДЫ

Руководящие.принципы.надлежащей.лабораторной.практики,.касающиеся.анализа.

остаточных.содержаний.веществ.(CAC/GL.40-1993,.Rev..1-2003)

характеристик. .Из.таблицы.5.может.быть.выбран.репрезентативный.продукт.для.представления.группы.продуктов,.имеющей.общие.свойства,. и.использован.для.валидации.процедуры.или.метода. .В.таблице.5.классификация.продуктов.осуществлена.в.соответствии.с.Классификацией. Кодекса2.

Следующие.примеры.демонстрируют,.насколько.широко.данные.по.валидации.могут.быть.распространены.на.другие.продукты:.

•зерновые.злаки,.валидация.для.всех.зерновых.не.может.быть.применена.для.отрубей.или.хлеба,.но.валидация.для.пшеничного.зерна. может.быть.применена.для.ячменного.зерна.или.пшеничной.муки;.

•продукты. животноводства,. валидация. для. мышечной. ткани. не. применима.к.жиру.или.субпродуктам,.но.валидация.для.куриного. жира.может.быть.применена.для.жира.крупного.рогатого.скота;.

•фрукты.и.овощи,.валидация.для.всех.свежих.продуктов.не.может. быть. применена. для. высушенного. продукта,. но. валидация. для. капусты.кочанной.может.быть.применена.для.капусты.брюссельской. .

4..4..4..2. .Подобным.образом.репрезентативные.аналиты.могут.быть.использованы.для.определения.рабочих.характеристик.метода. .Могут.быть. выбраны.соединения,.обладающие.такими.физико-химическими.свойс- твами.аналита,.которые.ориентированы.на.определение.данным.методом. .Выбор.репрезентативного.аналита.должен.быть.основан.на.цели.и. области.метода.анализа,.при.соблюдении.следующих.условий:.

а). Выбранные.репрезентативные.аналиты.должны:

1). обладать.достаточно.широким.диапазоном.тех.физико-хими- ческих.свойств.которыми.обладает.аналит,.который.предполагают.определять..

2). быть.такими,.которые.будут.определять.регулярно.или.для.которых.принципиально.важные.решения.будут.приниматься.на. основании.результатов.анализа..

б). По.мере.возможности,.все.аналиты,.включаемые.в.первоначальный.процесс.валидации,.должны.быть.такими,.которые.будут.определяемы.регулярно.и.которые.могут.быть.одновременно.определены.применяемой.системой.детектирования..

в). Концентрация.аналитов,.применяемых.для.характеристики.метода,. должна.покрывать.допустимые.пределы.(ДП,.см. .Глоссарий.терминов).всех.анализируемых.веществ,.планируемых.для.исследования,. во. всех. продуктах. . Следовательно,. выбранные. репрезентативные. аналиты.должны.включать,.кроме.всего.прочего,.вещества.с.вы-

2.Codex.Alimentarius,.Volume.2,.2nd.ed..,.Pesticide.Residues.in.Food,.pp. .147–365,.FAO,.1993..

Раздел.4. .Анализ

соким.и.низким.ДП. .Таким.образом,.расширенные.пределы.концентраций. аналитов,. используемые. при. испытании. технических. характеристик.с.помощью.аналитов./репрезентативных.продуктов,. не.обязательно.должны.соответствовать.действующим.ДП. .

4..4..5. .Если.соответствующие.данные.уже.имеются,.химик-аналитик.не. обязательно.должен.выполнять.все.испытания. .Однако,.вся.необходимая.информация.должна.быть.включена.или.упоминаема.в.контрольных. записях. .В.таблице.1.представлен.обзор.факторов,.предназначенных.для. валидации.метода.в.соответствии.со.статусом.метода,.для.которого.будет. проводиться.валидация. .Специфические.факторы.и.критерии,.которые. будут. оцениваться,. представлены. в. таблице. 2. . Оцениваемые. факторы. должны.быть.ограничены.только.теми,.которые.соответствуют.как.методу,.так.и.цели,.для.которой.определенный.метод.будет.применяться. .Во. многих.случаях.технические.характеристики.в.отношении.нескольких. факторов. могут. быть. получены. одновременно. в. одном. эксперименте. . Проекты.испытаний,.в.которых.различные.факторы.изменены.в.одно. и.тоже.время.(проекты.факторного.эксперимента),.могут.помочь.минимизировать.необходимые.средства. .Технические.характеристики.аналитического.метода.должны.быть.проверены.как.во.время.его.разработки,. так. и. при. последующем. применении,. как. показано. в. подразделе. 4..5,. в.соответствии.с.критериями,.приведенными.в.таблице.3..

4..4..6. .Методы,.которые.предназначены.для.определения.одного.определенного.вещества.(ООМ).необходимо.полностью.проверить.со.всеми. аналитами.и.веществами.самих.проб,.специфичных.для.целевого.назначения.или.должны.быть.использованы.матрицы.проб,.репрезентативных. для.анализируемых.данной.лабораторией. .

4..4..7. .Методы,.которые.предназначены.для.определения.специфичной. группы.веществ.(ГСМ),.должны.быть.изначально.проверены.с.одним. или.более.репрезентативными.продуктами.и.как.минимум.двумя.репрезентативными.аналитами,.отобранными.из.группы..

4..4..8. .Методы,.которые.предназначены.для.определения.остаточных.содержаний.многих.веществ.(МОМ).должны.быть.проверены.с.применением.репрезентативных.продуктов.и.репрезентативных.аналитов..

4.5. ПРОВЕРКА РАБОЧИХ ХАРАКТЕРИСТИК

4..5..1. .Основные.цели.проверки.рабочих.характеристик:

•мониторинг выполнимости метода в реальных условиях, преобладающих при его использовании;

•учет влияния неизбежных изменений, вызванных, например, составом проб, техническими характеристиками инструментов, качес-

Руководящие.принципы.надлежащей.лабораторной.практики,.касающиеся.анализа.

остаточных.содержаний.веществ.(CAC/GL.40-1993,.Rev..1-2003)

твом химических препаратов, сменой химика-аналитика, выполнявшего анализ и условий окружающей среды лаборатории;

•демонстрация, что рабочие характеристики метода аналогичны обоснованным при его валидации и показывающая, что данный метод«статистическиконтролируем»иточностьинеопределенность результатов определения сопоставимы с ожидаемыми. С этой целью данные, полученные во время валидации метода, могут быть обновлены данными, полученными при проверке рабочих характеристик во время регулярного применения метода.

Результаты. внутреннего. контроля. качества. предоставляют. существенную. информацию. в. отношении. долгосрочной. воспроизводимости. и.других.рабочих.характеристик.метода,.включая.сведения.о.тех.аналитах.и.продуктах,.которые.были.включены.в.область.применения.метода. анализа.во.время.его.усовершенствования..

В.таблице.2.описаны.основные.рабочие.характеристики,.которые.должны. подвергаться.испытаниям.и.соответствующие.процедуры.испытаний..

Для.эффективной.проверки.рабочих.характеристик,.анализ.проб.выполняется. одновременно. с. соответствующим. контролем. качества. анализа. (анализ.холостых.проб.и.определение.«извлечения».(«введено-найдено»),. анализ.образцов.сравнения.и.т..д..). .Могут.быть.использованы.контрольные.карты.для.проверки.на.наличие.отклонений.при.выполнении.метода. и.для.подтверждения,.что.осуществляется.статистический.контроль. ..

4..5..2. .Построение.и.применение.контрольных.карт

4..5..2..1. .Контрольные.карты.могут.быть.полезным.инструментом.для.демонстрации.выполнения.метода.и.повторяемости.выбранного.параметра. .Примером.является.контрольная.карта.«извлечений». .Ее.применение.зависит.от.задач.лаборатории. .Если.анализируется.большое.число. однотипных.проб.для.одних.и.тех.же.действующих.веществ,.контрольная. карта.основана.на.среднем.«извлечении».и.его.стандартном.отклонении,. полученном.при.регулярном.применении.метода. .Если.анализируются. небольшие.количества.каждой.из.большого.набора.проб.для.большого. числа.аналитов.с.процедурой.анализа,.предназначенной.для.определения. остаточных.содержаний.многих.аналитов,.контрольные.карты.не.могут. быть.применены.обычным.способом. .В.таких.случаях,.первоначально. контрольная.карта.строится.со.средним.показателем.«извлечения».(Q). репрезентативных.аналитов.в.репрезентативных.матрицах.и.типичным. воспроизводимым. внутрилабораторным. коэффициентом. вариации.

(CVAtyp),.полученным.описанным.ниже.способом. .Если.данные.среднего.показателя.«извлечения».и.их.коэффициенты.вариации,.полученные.

при.валидации.метода.для.отдельного.анализируемого.вещества/матриц. пробы,. статистически. не. различны,. они. могут. быть. рассмотрены. как.

Раздел.4. .Анализ

оценка.истинного.«извлечения».и.прецизионности.метода,.и.их.соответствующая.комбинация.среднего.извлечения.(Qtyp) .и.коэффициента.

вариации.(CVAtyp).метода.может.быть.обоснована.и.применена.для.построения.первоначальной.контрольной.карты. .Предупредительной.грани-

цей.и.пределом.на.контрольной.карте,.при.выходе.за.который.необходимо.вмешательство.в.процесс.анализа,.являются

Qtyp.±.2*CVAtyp*Q.и.Qtyp.±.3*CVAtyp*Q,.соответственно. .

4..5..2..2. . Если. метод. применяется. для. регулярного. анализа. различных. комбинаций.аналитов/матриц,.представленных.при.валидации.метода,. индивидуальные.«извлечения».наносятся.на.карту. .Воспроизводимость. метода.при.его.рутинном.использовании.может.быть.в.некоторой.степени.выше,.чем.полученная.при.валидации. .Поэтому,.если.значения.«извлечений».лежат.выше.предупредительных.границ.или.иногда.вне.предела.на.контрольной.карте,.но.в.диапазонах,.полученных.из.значений. CVA.,.приведенных.в.таблице.3,.специальных.действий.не.требуется..

4..5..2..3. . Основываясь. на. дополнительных. 15–20. испытаниях. «извлечения»,. выполненных. при. регулярном. применении. метода,. как. части. проверки.технических.характеристик,.среднее.или.типичное.извлечение. и.CVA.должны.быть.пересчитаны,.на.основании.чего.и.будет.построена. новая.контрольная.карта,.отражающая.воспроизводимость.метода.при. его. продолжительном. применении. . Обоснованные. новые. параметры. должны.быть.в.приемлемом.диапазоне,.уточненном.в.таблице.3..

4..5..2..4. .Если.это.не.достижимо,.например,.в.случае.особенно.проблемных.аналитов,.результаты.проб.должны.быть.зарегистрированы.как.имеющие.меньшие.точность.и.прецизионность,.чем.обычно.наблюдаемые. при.определении.остаточных.содержаний.пестицидов..

4..5..2..5. .При.регулярном.применении.метода,.если.среднее.значение.«извлечения».первых.10.или.более.испытаний.для.определенного.анализируемого. вещества/матрицы.пробы.существенно.отличается.(Р.=.0,05).от.среднего. значения.«извлечения»,.полученного.для.репрезентативных.анализируемого.вещества/матриц.пробы,.Qtyp.и.CVtyp.не.применимы. .Подсчитывают. новые.предупредительные.границ.и.пределы.на.контрольной.карте,.при. выходе.за.которые.необходимо.вмешательство.в.процесс.анализа,.для.определенных.анализируемого.вещества/матрицы.пробы,.используют.новое. значение.среднего.«извлечения».и.измеряют.значения.CV..

4..5..2..6. .Если.данные.проверки.технических.характеристик.неоднократно.выходят.за.предупредительные.границы.(превышение.предупредительной.границы.одного.из.двадцати.измерений.приемлемо),.должны. быть.проверены.условия.применения.метода,.установлены.источники.

Руководящие.принципы.надлежащей.лабораторной.практики,.касающиеся.анализа.

остаточных.содержаний.веществ.(CAC/GL.40-1993,.Rev..1-2003)

ошибки.(ошибок),.и.до.продолжения.применения.метода.должны.быть. проведены.необходимые.корректирующие.действия. .

4..5..2..7. .Если.данные.проверки.технических.характеристик.находятся.за. границами.уточненных.пределов.на.контрольной.карте,.обоснованных. согласно.разделам.4..5..2..1.–.4..5..2..3,.партия.продуктов,.которая.подвер- галась.анализу.(или,.по.крайней.мере,.пробы,.в.которых.обнаружены. остаточные.содержания.на.уровне.≥0,7.ДП.или.0,5.ДП,.для.регулярно. и.периодически.определяемых.аналитов,.соответственно).должна.быть. проверена.повторно. .

4..5..2..8. . Другим. эффективным. способом. проверки. технических. характеристик. является. повторный. анализ. аналитических. частей. положительных. проб. . Их. результаты. могут. быть. использованы. для. подсчета. суммарной. внутрилабораторной. воспроизводимости . метода. (CVLtyp). в.целом.или.для.определенного.анализируемого.вещества/матрицы.пробы. .В.этом.случае,.CVLtyp.будет.также.включать.погрешность.(неопределенность).пробоподготовки,.но.не.покажет.возможные.потери.во.время. этого.процесса..

4.6. ПОДТВЕРЖДАЮЩИЕ ИСПЫТАНИЯ

4..6..1. .В.тех.случаях,.когда.анализы.были.выполнены.для.мониторинга. или.для.принятия.принудительных.мер.к.поставщику.продуктов,.особенно.важно,.чтобы.данные,.подтверждающие.результаты.анализа,.были. получены.до.официального.объявления.результатов.анализа,.в.особенности.относительно.тех.продуктов.питания,.которые.обычно.не.связывают. с. остаточными. содержаниями. пестицида,. или. если. полученные. результаты. свидетельствуют. о. превышении. ПДК. . Это. важно. потому,. что.анализируемые.пробы.могут.содержать.мешающие.вещества,.которые.могут.быть.ложно.идентифицированны,.как.пестициды. .Например,. для.газовой.хроматографии.с.детектированием.по.электронному.захвату.такими.веществами.могут.быть.эфиры.фталевой.кислоты,.а.для.фос- фор-селективных.детекторов.это.соединения,.содержащие.серу.и.азот. . Первым.шагом,.в.этом.случае,.будет.повторный.анализ.этих.проб.тем. же.методом,.если.первоначальный.вывод.был.основан.на.анализе.только. отобранной. части. . Если. остаточное. содержание. анализируемого. вещества.будет.подтверждено,.это.будет.служить.доказательством.воспроизводимости.результатов.определения. .Следует.заметить,.что.лишь. доказательство,.подтверждающее.отсутствие.определяемых.в.пробе.остаточных.содержаний,.обеспечивается.данными.проверки.технических. характеристик.аналитического.метода..

4..6..2. .Подтверждающие.испытания.могут.быть.количественными.и/или. качественными,.но,.в.большинстве.случаев,.будут.необходимы.оба.типа.

Раздел.4. .Анализ

информации. . Определенные. проблемы. возникают,. когда. остаточные. содержания.должны.быть.подтверждены.на.уровне.или.около.предела. определения,.но,.хотя.на.этом.уровне.сложно.выполнить.количественное. определение,. необходимо. обеспечить. адекватное. подтверждение. как.уровня,.так.и.идентификации..

4..6..3. .Необходимость.в.подтверждающих.испытаниях.может.зависеть.от. типа.пробы.или.ее.известной.истории. .В.некоторых.сельскохозяйственных.культурах.или.продуктах.часто.находят.определенные.остаточные. содержания. .Для.серий.проб.близкого.происхождения,.которые.содержат. остаточные. содержания. одних. и. тех. же. пестицидов,. этого. может. быть. достаточно. для. подтверждения. их. идентификации. в. небольшой. части.случайным.образом.отобранных.проб. .Подобным.образом,.если. известно,. что. определенный. пестицид. применялся. при. производстве. анализируемого. материала. пробы,. в. подтверждении. идентификации. практически.нет.необходимости,.хотя.выбранные.случайным.образом. результаты.должны.быть.подтверждены. .Если.имеются.«холостые».(контрольные).пробы,.они.должны.быть.применены.для.проверки.присутствия.возможных.мешающих.веществ..

4..6..4. .В.зависимости.от.первоначальной.технологии.определения,.для.поверки.результатов.количественного.анализа.может.потребоваться.альтернативная.процедура,.которая.может.быть.другим.методом.определения. . Для.качественного.подтверждения.(идентификации).желательно.применение. масс-спектрометрических. данных. или. комбинации. технологий,. основанных.на.различии.физико-химических.свойств.(см. .таблицу.6). ..

4..6..5. .Необходимыми.шагами.для.положительной.идентификации.явля- ются.вопрос.о.роли.химика-аналитика,.а.также.определенное.внимание. необходимо. уделить. выбору. метода,. который. минимизирует. влияние. мешающих. соединений. . Выбор. технологии(-ий). осуществляется. в. зависимости.от.наличия.надлежащей.аппаратуры.и.практического.опыта. в.лаборатории,.проводящей.испытание. .В.таблице.6.приведены.некоторые.альтернативные.процедуры.для.подтверждения. .

4.7. МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ

4..7..1. .Данные.по.остаточным.содержаниям,.полученные.с.помощью.массспектрометрии,. могут. представлять. собой. наиболее. точные. сведения. и.там,.где.имеется.соответствующее.оборудование,.масс-спектрометрия. является.наилучшим.подтверждающим.методом. .Этот.метод.может.быть. использован.и.в.целях.скрининга.остаточных.содержаний. .Определение. остаточных. содержаний. масс-спектрометрией. обычно. выполняется. в.сочетании.с.технологией.хроматографического.разделения.для.определения.времени.удерживания,.отношения.массы .иона.к.заряду.и.от-

Руководящие.принципы.надлежащей.лабораторной.практики,.касающиеся.анализа.

Групповойостаточных.стандарт.содержа.нийа.рассольные.веществ.(CAC/GL.сыры.(CODEX.40-1993,.STAN.Rev..1.-2082003)-1999,.Amd. .2001)

носительного. содержания. ионов. одновременно. . Хроматографический. метод. разделения. и. масс-спектрометр,. метод. их. соединения. и. ввода. пробы.и.диапазон.концентрация.определяемых.пестицидов.обычно.взаимосвязаны.и.нет.универсальной.комбинации,.подходящей.для.анализа. всех.соединений. .Прохождение.без.количественных.потерь.неустойчивых.веществ.через.хроматографическую.систему.и.систему.ввода.в.массспектрометр. относятся. к. проблемам,. сходными. с. теми,. что. имеются. при.применении.других.детекторов. .Наиболее.точным.подтверждением.присутствия.остаточных.содержаний.является.получение.«полного». масс-спектра.при.ионизации.электронным.ударом.(в.практике.обычно. от.m/z50.и.выше.диапазона.молекулярного.иона). .Концентрация.ионов. в.спектре.и.отсутствие.мешающих.ионов.являются.наиболее.важными. факторами.в.доказательстве.идентификации. .Этот.метод.является.наименее.селективным.и.мешающие.влияния.загрязнителей,.которые.могут. быть.введены.при.изготовлении.или.хранении.экстрактов,.должно.быть. исключено. .Системы.данных.масс-спектрометра.позволяют.исключить. исходные.мешающие.сигналы.(например,.фон.колонки).«исключением.фона»,.но.эта.технология.должна.использоваться.с.осторожностью. . Повышение.чувствительности.обычно.достигается.посредством.ограничения.массы.исследуемого.образца.или.селективным.мониторингом.ионов,.но.при.этом.будет.осуществлен.мониторинг.меньшего.количества. ионов.(особенно,.если.они.имеют.низкую.массу),.и.будут.получены.менее. точные.данные. .Дополнительное.подтверждение.идентификации.может. быть.получено.(i).при.использовании.альтернативной.хроматографической.колонки;.(ii).использовании.альтернативной.технологии.ионизации. (например,. химическая. ионизация);. (iii). при. мониторинге. продуктов. дальнейших.реакций .выбранных.ионов.при.тандемной.масс-спектро- метрии.(МС/МС.или.МСn);.или.(iv).при.мониторинге.выбранных.ионов. при.увеличении.разрешающей.способности.масс-спектрометра. .Для.ко- личественного.определения.ионы,.подвергаемые.мониторингу,.должны. быть.такими,.которые.в.наибольшей.степени.специфичны.для.анализируемого.вещества,.не.должны.вносить.много.помех.и.обеспечивать.хоро- шее.соотношение.сигнала.к.помехам. .Масс-спектрометрический.анализ. должен.удовлетворять.тем.же.критериям.аналитического.контроля.качества,.которые.применяются.к.другим.системам. .

4..7..2. .Идентификация.остаточных.содержаний.после.их.разделения.методом.ВЭЖХ.в.целом.более.трудна,.чем.при.применении.газовой.хроматографии. .Если.идентификация.обнаруженного.остаточного.содержания. вещества.осуществляется.методом.спектрофотометрии.в.ультрафиолетовой.области,.то.результирующий.полный.спектр.поглощения.обеспечит. надежные. доказательства. идентификации. . Однако,. ультрафиолетовый. спектр.некоторых.пестицидов.недостаточно.подходит.для.идентификации,.так.как.обладает.сходством.со.спектрами.многих.других.веществ,. имеющих.сходные.функциональные.группы.или.состав,.а.присутствие.

Раздел.4. .Анализ

мешающих.соединений.может.привести.к.возникновению.дополнительных.сложностей. .Данные.ультрафиолетового.поглощения,.полученные. при.применении.разных.длин.волн,.могут.подтвердить.или.опровергнуть. идентификацию,. но. в. целом,. они. недостаточно. специфичны. . Могут. быть.использованы.данные.флуоресценции.для.подтверждения.информации,.полученной.при.поглощении.ультрафиолетовых.лучей. .Система. ЖХ-МС.могла.бы.предоставить.подтверждающие.данные,.но,.посколь- ку. полученные. масс-спектрометрические. характеристики. в. основном. очень. простые,. показывающие. неспецифичную. фрагментацию,. маловероятно,.что.полученные.при.анализе.этим.методом.результаты.будут. определенными. .Более.мощной.технологией.является.система.«жидкос- тная.хроматография.–.тандемная.масс-спектрометрия.(ЖХ-МС/МС)»,. сочетающая.селективность.и.специфичность,.с.помощью.которой.часто. можно.получить.надежные.доказательства.идентификации. .Результаты. методов. ЖХ-МС. обычно. сильно. зависят. от. влияния. матрицы,. в. особенности.в.отношении.подавления.образования.анализируемых.ионов,. в.связи.с.чем.для.подтверждения.количественного.определения.может. потребоваться.добавка.стандартных.веществ.или.добавка.стандартных. веществ,. меченых. изотопами. . Получение. производных. также. можно. применять.для.подтверждения.результатов.определения.остаточных.содержаний,.полученных.методом.ВЭЖХ.(пункт.4..6..5..4)..

4..7..3. .В.некоторых.случаях.подтверждение.данных.газовой.хроматографии.наиболее.удобно.осуществимо.методом.тонкослойной.хроматогра- фии.(ТСХ). .Идентификация.основывается.на.двух.критериях.—.значе- нии.коэффициента.удерживания.Rf.(отношение.расстояний,.пройденных.на.пластинке.идентифицируемым.веществом.и.фронтом.подвижной. фазы).и.реакциях.визуализации. .Методы.детектирования,.основанные. на.биологических.анализах.(например,.рост.грибков.или.ингибирование. хлоропласта),. особенно. подходят. для. качественного. подтверждения,.поскольку.они.специфичны.к.определенным.типам.соединений,. чувствительны. и. обычно. мало. подвержены. влиянию. коэкстрактов. . Научная. литература. содержит. многочисленные. ссылки. на. методику,.

Доклад.ИЮПАК.(IUPAC.Report.on.Pesticides.(13).Bбtora,.V..,.Vitorovic,. S..Y..,.Thier,.H..-P. .and.Klisenko,.M..A..;.Pure.&.Appl. .Chem..,.53,.1039–1049. (1981).содержит.обзор.методики.и.служит.удобным.введением.в.проблему. .Однако.количественные.характеристики.тонкослойной.хроматографии.ограничены. .Дальнейшие.процедуры.этого.метода.включают.отбор. сорбента.из.той.области .на.пластине,.которая.соответствует.коэффициенту.удерживания.исследуемого.соединения,.последующие.извлечение. (экстракцию).этого.вещества.из.сорбента.и.подтверждение.результата. определения.химическим.и.физическим.анализом. .Во.избежание.невоспроизводимости.величины.коэффициента.удерживания.Rf.на.хроматографической.пластине.в.качестве.свидетеля.вместе.с.экстрактом.пробы. всегда. должен. присутствовать. раствор. свидетеля. —. стандартного. пес-

Руководящие.принципы.надлежащей.лабораторной.практики,.касающиеся.анализа.

остаточных.содержаний.веществ.(CAC/GL.40-1993,.Rev..1-2003)

тицида. .Преимуществами.тонкослойной.хроматографии.являются.скорость,.низкая.стоимость.и.применимость.к.нетермостойким.веществам;.

к.недостаткам.следует.отнести.обычно.более.низкую.чувствительность.

и.степень.разделения.по.сравнению.с.методами,.основанными.на.инструментальном.хроматографическом.детектировании.и.необходимость. эффективной.очистки.в.случае.методов.обнаружения,.основанного.на. окрашенных.химических.реакциях.(на.реакциях.визуализации)..

4.8. ПОЛУЧЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ

Эта.область.подтверждения.может.быть.рассмотрена.в.трех.основных. направлениях..

(а) Химические реакции

Часто.используют.микроколичественные.химические.реакции.с.пестицидами,. приводящие. к. их. распаду,. присоединению. или. образованию. продуктов.конденсации,.которые.затем.снова.подвергают.хроматографическому.анализу..

В.результате.этих.реакций.получают.производные,.обладающие.различным.временами.удерживания.и/или.откликами.детектора,.отличными. от.исходного.соединения. .Параллельно.с.пробой.предполагаемого.пестицида. аналогичным. образом. должна. проводиться. обработка. пробы. со.стандартным.пестицидом,.таким.образом,.чтобы.результаты.можно. было.сравнивать.непосредственно. .В.процедуру.следует.также.включить. обогащенный.(неочищенный).экстракт.для.подтверждения,.что.реакция. выполнена.в.присутствии.материала.образца. .Помехи.могут.возникнуть. в. тех. случаях,. когда. обнаружение. производных. вещества. основано. на. свойствах.исходных.реагентов. .Обзор .химических.реакций,.применяемых.в.целях.идентификации,.был.опубликован.Cochrane,.W..P. .(Chemical. derivatisation.in.pesticide.analysis,.Plenum.Press,.NY.(1981)). .

Преимуществами. химических. реакций. являются. быстрота. и. легкость. выполнения,.но.могут.потребоваться.приобретение.и/или.очистка.специализированных.реагентов..

(б) Физические реакции

Полезным.методом.является.фотохимическое.преобразование.остаточных.содержаний.пестицидов.для.получения.одного.или.более.веществ. с. воспроизводимым. хроматографическими. характеристиками. . Пробу. стандартного. пестицида. и. обогащенного. экстракта. всегда. неоходимо. обрабатывать.аналогично. .Если.пробы.содержат.более.одного.остатка,. могут.возникнуть.затруднения.при.интерпретации.результатов. .В.этих.

Раздел.4. .Анализ

случаях.до.реакции.может.быть.выполнено.предварительное.разделение. остаточных.содержаний.пестицидов.с.использованием.ТСХ,.ВЭЖХ.или. хроматографических.колонок..

(в) Другие методы

Многие.пестициды.чувствительны.к.разложению.или.трансформации. ферментами. .В.отличие.от.обычных.химических.реакций.эти.процессы. очень.специфичны.и.в.основном.состоят.из.окисления,.гидролиза.или. деалкилирования. .Продукты.переработки.обладают.отличающимися.от. исходного.соединения.хроматографическими.характеристиками.и.могут. быть.использованы.в.целях.подтверждения.при.сравнении.с.продуктами. реакции,.полученными.со.стандартными.пестицидами..

4.9. КОНЦЕПЦИЯ НИЖНЕГО ПРЕДЕЛА КАЛИБРОВКИ (НПК)

4..9..1. . Когда. целью. анализа. является. контроль. и. проверка. соблюдения. ПДК.или.других.ДП,.методы.определения.остатков.должны.быть.достаточно.чувствительны.для.достоверного.определения.остатков,.которые,. вероятно,.присутствуют.в.сельскохозяйственной.культуре.или.пробе.окружающей.среды.на.уровне.или.около.ПДК.или.ДП. .Однако,.для.этой. цели.нет.необходимости.применять.методы.определения.остаточных.содержаний.пестицидов.с.такой.высокой.чувствительностью,.которая.позволяла.бы.определять.эти.вещества.на.уровне.двух.или.более.порядков. ниже.указанной.величины. .Методы,.разработанные.для.измерения.остаточных.содержаний.на.очень.низких.уровнях,.как.правило,.очень.дороги.и.сложны.в.применении. .Применение .нижнего.предела.градуировки. (НПК).(см. .словарь.терминов).будет.иметь.преимущество.в.снижении. технической. трудности. получения. данных. и. более. низкой. стоимости. . Могут.быть.полезны.следующие.предложения.для.НПК.при.выполнении. различных.проб.в.предоставлении.возможности.специалисту.по.остаточным.содержаниям.пестицидов.применять.соответствующие.методы..

4..9..2. .Для.активных.ингредиентов.с.установленными.ПДК,.НПК.может. быть.определен.как.доля.ПДК. .Для.удобства.расчета.эта.доля.будет.изменяться.и.может.быть.представлена.в.следующем.виде:

Когда.ПДК.находится.в.пределе.определения.аналитическим.методом,. НПК.также.будет.на.этом.уровне. .

Руководящие.принципы.надлежащей.лабораторной.практики,.касающиеся.анализа.

остаточных.содержаний.веществ.(CAC/GL.40-1993,.Rev..1-2003)

4.10. ПРЕДСТАВЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Для.нормативно-правовых.целей.должны.предоставляться.только.под- твержденные. данные,. выраженные. как. определено. по. ПДК. . Нулевые. значения.должны.быть.описаны.как.меньшие,.чем.нижний.предел.градуировки,.а.не.меньшие,.чем.уровень,.вычисленный.экстраполяцией. . Основные.результаты.не.корректируются.по.известному.«извлечению»,. они.могут.быть.скорректированы.только.тогда,.когда.известно,.что.процент. извлечения. существенно. отличается. от. 100%. . Если. сообщаемые. результаты.скорректированы.по.проценту.извлечения,.то.должны.быть. предоставлены. как. измеренные,. так. и. скорректированные. значения. . Обоснования.коррекции.также.должны.быть.сообщены. .Когда.положительные.результаты.получены.в.результате.повторного.анализа.(например,.на.другой.колонке.газовой.хроматографии,.с.другими.детекторами. или.основаны.на.других.ионах.масс-спектра).единичной.аналитической. части.образца.(из.отобранной.выборки),.должно.быть.указано.самое.низкое.обоснованное.значение. .Если.положительные.результаты.получены. при.анализе.многих.аналитических.частей.проб,.должно.быть.сообщено. среднеарифметическое.значение.наиболее.низких.обоснованных.значений,.полученное.для.каждой.аналитической.части. .Необходимо.учесть. 20–30%.относительную.погрешность,.результаты.должны.быть.выраже- ны.только.двумя.имеющими.значение.цифрами.(например:.0,11;.1,1;.11. и .1,1x102). .Поскольку.при.более.низких.концентрациях.достоверность. может.быть.в.диапазоне.50%,.значения.остатков.ниже.0,1.должны.быть. выражены.только.одной.имеющей.значение.цифрой..

Рисунок ΙΙ.1 Обзор методов валидации

АНАЛИТИЧЕСКАЯ

Раздел.4. .Анализ

.анализа.касающиеся.,практики.лабораторной.надлежащей.принципы.Руководящие 2003)-1..Rev.1993,-40.(CAC/GL.веществ.содержаний.остаточных

29

Анализ. .4.Раздел

.анализа.касающиеся.,практики.лабораторной.надлежащей.принципы.Руководящие 2003)-1..Rev.1993,-40.(CAC/GL.веществ.содержаний.остаточных

Анализ. .4.Раздел

.анализа.касающиеся.,практики.лабораторной.надлежащей.принципы.Руководящие 2003)-1..Rev.1993,-40.(CAC/GL.веществ.содержаний.остаточных

Анализ. .4.Раздел

34

.анализа.касающиеся.,практики.лабораторной.надлежащей.принципы.Руководящие 2003)-1..Rev.1993,-40.(CAC/GL.веществ.содержаний.остаточных

35

Анализ. .4.Раздел