- •Кафедра гистологии, цитологии и эмбриологии
- •Гистология
- •(Курс лекций)
- •Задачи гистологии
- •Основные задачи гистологии, как науки:
- •Основные этапы развития гистологии как науки
- •История развития гистологии в Украине Харьковская гистологическая школа.
- •Киевская гистологическая школа
- •Исследования профессора в.А. Беца
- •Одесская гистологическая школа
- •Образование кафедр гистологии в Украине после 1917 года Днепропетровская гистологическая школа
- •Крымская гистологическая школа
- •Винницкая гистологическая школа
- •Львовская гистологическая школа
- •Методы гистологических исследований
- •Этапы приготовления постоянного гистологического препарата
- •Витальные (прижизненные) методы исследований
- •Цитология
- •Клеточная теория Теодора Шванна
- •Общий план строения клетки
- •Клеточная оболочка
- •Строение
- •Рецепция
- •Синаптические соединения
- •Мембраны клетки.
- •Структурно-химическая характеристика биологических мембран.
- •Строение биологической мембраны.
- •Цитоплазма и ее структурные компоненты
- •Мембранные органеллы
- •Пероксисомы
- •Эндоплазматическая сеть
- •Немембранные органеллы общего назначения.
- •Микрофиламенты
- •Микротрубочки
- •Ядро клетки.
- •Ядрышко
- •Ядерная оболочка
- •Кариоплазма
- •Репродукция клеток
- •Клеточный цикл (cyclus cellularis)
- •Хромосомы
- •Эндомитоз
- •Эпителиальные ткани
- •Производные клеток
- •Межклеточное вещество
- •Развитие тканей
- •Общая морфофункциональная характеристика эпителия.
- •Классификация эпителиальных тканей.
- •Морфофункциональная классификация
- •Строение различных типов эпителия
- •III Однослойный призматический (цилиндрический)
- •V Многослойный плоский неороговевающий эпителий
- •Железистый эпителий . Железы .
- •Строение гландулоцитов
- •Фазы секреции
- •Ткани внутренней среды
- •Классификация тканей внутренней среды
- •Кровь. Состав крови и ее функции. Плазма.
- •Функции крови
- •Плазма крови
- •Форменные элементы
- •Строение
- •Класификация
- •Строение лейкоцитов
- •Соединительные ткани.
- •Рыхлая соединительная ткань
- •Волокнистые структуры
- •Уровни организации коллагенового волокна
- •Строение
- •Ретикулярные волокна
- •Аморфный компонент межклеточного вещества
- •Плотная волокнистая соединительная ткань
- •Соединительные ткани со специальными свойствами
- •Основы общей эмбриологии
- •Онтогенез
- •Периоды онтогенеза
- •Прогенез
- •Мужские половые клетки
- •Строение сперматозоида
- •Функции сперматозоидов
- •Женские половые клетки
- •Классификация яйцеклеток
- •Строение яйцеклетки.
- •Эмбриогенез
- •Виды бластул
- •Гисто-органогенез
- •Понятие о провизорных органах. Строение.
- •Скелетные ткани.
- •Хрящевые ткани
- •Классификация хрящевых тканей
- •Гистогенез хрящевой ткани
- •Эмбриональный гистогенез
- •Клетки хрящевой ткани
- •Эластическая хрящевая ткань
- •Волокнистая хрящевая ткань
- •Костная ткань, общая характеристика.
- •Функции
- •Классификация костных тканей
- •Гистогенез костной ткани
- •Эмбриональный остеогистогенез
- •Непрямой остеогистогенез
- •Межклеточное вещество
- •Строение трубчатых костей
- •Мышечные ткани
- •Источники развития
- •Морфофункциональная классификация
- •Гладкие мышечные ткани
- •Гладкая мышечная ткань эпидермального происхождения.
- •Гладкая мышечная ткань нейрального происхождения
- •Поперечнополосатые мышечные ткани
- •Строение сократительных кардиоцитов
- •Строение миофибрилл.
- •Строение проводящих кардиомиоцитов.
- •Молекулярные механизмы сокращения мышечного волокна.
- •Строение
- •Миосателлитоциты
- •Типы мышечных волокон
- •Нервная ткань
- •Гистогенез
- •Нейроциты. Классификация. Строение.
- •Морфологическая классификация
- •Функциональная классификация
- •Строение нейроцитов
- •Нейроглия. Основные виды.
- •Глиоциты
- •Микроглия
- •Регенерация нейроцитов и нервных волокон
- •Нервные окончания
- •Нервно-мышечные веретена
Этапы приготовления постоянного гистологического препарата
Взятие материала. Размеры объекта 7х7х3 мм не более
1см3. Материал должен быть свежим. Во время взятия материала необходимо избегать лишней его травматизации;
Фиксация материала. Фиксация производится путем погружения объекта в фиксирующую жидкость. Цель этого этапа - закрепление гистохимических структур в том состоянии, в котором они находились при жизни. Для фиксации используют фиксаторы, которые могут быть простыми и сложными. Простые - спирты (этиловый, метиловый), формалин, соли тяжелых металлов, кислоты (уксусная, пикриновая, осмиевая). Сложные - фиксаторы, состоящие из нескольких простых в определенном соотношении. Фиксаторы должны обладать бактерицидными свойствами.
Промывка проводится для удаления фиксатора из объекта в проточной воде в течение 24 часов.
Обезвоживание объекта. Для этого используют спирты возрастающей концентрации от 600 до 1000.
Уплотнение объекта - осуществляется последовательно в несколько этапов: парафин, целоидин, синтетические смолы. Эта процедура еще носит название заливки.
Изготовление срезов - для этого используются микротомы и ультрамикротомы. С помощью микротомов готовятся тонкие (5-7 мкм) и полутонкие (0,5-1 мкм) срезы, ультрамикротомы позволяют приготовить ультратонкие срезы ( 0,005-0,2 мкм)
Окраска или контрастирование срезов. Необходима для того, чтобы можно было различать структурные детали объекта, большинство которых не имеет природного контраста. Перед окраской срезы депарафинируются ксилолом, потом ксилол удаляют при помощи батареи спиртов нисходящей концентрации от 1000 до 600 и промываются водой. После этого на препарат наносится раствор красителя, затем краска удаляется водой.
Заливка срезов канадским бальзамом с целью длительного хранения препаратов. Этот этап также состоит из нескольких стадий, включающих: обезвоживание в спиртах возрастающей концентрации (от 600 до 1000), осветление в ксилоле, заливка среза тонким слоем канадского бальзама, покрытие покровным стеклом.
Для окраски препаратов используется целый ряд различных красителей. Все гистологические красители в зависимости от происхождения делятся на:
1) растительные; 2) животные; 3) синтетические.
¨К растительным красителям относится - гематоксилин.
¨К животным относится - кармин.
¨Все остальные красители являются синтетическими. Это - эозин,
фуксин, азур и другие.
По химическим свойствам все красители делятся на:
1) кислые; 2) основные; 3) нейтральные; 4) специальные.
Кислые - это красители, свойства которых определяются наличием химических групп - СООН, - НSO-3, - Н2РО-3. Их еще называют анионными, они окрашивают цитоплазму. К этой группе относится эозин, ясный зеленый. Гистологические структуры, которые окрашиваются кислыми красителями называются оксифильными (ацидофильные, эозинофильные).
Основные - это катионные красители и подавляющее большинство их в своем составе имеет атом азота с положительным зарядом. Эти красители избирательно окрашивают ядра клеток и поэтому их называют ядерными. К таким красителям относятся гематоксилин, кармин, сафранин. Гистологические структуры, которые окрашиваются основными красителями называются базофильными.
Необходимо отметить, что они способны окрашивать и цитоплазму в тех случаях, когда в ней содержится большое количество ДНК и нуклеиновых кислот или кислых гликозаминогликанов.
Нейтральные - образуются при соединении водных растворов кислого и основного красителей, например: эозиново-кислый, метиленовый синий. Гистологические структуры, которые одновременно воспринимают и кислые и основные красители называются нейтрофильными или полихроматофильными. Некоторые гистологические структуры способны изменять цвет основного красителя. Это явление получило название метахромазии. Метахроматически красится зернистость базофильных лейкоцитов, межклеточное вещество хрящевой ткани.
Специальные красители, которые используют для окрашивания определенных веществ, структур или тканей. Это судан III - красит жировую ткань, орсеин - эластические волокна.