2 курс / Гистология / Цветков_И_С_Структурно_функциональные_изменения_предстательной_железы

заполнены эозинофильными и слабо PAS–положительным гомогенным секретом. Эпителий ацинусов был высоким призматическим, выявлялось большое количество эпителиально-стромальных выростов. В части ацинусов эпителий располагался рыхло, границы клеток были нечеткими. В просветах ацинусов выявлялось большое число клеток десквамированного эпителия. Строма была очагово склерозирована и в этих зонах представлена пучками зрелой фуксинофильной при окраске по ван Гизону соединительной ткани. Отмечалась слабо и умеренно выраженная диффузно–очаговая инфильтрация лимфоцитами, единичными гистиоцитами, тучными клетками. Преобладали тучные клетки без признаков дегрануляции, их цитоплазма была заполнена плотно упакованными метахроматичными при окраске толуидиновым синим гранулами. В отдельных участках периацинарная воспалительная лимфоидная инфильтрация, разрушая базальную пластинку, распространялась на эпителиальный слой. Подобные изменения описаны в работе С.В. Стовбун и соавт. (2011) на биопсийном материале предстательной железы мужчин, страдавших хроническим простатитом.

По данным морфометрического исследования при хроническом простатите отмечалось повышение показателей объемной доли ацинусов, не содержащих секрет, и числа эпителиальных клеток в просвете ацинусов, увеличение объемной доли воспалительного инфильтрата во внутридольковой строме. Число тучных клеток, а также индекс их дегрануляции в сравниваемых группах не различались (табл. 1). Среди клеточных элементов во внутридольковой строме предстательной железы в сравниваемых группах преобладали фиброциты и фибробласты. При этом в группе крыс с хроническим аутоиммунным простатитом по сравнению с контролем преобладали фибробласты (табл. 2). В группе крыс с хроническим аутоиммунным простатитом был статистически значимо повышен показатель содержания лимфоцитов и снижен – нейтрофилов. Выявленный нами при экспериментальном хроническом аутоиммунном простатите у крыс Вистар внутридольковый очаговый воспалительный процесс был слабо выраженным, объемная доля инфильтрата по сравнению с контрольной группой была увеличена в 2 раза и составляла 4,0 %. В составе воспалительного инфильтрата повышалось содержание лимфоцитов, а также фибробластов (табл. 2). По данным литературы в предстательной железе у мужчин, страдающих хроническим простатитом, объемная доля воспалительного инфильтрата также составляет 4,0 % (Щеплев П.А., 2007).

Лимфоидная инфильтрация предстательной железы у крыс Вистар с хроническим аутоиммунным простатитом выявлялась в межацинарной соединительной ткани вокруг ацинусов. Подобные изменения описаны С.В. Стовбун и соавт. (2011) при ультраструктурном исследовании биоптатов

11

Таблица 1 Морфометрическая характеристика предстательной железы крыс Вистар контрольной группы и при хроническом аутоиммунном простатите, M±SE, Me (25L; 75U)

Состав клеточных элементов внутридольковой стромы предстательной железы крыс Вистар контрольной группы и при хроническом аутоиммунном простатите, Me (25L; 75U)

12

предстательной железы мужчин, страдавших хроническим простатитом. Популяция лимфоцитов в предстательной железе представлена главным образом NK и NKT– клетками, которые оказывают цитотоксические эффекты

(Naslund M.J., Strandberg J.D. et al., 1988). По сравнению с популяциями лимфоцитов, заселяющими селезенку, печень, подвздошную кишку и мезентериальные лимфатические узлы, предстательная железа содержит высокую долю NK- и NKТклеток, среди которых преобладают CD45, CD4+ Т-клетки (Vykhovanets E.V., 2005). Анализ популяций лимфоцитов дорсолатеральной и вентральной долей предстательной железы у крыс Вистар и Спрейг-Доули выявил низкий показатель индекса CD4/CD8 Т-

лимфоцитов (Vykhovanets E.V., 2005.; Vykhovanets E.V. et al., 2006.).

Предстательная железа в физиологических условиях, очевидно, резистентна к воспалению, так как в ней высокий уровень CD8 – цитотоксических Т– лимфоцитов (Godfrey D.I., MacDonald H.R. et al., 2004). При активации NKT

клетки продуцируют ИНФ-γ и ИЛ-4, играющие важную роль в развитии хронической воспалительной реакции (Iwakoshi N.N., Greiner D.L. et al., 1999; Shao H., Van Kaer L., 2003).

По данным литературы (Donadio A.C., Depiante-Depaoli M, 1997) и

результатам настоящего исследования в предстательной железе при экспериментальном хроническом аутоиммунном простатите количество гистиоцитарных элементов небольшое и практически отсутствуют нейтрофилы. Низкое содержание гистиоцитов и нейтрофилов определяет слабую выраженность альтеративных и экссудативных реакций в предстательной железе, так как эти клетки секретируют большое количество протеолитических ферментов и генерируют кислородные радикалы, вызывающие повреждение ткани (Белоцкий С.М., Спивак Н.Я., 2009). Альтеративные изменения в предстательной железе при экспериментальном хроническом аутоиммунном простатите характеризовались, главным образом, десквамацией эпителия, что, с одной стороны, отражает усиление гибели эпителиоцитов ацинусов, очевидно, по механизму апоптоза, и с другой стороны, изменение типа секреции с меро- и апокринового преимущественно на голокриновый (Шубникова Е.А., 1996).

При хроническом аутоиммунном простатите в вентральной и дорсальной долях выявлены однонаправленные изменения показателей объемной доли ацинусов, стромы, эпителия, числа десквамированного эпителия, клеточного инфильтрата. Различия выявлены между дорсальной и вентральной долями предстательной железы по показателям объемной доли ацинусов, содержащих секрет. Их показатель снижался при хроническом аутоиммунном простатите в дорсальной доле и увеличивался в вентральной. Аналогичные изменения показателей наблюдались для индекса числа тучных клеток – он снижался в дорсальной доле и не изменялся в вентральной.

13

Морфофункциональная характеристика органов иммунной системы при хроническом аутоиммунном простатите.

В тимусе выявлена акцидентальная инволюция I–II стадии, характеризующаяся увеличением объемной доли коркового и субкортикального слоев. В селезенке отмечалась гиперплазия белой пульпы (50,7±2,1 – хронический аутоиммунный простатит и 40,5±1,7 – контрольная группа; р= 0,0012) за счет ПАЛМ–зоны (30,0±1,8 – хронический аутоиммунный простатит и 21,3±1,2 – контрольная группа; р= 0,0007) и трансформация светлых центров лимфоидных узелков в эпителиоидноклеточные. У крыс опытной группы был снижен уровень продукции цитокинов (ИЛ-2, ИЛ-4, ФНО-α) клетками селезенки, активированными Соn-A, что отражает развитие на фоне хронического аутоиммунного воспалительного процесса иммунодефицитного состояния (Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., 2008)

Морфологическая характеристика предстательной железы, органов иммунной системы и цитокиновый профиль крыс Вистар при гиперандрогенемии

С целью оценки влияния гиперандрогенемии на структурно– функциональные изменения предстательной железы при хроническом аутоиммунном простатите проводили морфологическое и морфометрическое исследование предстательной железы крыс группы сравнения, которым вводили фармакологический препарат пролонгированного действия Омнадрен 250. В группе животных, которым вводили омнадрен, отмечалось статистически значимое многократное увеличение в сыворотке крови уровня общего и свободного тестостерона (табл. 3). Показатели концентрации кортикостерона в сравниваемых группах статистически значимо не различались.

Таблица 3

Показатели уровня общего и свободного тестостерона, кортикостерона в сыворотке крови крыс Вистар с гиперандрогенемией, Me (25L; 75U)

14

Сравнительная морфологическая характеристика вентральной и дорсальной долей предстательной железы у крыс Вистар в норме и при гиперандрогенемии

По данным морфологического и морфометрического исследования при сравнении контрольной группы крыс и животных с гиперандрогенемией обе доли предстательной железы характеризовались увеличением стромальноэпителиальных выростов, расширением просвета ацинусов, в которых было увеличено число гибнущих эпителиальных клеток. Объемная доля клеточных элементов стромы увеличивалась в 3,2 раза, показатель процентного содержания лимфоцитов среди клеточных элементов внутридольковой стромы статистически значимо не изменялся (табл. 4). Содержание фибробластов возрастало (66.0 при гиперандрогенемии и 12.5 в контрольной группе; р= 0,0022) а фиброцитов снижалось. Снижался также показатель числа тучных клеток (5.38 при гиперандрогенемии и 8,95 в контрольной группе; р= 0,0017), а индекс их дегрануляции статистически значимо не изменялся.

В дорсальной доле предстательной железы крыс Вистар с гиперандрогенемией строма была представлена рыхлой волокнистой соединительной тканью, пикринофильной и очагово слабо фуксинофильной при окраске по ван Гизону. В ней выявлены диффузно рассеянные клеточные элементы, представленные тучными клетками, фибробластами, фиброцитами, единичными лимфоцитами и гистиоцитами. В части ацинусов выявлялся гомогенный эозинофильный, очагово слабо PAS–положительный, и слабо окрашивающийся альциановым синим секрет. Ацинусы были выстланы кубическим однорядным эпителием с четкими границами цитоплазмы и ядер. В просветах части ацинусов выявлялось большое количество гибнущих эпителиальных клеток. По данным морфометрического исследования в дорсальной доле предстательной железы у крыс с гиперандрогенемией увеличивалась объемная доля ацинусов и снижалась – стромы (табл. 4). Показатель отношения объемной доли ацинусов к строме составил 2,8 (контроль 1,7). В 3 раза снижался показатель объемной доли ацинусов содержащих секрет, и увеличивался – ацинусов, не содержащих секрет, возрастал показатель числа эпителиальных клеток в просвете ацинусов, объемной доли клеточных элементов во внутридольковой строме, числа тучных клеток, но индекс их дегрануляции не изменялся. При гиперандрогенемии по сравнению с контрольной группой среди клеточных элементов внутридольковой стромы дорсальной доли предстательной железы увеличивалось процентное содержание фибробластов (78,0 при гиперандрогенемии и 9,6 в контрольной группе; р= 0,0253) и снижалось – фиброцитов.

При гиперандрогенемии в вентральной доле предстательной железы преобладали ацинусы. Строма была представлена рыхлой волокнистой соединительной тканью пикрино-фуксинофильной при окраске по ван Гизону. В ней выявлялось небольшое количество диффузно рассеянных

15

клеточных элементов, представленных тучными клетками, лимфоцитами, а также фиброцитами и фибробластами. Ацинусы были неправильной формы, просветы их были частично заполнены гомогенным или сетевидным, эозинофильным, слабо PAS–положительным и слабо окрашивающимся альциановым синим секретом. Эпителий ацинусов был кубическим или призматическим, с небольшим числом эпителиально–стромальных выростов. При морфометрическом исследовании вентральной доли у крыс с гиперандрогенемией по сравнению с контрольной группой значимо возрастал показатель объемной доли ацинусов и снижался стромы (табл. 4). Индекс отношения показателя объемной доли ацинусов к объемной доле стромы возрастал за счет ацинусов и составил 2,26, в контрольной группе 1,34. У крыс с гиперандрогенемией статистически значимо увеличивался показатель числа эпителия в просвете ацинусов и объемной доли клеточных элементов в строме, статистически значимо снижался показатель числа тучных клеток, а индекс их дегрануляции возрастал. В вентральной доле предстательной железы у крыс Вистар на фоне гиперандрогенемии среди клеточных элементов внутридольковой стромы возрастало процентное содержание фибробластов (56,4 при гиперандрогенемии и 13,0 в контрольной группе; р= 0,0253), снижалось – фиброцитов и нейтрофилов.

Таким образом, по данным морфологического и морфометрического исследования предстательной железы установлено, что гиперандрогенемия вызывает в вентральной и дорсальной долях предстательной железы однонаправленные структурные изменения, которые характеризуются увеличением объемной доли ацинусов и снижением стромы, снижением объемной доли ацинусов, содержащих секрет, и увеличением не содержащих секрет, увеличением числа гибнущих эпителиальных клеток в просвете ацинусов, повышением объемной доли клеточных элементов в строме с увеличением содержания фибробластов и снижением числа тучных клеток.

Полученные данные об увеличении в предстательной железе крыс Вистар при гиперандрогенемии объемной доли ацинусов согласуется с данными литературы, в которой указывается на то, что андрогены вызывают гипертрофию и усиливают секреторную функцию эпителия ацинусов предстательной железы (Печерский А.В., 2007). Выявленное увеличение числа гибнущих эпителиальных клеток в ацинусах отражает усиление секреторной активности ацинарного эпителия с переходом на голокриновый тип секреции (Шубникова Е.А., 1996).

В нашей работе показано, что гиперандрогенемия вызывает увеличение числа фибробластов, что указывает на развитие фибротических процессов во внутридольковой строме. Активация фибробластов сопровождается увеличением продукции таких факторов роста, как инсулиноподобный, эпидермальный, трансформирующий, которые повышают пролиферативную активность эпителия ацинусов и могут инициировать процессы канцерогенеза (Cunha G.R., Cooke P.S., 2004).

16

Таблица 4 Морфометрическая характеристика предстательной железы крыс Вистар контрольной группы и при гиперандрогенемии, M±SE, Me (25L; 75U)

Морфологическая характеристика органов иммунной системы и цитокиновый профиль крыс Вистар при гиперандрогенемии

Литературные данные о влиянии гиперандрогенемии на морфологическое состояние иммунной системы фрагментарны и выполнены,

главным образом, в системе in vitro (Klein S.L., Roberts C.W., 2010). На основании этих данных сформулированы представления о том, что гиперандрогенемия оказывает иммуносупрессорное и провоспалительное действие. Поэтому в работе было оценено влияние гиперандрогенемии на морфологическое состояние иммунной системы у крыс Вистар.

В тимусе у крыс с гиперандрогенемией преобладал корковый слой, который был плотно «заселен» лимфоцитами. Границы коркового и мозгового слоев были четкие. В мозговом слое соотношение ретикулоэпителия к лимфоцитам составило 1:1, в нем выявлялись тимические тельца с отложениями кератогиалина. У животных с гиперандрогенемией по сравнению с контрольной группой в тимусе отмечалось увеличение показателей объемной доли коркового слоя (67,6±1,1 в контрольной группе и 56,5±2,1; р=0,0012) и снижение мозгового. Показатели ширины субкапсулярного слоя тимуса в сравниваемых группах статистически значимо не различались.

17

Таким образом, при гиперандрогенемии по данным морфологического и морфометрического исследования в тимусе выявляется акцидентальная инволюция I–II стадии, характеризующаяся расширением коркового слоя и появлением тимических телец более поздних фаз развития.

В селезенке крыс с гиперандрогенемией по сравнению с контрольной группой отмечалось опустошение белой пульпы, лимфоидные узелки были небольшие со светлыми центрами, представленными лимфобластами. В них определялись митозы, а также небольшое количество диффузно рассеянных фрагментов ядер. По данным морфометрического исследования при гиперандрогенемии отмечалось значимое снижение показателей объемной доли белой пульпы и увеличение красной (табл. 5). Показатель объемной доли ПАЛМ – зоны не изменялся, а лимфоидных узелков и светлых центров достоверно снижался.

Таким образом, по данным морфологического и морфометрического исследования гиперандрогенемия вызывает опустошение белой пульпы селезенки за счет В-зоны c уменьшением размеров лимфоидных узелков и их светлых центров.

По сравнению с контрольной группой у животных с гиперандрогенемией в культуральной жидкости клеток селезенки,

18

активированных Con-A, выявлено статистически значимое снижение концентрации ИЛ-2, ФНО-α, ИНФ-γ, а уровень ИЛ-6 не изменялся.

Выявленные нами при гиперандрогенемии у крыс Вистар акцидентальная инволюция тимуса I-II стадии, опустошение белой пульпы селезенки за счет В-зон, снижение продукции и секреции цитокинов согласуются с данными литературы о супрессорном эффекте андрогенов на реакции клеточного и гуморального иммунного ответа. (Viselli S.M., Reese K.R., Fan J. et al., 1997; Olsen N.J., Kovacs W.J. 2001; Heng T.S., Goldberg G.L., Gray D.H.et al., 2005).

Сравнительная морфологическая и иммунологическая характеристика хронического аутоиммунного процесса на фоне нормо- и гиперандрогенемии

Сравнительная морфологическая характеристика хронического аутоиммунного воспалительного процесса в предстательной железе на фоне нормо- и гиперандрогенемии

В связи с высокой распространенностью хронического абактериального простатита среди мужчин и расширением использования препаратов тестостерона в андрологической и урологической практике представляет интерес изучение морфологических и иммунологических особенностей хронического воспалительного процесса в предстательной железе на фоне гиперандрогенемии.

По сравнению с животными, у которых моделировали хронический аутоиммунный простатит на фоне физиологического уровня тестостерона в группе крыс, которым вводили гомогенат добавочных половых желез с адъювантом Фрейнда на фоне гиперандрогенемии, показатели концентрации в сыворотке крови общего и свободного тестостерона были достоверно выше

(табл. 6).

Таблица 6 Показатели уровня общего и свободного тестостерона в сыворотке крови крыс Вистар с хроническим аутоиммунным простатитом на фоне нормо- и гиперандрогенемии, Me (25L; 75U)

19

Таблица 7

Морфометрическая характеристика структурных изменений предстательной железы крыс Вистар с хроническим аутоиммунным простатитом на фоне нормо- и гиперандрогенемии, M±SE, Me (25L; 75U)

Клеточный состав воспалительного инфильтрата предстательной железы крыс Вистар с хроническим аутоиммунным простатитом на фоне нормо- и гиперандрогенемии, Me (25L; 75U)

20