Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
2 курс / Гистология / Биологическая_микроскопия_для_юных_натуралистов_Яковлев_А_А_.pdf
Скачиваний:
0
Добавлен:
23.03.2024
Размер:
2.64 Mб
Скачать

Шкалы окуляр-микрометров

Для проведения измерений препарат помещают на предметный столик. Изображение объекта совмещают со шкалой окуляр-микрометра и определяют скольким делениям соответствует его длина. Зная цену деления окуляр-микрометра (при данной комбинации объектива и окуляра!), определяют длину объекта, умножая количество делений на цену деления.

Наиболее распространенные ошибки при работе с микроскопом:

Недопустимо произвольное опускание и поднятие конденсора для регулирования освещенности препарата. После установки света по Келеру, положение конденсора изменять нельзя!!

Использование предметных стекол большой толщины (более 1,1-1,2 мм) не позволяет установить свет по Келеру (их толщина больше рабочего расстояния конденсора).

Применение нестандартных покровных стекол (более 0,17 мм толщины) при использовании иммерсионных объективов может привести к повреждению фронтальной линзы, при использовании сильных сухих систем (40х) не позволяет получить изображение высокого качества.

Недопустимо использование суррогатов иммерсионного масла, так как их оптические характеристики могут отличаться от стандартных, что приведет к ухудшению качества изображения. Кроме того, они могут содержать агрессивные вещества, повреждающие линзы и растворяющие клей, которым эти линзы склеены.

Абсолютно недопустимо произвольное раскрытие апертурной ирис-диафрагмы конденсора. Полностью открытая диафрагма конденсора приводит к потере контраста, полностью закрытая - к ухудшению качества изображения (появление дифракционных ободков).

Некоторые причины ухудшения качества изображения и способы их устранения

Дефект

Причины

Способы

изображения

 

устранения

 

 

 

 

1. Отсутствие центровки

1. Проверить правильность

 

объектива и конденсора.

установки оптической и

Неправильное

2. Виньетирование

осветительной системы

изображения из-за

микроскопа.

освещение.

неправильной установки

2. Установить освещение по

 

фильтра.

Келеру.

 

3. Неправильное положение

 

 

промежуточных линз.

 

 

4.

Неправильное установка

 

 

 

лампы в осветителе.

 

 

 

5.

Неправильная настройка

 

 

 

света по Келеру.

 

 

 

1.

Загрязненный или

1.

Заменить объектив.

Неконтрастное

поврежденный объектив.

2.

Удалить загрязнения

2.

Засохшее иммерсионное

петролейным эфиром или

изображение.

масло на фронтальной линзе

жидкостью для чистки оптики.

 

 

объектива.

 

 

 

 

 

 

 

Нечеткие пятна на

1.

Загрязнение линз и других

1.

Выявить участок

микроскопическом

оптических поверхностей

загрязнения, вращая окуляры,

изображении в поле

(светофильтров, призм, зеркал

фильтры и др.

зрения (пятна не

и др.).

2.

Удалить загрязнение.

смещаются при

 

 

 

 

передвижении

 

 

 

 

препарата).

 

 

 

 

Малоконтрастное

1.

Осутствие покровного

1.

Использование стандартных

изображение при

стекла.

покровных стекол.

использовании сухих

2.

Использование покровных

2.

Установка коррекционного

объективов с большой

стекол нестандартной

кольца в соответствии с

апертурой

толщины.

толщиной покровного стекла.

 

3.

Неправильная установка

3.

Правильное заключение

 

коррекционного кольца.

препарата.

 

4.

Избыток заключающей

 

 

 

среды между предметным и

 

 

 

покровным стеклом.

 

 

Неконтрастные

1.

Отсутствие иммерсионного

1.

Нанести иммерсионное

изображения или тени

масла между объективом и

масло.

при использовании

препаратом.

2.

Удалить старое

иммерсионных

2.

Добавление свежего

иммерсионное масло.

объективов.

иммерсионного масла к

3.

Удалить засохшее

 

старому, не удаленному с

иммерсионное масло с

 

препарата (тени).

объектива.

 

3.

Засохшее иммерсионное

4.

Удалить иммерсионное

 

масло на фронтальной линзе

масло с препарата, протереть

 

объектива.

объектив, нанести свежее

 

4.

Пузырьки воздуха в

иммерсионное масло.

 

иммерсионном масле.

 

 

 

5.

Использование суррогатов

5.

Использовать стандартное

 

иммерсионного масла.

иммерсионное масло.

 

 

 

 

 

Плохой контраст, потеря

1.

Неправильное раскрытие

1.

Установить раскрытие

разрешающей

апертурной диафрагмы:

апертурной диафрагмы в

способности.

пониженный контраст при

соответствии с используемым

 

слишком большом раскрытии;

объективом.

 

усиленный контраст

 

 

 

дифракционными кольцами

 

 

 

вокруг изображения - при

 

 

 

недостаточном раскрытии

 

 

 

апертурной диафрагмы.

 

 

 

 

 

 

 

Невозможно

1.

Слишком толстое

1.

Использовать покровные

сфокусировать препарат.

покровное стекло.

стекла стандартной толщины.

 

2.

Большой слой

2.

Правильно заключать

 

заключающей среды.

препарат.

 

3.

Неправильно установлено

3.

Наносить на предметное

 

предметное стекло (препарат

 

находится на обратной

стекло пометки, указывающие

 

стороне предметного стекла).

положение препарата.

 

 

 

 

 

Отсутствие мелких

1.

Избыточное окулярное

1.

Использовать

деталей из-за превышения

увеличение (использование

соответствующие окуляры и

полезного увеличения.

окуляров или проекционных

проекционные системы.

 

систем, при которых

 

 

 

увеличение превышает 500-

 

 

 

1000 апертур).

 

 

 

 

 

 

 

Нерезкое изображение

1.

Неправильная установка

1.

Полностью ввинтить

после смены объектива.

объектива в гнезде

объектив в гнездо револьвера.

 

револьвера, несовпадение

2.

Проверить центровку по

 

оптических осей (плохая

перекрестию центровочной

 

центровка).

пластинки.

Плохо изготовленные

1.

Плохие срезы.

1.

Отбор препаратов.

2.

Препараты избыточной

 

 

препараты

толщины.

 

 

 

3.

Плохая окраска.

 

 

 

 

 

 

 

Литература:

Аппельт Г. Введение в методы микроскопического исследования, М.,1959 Егорова О.В. С микроскопом на "ты". СПб.: Интермедика, 2000.

Михель К. Основы теории микроскопа, М., 1955 Панов В.А., Андреев Л.Н. Оптика микроскопов, Л.,1976

Пешков М.А. Микроскоп и основные методы работы с ним. В кн. "Лабораторные методы исследования патогенных простейших", М., 1957, стр. 7-51

Ромейс Б. Микроскопическая техника. М., 1953 Световая микроскопия в биологии. Методы. Под ред. А. Лейси, М., 1992

Скворцов Г.Е., Панов В.А., Поляков Н.И., Федин Л.А. Микроскопы, 1969 При разработке пособия использовались материалы сайта www.diamorph.ru