Туляремия. Эпидемиология и профилактика.
Актуальность: Туляремия – природно-очаговое зоонозное инфекционное заболевание бактериальной этиологии с разнообразными механизмами передачи возбудителя, характеризующееся общей интоксикацией, лихорадкой и в зависимости от механизма передачи возбудителя поражением лимфатических узлов, дыхательных путей, пищеварительного тракта, наружных покровов и других органов и систем.
Природные очаги туляремии имеются практически на всей территории Российской Федерации, их эпизоотическая активность ежегодно подтверждается обнаружением значительного числа положительных на туляремию проб из объектов внешней среды.
Ежегодно в России регистрируется от 100 до 400 случаев заболевания туляремией, 75 % которых приходится на Северный, Центральный и Западно-Сибирский регионы страны.
В 1993-2001 гг. вспышки туляремии были зарегистрированы в Республиках Башкортостан, Дагестан, Смоленской и Оренбургской областях, г. Москве. Особенностью современной заболеваемости туляремии является то, что более 70 % заболевших составляют не привитые против этой инфекции городские жители.
Впервые туляремия была диагностирована в начале XX века в США, на территории России эта инфекция обнаружена в 1926-1928 гг. в Астраханской, Рязанской, Тюменской, Воронежской областях и уже в предвоенные проявила себя значительной распространенностью среди людей, преимущественно в сельской местности. В 1940-е годы на территории
СССР выявлялись до 100-140 тысяч случаев туляремии среди людей, в течение 1946-1956 гг. когда были проведена массовая иммунизация против туляремии удалось снизить заболеваемость до 1000-2000 случаев в год. Несмотря на значительное снижение заболеваемости этой инфекцией в России, в начале XXI века туляремия остается актуальной проблемой в инфекционной патологии, что связано прежде всего с длительностью функционирования природных очагов практически на всей территории Российской Федерации.
Возбудитель туляремии Francissella tularensis McCoy et Chapin по со-
временной классификации отнесен к семейству Brucellaceae в отряде Eubacteriales, по своим свойствам является микроорганизмом II группы патогенности, вследствие чего туляремия имеет статус особо опасного инфекционного заболевания.
Туляремия, как заболевание диких животных и человека достоверно известно, в государствах Европы, Азии и Америки в пределах Северного полушария, природные очаги приурочены к умеренному климатическому поясу, на сегодняшний день неизвестны причины по которым туляремия не регистрируется в Южном полушарии. Отдельные данные о выявлении этой болезни в Африке нуждаются в подтверждении.
Цель занятия.
Усвоение вопросов эпидемиологии и профилактики туляремии.
Студент должен знать:
1. Этиологию туляремии.
2. Основные резервуары и переносчики возбудителя инфекции.
3. Механизм передачи возбудителя инфекции.
4. Пути инфицирования человека.
1
5. Восприимчивость населения к туляремии и иммунитет.
6. Характеристику эпидемического процесса.
7. Клиническую и лабораторную диагностику.
8. Профилактические и противоэпидемические мероприятия в очаге.
Студент должен уметь:
1. Выявлять случаи заболевания.
2. Обследовать случаи заболевания (подозрения) туляремии. 3. Определять природные очаги.
4. Планировать проведение профилактических и противоэпидемических мероприятий при этой инфекции.
Информационный материал.
Введение.
Туляремия природно-очаговый зооноз, распространенный преимущественно в ландшафтно-климатических зонах умеренного пояса Северного полушария. Отличительной особенностью туляремии является множественность путей (механизмов) передачи возбудителя инфекции при практически 100 % -ной восприимчивости человека без различия пола и возраста, а также отсутствие передачи от человека человеку.
Многообразие механизмов и путей заражения: контактный (через кожные покровы или слизистую оболочку глаза), инокулятивный (через кожные покровы при укусе членистоногого или млекопитающего), алиментарный (через пищеварительный тракт) и аспирационный (через дыхательные пути) обуславливают полиморфизм клинических проявлений туляремии.
В настоящее время различают три географические расы (подвида) туляремийного микроба:
а. неарктическая раса – F. tularensis nearctica Ols.
б. голарктическую расу - F. tularensis holarctica Ols., с японским ва-
риантом - F. tularensis holarctica var. japonica Rod.
в. среднеазиатскую расу - F. tularensis mediaasiatica Aikimb.
На территории Российской Федерации циркулирует голарктический подвид F. tularensis, отличающийся умеренной патогенностью для человека и животных.
Учитывая значительную стойкость природных очагов туляремии (5080 лет), разнообразие механизмов и путей передачи возбудителя инфекции, широкое распространение возбудителя в природе, вовлечение в его циркуляцию большого числа теплокровных животных и членистоногих, возможность контаминации воды и пищевых продуктов, сложность диагностики и тяжесть клинических проявлений туляремии определяют важность проблемы профилактики этого заболевания и его серьезного значения в современной инфекционной патологии.
Краткая историческая справка.
Первое упоминание о туляремийной инфекции относится к 1818г. на острове Хонсю (Япония) как заболевание "ято-био". В Норвегии в 1896 г. возбудитель туляремии был выделен от леммингов (Horne, 1912). В 1877 г. в России под Астраханью была выявлена вспышка заболевания, которое ретроспективно оценивается как туляремия.
Свое название туляремия получила по имени находящейся в Калифорнии (США) местности Туляре (волчья трава), населенной большим количеством разнообразных грызунов. В 1910 г. экспедиция, работавшая
2
под руководством МcCоу с участием Chapin выявила среди земляных белок и других грызунов эпизоотию чумоподобных заболеваний, при которых возникали бубоны, очень напоминавшие чумные.
Исследователи смогли искусственно передавать заболевания от больных животных здоровым, но чумного микроба при этом обнаружить не удалось. В 1912 г. они выделили от больных сусликов культуру возбудителей, названную бактериями туляремии.
Развившиеся у двух сотрудников экспедиции заболевания и последующие наблюдения показали, что туляремия представляет значительную опасность и для людей.
Большое сходство туляремии с чумой при более благоприятном течении дает основание предположить, что ряд наблюдавшихся в прошлом доброкачественных эпидемий чумы были в действительности вспышками туляремии.
ВЕвропе туляремия как болезнь человека диагностируется с 1917 года (Австрия), 1926 года (СССР, Норвегия, Германия) и затем практически во всех странах. Наибольшее распространение этой инфекции отмечалось в Чехословакии, Австрии, Германии, Франции, Польше, Швеции и других странах.
Встранах Азии туляремия среди людей обнаружена, кроме СССР, в Японии (официально в 1924 г.), Турции (1936 г.), Китае (1958 г.).
ВСеверной Америке туляремия обнаружена в США (1910 г.), Канаде (1930 г.) и Мексике (1944 г.), в Южной Америке – в Венесуэле (1948 г.).
Распространение туляремии в Российской Федерации.
Официальная регистрация туляремии в СССР введена с 1941 года, с этого времени территориальное распространение природных очагов этой инфекции достаточно хорошо изучено. Туляремия обнаружена во всех регионах России от западных границ (Кольский полуостров, Карелия, побережье Балтийского моря) на восток до Чукотки, Камчатки, острова Сахалина и Приморского края. К северу очаги туляремии местами распространены до полярного круга и даже частично переходят за него (низовья Печоры, Воркута, Норильск, пойма р. Лены, Чукотка), самая северная точка обнаружения туляремии – Норильск (69о25" с.ш.). Южная граница природной циркуляции туляремии выходит за пределы Российской Федерации и достигает Крым, Армению, Азербайджан, Туркмению, Южный Казахстан, Алтай, юг Приморского края.
Природные очаги туляремии в России не имеют сплошного распространения. Выделяют две обширные территории диффузного размещения очагов туляремии. Первая расположена в пределах Европейской части России, охватывая ее северо-запад, юг и юго-восток. Вторая находится в пределах Западной Сибири, охватывая Западно-Сибирскую низменность, предгорья Алтая и Кузнецкого Алатау. Между этими территориями (от Волги до Уральского хребта) туляремия выявляется лишь в немногих районах.
Этиология туляремии.
Возбудителем туляремии является бактерия Francissella tularensis McCoy et Chapin относящаяся к семейству Brucellaceae в отряде
Eubacteriales. Francissella tularensis характеризуется очень мелкими раз-
мерами клеток (0,3-0,5 нм) полиморфизмом, это короткие с закругленными концами палочки, не имеющие жгутиков, и следовательно не обладают активной подвижностью.
3
Грамотрицательные, неспорообразующие мелкие коккобактерии, не способные расти на простых питательных средах, обладают слабой ферментативной активностью, патогенные для теплокровных животных с приуроченностью размножения главным образом в паренхиматозных органах и способностью вызывать у чувствительных животных геморрагическую септицемию.
Возбудитель туляремии чувствителен к стрептомицину и другим аминогликазидам, левомицетину, тетрациклину, устойчив к пенициллину и его аналогам.
Микроб устойчив в объектах окружающей среды, в воде поверхностных водоемов при температуре 13-15ºС бактерии могут сохранятся до 3 месяцев, при 4ºС до 4 месяцев и более, при температуре 20-25ºС – погибают в течение нескольких дней. В почве, иле при температуре 4-7ºС бактерии выживают до 3 месяцев. Длительно выживают в молоке, сливках, сохраняемых при низкой (8-15ºС) – 8 суток, в замороженном молоке – более 3-х месяцев. На зерне и в соломе при температуре - 5ºС – около 7 мес., при 8-12ºС – до 2 месяцев. Возбудитель туляремии устойчив к высушиванию, особенно если он находится в органах и тканях животных.
На прямом солнечном свете бактерии туляремии погибают в течение 20-30 минут, на рассеянном – могут сохраняться несколько дней.
Микроб малоустойчив к высоким температурам (при 60ºС гибнет через 5-10 минут, кипячение – в течение 1-2 минут).
Малоустойчив к средствам химической дезинфекции: 3 % растворы хлорной извести, хлорамина, других дезинфектантов уничтожают его через 20-30 минут.
Голарктическая раса обнаруживает большую устойчивость во внешней среде без снижения вирулентности: во льду до 10-11 месяцев, в речной воде при 1ºС – до 9 мес., на зерне и соломе – до 6 месяцев, при комнатной температуре сохраняются в воде 30-60 суток. Неарктическая раса соответственно 8 месяцев, до 5-6 месяцев, 3-4 месяца, не более 20 суток.
Эпизоотологические особенности туляремии.
Источниками возбудителя туляремии на территории Российской Федерации установлена зараженность туляремией 73 видов диких позвоночных животных. Грызуны составляют наиболее значительную часть из них 43 вида, что связано с особенностями биологии, распространенности и численности представителей этой группы и их отношением к инфекции.
Заражение туляремией в естественных условиях обнаружено у 3 видов зайцев (русака, беляка и толая). В отряде грызунов известно заражение 23 видов семейства хомякообразных: водяная крыса, полевок (обыкновенная, экономка и пр.), лесных полевок (рыжей, красной, красносерой и пр.), ондатры, песчанок (полуденной, персидской и пр.).
Всемействе мышиных естественное заражение туляремией зарегистрировано у 8 видов мышей (домовой, лесной, желтогорлой, полевой, малютки, крыс – серой, черной).
Всемействах беличьих, тушканчиковых, сонь, насекомоядных.
Вотряде хищных зарегистрирована туляремия у лисицы, волка, енотовидной собаки, хоря, ласки, горностая, соболя).
Кроме того, известны случаи заражения туляремией домашних животных: кролика, собаки, кошки, а также сельскохозяйственных животных: лошади, крупный рогатый скот, свиньи, верблюды, северные олени.
Вклассе птиц установлено заражение в природных условиях нескольких видов: коршуна, голубя, глухаря, рябчика, перепела, водяной курочки, коростеля, крачек, речной чайки и домашней курицы.
4
Известно выделение культур туляремийного микроба из озерной лягушки и жабы, среди рыб у гольца и линя.
Всего туляремия в мире зарегистрирована у 125 видов позвоночных животных, вовлечение в эпизоотический процесс птиц, земноводных и рыб носит случайный характер и не оказывает влияния на поддержание очаговости туляремией.
Изучение туляремии, вызванной голарктической расой показало, что имеется три основных группы млекопитающих, разделенных по степени восприимчивости и чувствительности к туляремии, а также по их роли в эпизоотическом процессе:
Iгруппа. Высоковосприимчивые и высокочувствительные млекопитающие (заражаются при попадании в организм единичных туляремийных бактерий, остро болеют и быстро погибают). К этой группе относятся все виды мелких мышевидных грызунов, кроме полевой мыши, зайцеобразные
инасекомоядные, за исключением ежей, куторы, выхухоли.
IIгруппа. Высоковосприимчивые, но малочувствительные млекопитающие (заражаются при попадании в организм единичных туляремийных бактерий, болеют тяжело, но быстро освобождаются от возбудителя, приобретается устойчивый иммунитет). К этой группе относятся полевая мышь, все виды крыс и сусликов, белки, бурундуки, бобры, ежи, выхухоль, кутора, белозубка и некоторые другие виды млекопитающих.
IIIгруппа. Маловосприимчивые и практически нечувствительные млекопитающие. К ним относятся большинство хищных млекопитающих и сельскохозяйственных животных.
Наибольшее эпидемиологическое и эпизоотологическое значение имеют животные I группы.
В настоящее время на территории Российской Федерации выделяют 6 основных ландшафтных типов природных очагов туляремии: лугополевой, степной, пойменно-болотный, предгорно-ручьевой, лесной и тундровый. Отдельно выделяют синантропные (урбанистические) очаги.
1. Луго-полевой тип. Инфекция циркулирует среди полевок, зайцев и других млекопитающих I группы. Резервуарами и переносчиками инфекции являются иксодовые клещи Dermacentor pictus. Очаги расположены в лесной и лесо-степной зонах.
2. Степной (овражно-болотный) тип. Возбудитель циркулирует за счет обыкновенной полевки, степной пеструшки и домовых мышей. Активно вовлекаются в процесс зайцы, хомяки и другие виды млекопитающих. Резервуарами и источниками инфекции служат также многочисленные виды пастбищных иксодовых клещей. Этот тип очага распространен в степной зоне Европейской части России, степях Западной Сибири и Забайкалья.
3. Пойменно-болотный тип. Очаг поддерживается водяной полевкой, ондатрой и другими околоводными млекопитающими I группы. Резервуарами инфекции являются иксодовые клещи. Большую роль в циркуляции возбудителя играет вода в Северном, Северо-Западном районах, Восточной Сибири и других регионах. Существенную роль в передаче инфекции между грызунами, а также человеку играют комары и слепни.
4. Предгорно(горно)- ручьевой тип. Очаг поддерживается на водяных полевках и других мелких зверьках. Вода инфицируется выделениями и трупами мышевидных грызунов, а ее низкая температура способствует длительному сохранению возбудителя. Очаги локализуются по берегам рек и речек в предгорьях Саян, Кузнецкого Алатау, Кавказа, Алтая и других горных систем.
5
Указанные 4 типа природных очагов туляремии эпидемиологически наиболее опасны.
5. Лесной тип. Инфекция поддерживается среди рыжих полевок, лесных и желтогорлых мышей, а местами – зайцами. Резервуарами инфекции служат иксодовые клещи (лесные и таежные). Распространен в зоне широколиственных и смешанных лесов, реже в таежной зоне.
6. Тундровый тип. Поддерживается за счет разных видов леммингов и других мелких грызунов I группы. Инфекция сохраняется годами в подстилках гнезд леммингов и во льду. Этот тип очага распространен в тундровой зоне.
7. Синантропный (урбанистический) тип. Очаги располагаются на территории городов, поселков или на их окраинах. Основные носители – синантропные грызуны (домовая мышь, серая крыса). Эпизоотии возникают в результате «заноса» возбудителя мигрирующими грызунами из природных биотопов (осень, начало зимы), к весне – затухают.
Тактика эпизоотологического обследования природных очагов туляремии.
Эпизоотологическое обследование природных очагов туляремии являясь важнейшим направлением эпидемиологического надзора за этим заболеванием, преследует следующие основные цели:
-контроль за состоянием известных очагов туляремии (выявление эпизоотий, определение их интенсивности, изучение механизмов циркуляции возбудителя, оценка угрозы эпидемических осложнений).
-оценка изменений, происходящих в очагах при антропогенном воздействии и трансформации ландшафтов;
-разведка неизученных или малоизученных территорий для уточнения нозологической географии туляремии, эпизоотологического и эпидемиологического районирования;
-прогнозирование эпизоотической ситуации и обоснование конкретных
мер профилактики.
Сбор этих сведений достигается путем систематического, планового обследования территории в минимально необходимом для этого объеме работ.
Эпизоотологическое исследование предусматривает: сбор полевого материала, его лабораторное исследование и последующий анализ полученных данных.
Полевой раздел работ включает изучение природных особнностей территорий (рельеф, климат, почва и т.п.); изучение видового состава, распределение и численности млекопитающих – носителей инфекции и членистоногих-переносчиков; отлов животных и сбор эктопаразитов; поиск трупов и следов жизнедеятельности мелких млекопитающих (ММ), объектов окружающей среды; доставку этого материала в лабораторию и подготовку его к исследованию; изучение особенностей образа жизни животных, которые определяют развитие эпизоотического процесса и условия заражения людей. Сбор материала для лабораторного исследования обычно сочетают с изучением видового состава и проведением учетов численности ММ и членистоногих переносчиков.
При эпизоотологическом обследовании используют как общепринятые зоолого-паразитологические методы, так и специфические, направленные на поиск туляремийных эпизоотий. Поиски туляремийных эпизоотий в первую очередь должны производится в тех районах, где в прошлом имели место случаи заболевания людей, были выделены культуры возбудителя или обнаружен антиген в объектах окружающей среды. Как
6
правило, каждый район обследует 1 раз в 1-2 года (в зависимости от активности очага); имеющиеся стационары или пункты многолетних наблюдений обследуют ежегодно - весной и осенью. По эпидпоказаниям проводят экстренные эпизоотологические обследования. Во всех случаях при обнаружении эпизоотии туляремии выясняют границы ее распространения. Границы эпизоотий определяют следующим способом. По результатам лабораторного исследования материала, собранного на энзоотичной по туляремии территории, картируют, все “точки” соединяют (оконтуривают). На оконтуренной территории отмечают участки с положительными пробами, определяют тип очага, процент зараженных проб, показатели численности носителей и переносчиков, процент зараженных биотопов. Таким образом, устанавливают пространственно-биоценотическую структуру очага, степень распространения эпизоотии, ее интенсивность. Важно подчеркнуть, что при обследовании больших территорий и получении сведений о состоянии очагов туляремии в сжатые сроки, необходимо использовать маятниковый метод обследования. Сущность метода заключатся в том, что выезды групп эпизоотологического обследования осуществляется каждый раз в удаленные от предыдущего места обследования районы. В итоге оперативно охватывает обследованием наибольшую площадь энзоотичной по туляремии территории.
Организация поисков туляремийных эпизоотий.
Возникновение заболеваний среди людей определяется эпизоотическим состоянием очагов. Разлитые эпизоотии туляремии происходят обычно в годы высокой численности ММ, являются важной характеристикой состояния очага и признаком возможного эпидемического неблагополучия. Наблюдение за численностью ММ – одна из основных составляющих эпизоотического обследования, которое осуществляют на основе различных методов количественного учета ММ. При этом основное внимание уделяют обследованию скирд, ометов, стогов, строений, расположенных в окружении природных биотопов, а также зарослей кустарников, опушек широколиственных лесов, заселенных оврагов, полей засеянных зерновыми культурами, лесополос, околоводных биотопов, используемых человеком строений, других мест повышенного риска заражения людей туляремией.
В поисках туляремийных эпизоотий, лабораторному исследованию подвергают отловленных разными методами диких ММ или трупы, собранные в природе, остатки трупов, подснежные гнезда грызунов, продукты жизнедеятельности ММ, погадки птиц (ПП), помет хищных млекопитающих (ПХМ), а также солому, мякину, талую воду и другие объекты, загрязненные выделениями грызунов, воду из естественных водоемов и колодцев, гидробионтов и др.
Среди членистоногих переносчиков основное внимание уделяют иксодовым клещам. Кроме того, исследуют мелких эктопаразитов, собранных с ММ (вшей, гамазовых и краснотелковых клещей, блох). При трансмиссивных вспышках исследуют кровососущих двукрылых (комаров, слепней и др.). Серологические исследования домашних животных производят при соответствующих эпизоотологических и эпидемиологических показаниях.
Основными методами лабораторного исследования являются: биологический (заражение биопробных животных), бактериологический (бактериоскопия, посевы на питательные сред); иммунофлуоресцентный; серологические (реакция аглютинации, реакция пассивной гемагглютинации, реакция нейтрализации антител, реакция коагглютинации и другие); мо
7
лекулярно-биологический (полимеразная цепная реакция (ПЦР), направленная на выявление специфической ДНК возбудителя).
Исследование диких позвоночных животных. При поисках эпи-
зоотий туляремии в первую очередь исследуют отловленных животных и трупы высокочувствительных ММ 1-ой группы. Основным методом при этом является бактериологический. Во вторую очередь исследуют малочувствительных к туляремии животных 2-ой группы, а затем – 3-ей, которых исследуют как бактериологическими, так и серологическими методами. Однако у животных 1-ой группы в небольшом проценте случаев может иметь место хроническая форма туляремии с формированием специфических антител. В этой связи целесообразны поиски антител и у зверьков 1-ой группы. Наличие антител указывает на контакт зверьков с возбудителем.
В большинстве случаев животных доставляют в лабораторию мертвыми (убитыми или павшими). Успех бактериологического исследования зависит от свежести доставленного материала, поэтому животных или их органы, если они были заморожены или законсервированные, исследуют немедленно после доставки в лабораторию. Если это не удается, то труппы животных или органы сохраняют на холоду. В первую очередь исследуют зверьков, найденных мертвыми.
Исследование домашних животных. Домашние животные (круп-
ный рогатый скот, свиньи, овцы, северные олени) относятся к видам малочувствительным к туляремии (3-я группа). При их исследовании используют главным образом серологические методы (РА и РПГА), реже – внутрикожную пробу с тулярином.
Метод поиска зимних эпизоотий туляремии. Во время зимних лыжных маршрутов под одиноко стоящими деревьями и кустами, на ометах соломы, под столбами и другими возвышениями на снегу можно обнаружить обрывки шкурок ММ, которые хищные птицы сдирают, прежде чем съесть зверька. Иногда на снегу около обрывков шкурок имеются замороженные капли крови. Обрывки шкурок и капли замороженной крови собирают в пробирки и исследуют с помощью биологической пробы. Во время зимнего тропления следов лисы собирают экскременты, обрывки шкурок, остатки трупов ММ и гнездового материала, раскопанных лисой нор ММ. Собранный таким образом материал исследуют путем биологической пробы и серологическими методами.
Сбор и исследование погадок птиц (ПП) и помета хищных мле-
копитающих ( ПХМ). Для ориентировочного обследования значительный территорий применяют серологическое исследование ПП и ПХМ на содержание туляремийного антигена. Преимущества метода заключаются в малой трудоемкости процесса сбора и быстроте исследования полевого материала, в возможности за короткий срок обследовать значительные территории открытых ландшафтов и быстро получить ответ о наличии или отсутствии инфекции. Метод применим для раннего и ретроспективного выявления эпизоотии, определение ее границ, установления видов животных, вовлеченных в эпиозоотический процесс и оценки их численности. Поедая в природе преимущественно ослабленных, больных зверьков или их трупы, хищники осуществляют выбор из популяции именно того материала, который желателен для лабораторного исследования.
Погадка представляет собой плотный, продолговатый комок не переваренных птицей частей пищи (шерсть, кости, перья, хитин насекомых т.п.), выбрасываемый ею через рот по окончании процесса предварительного пищеварения. Образование погадок отмечается у всех хищных птиц, чаек и некоторых других. Костные остатки млекопитающие в погадках
8
хорошо сохраняются, что позволяет установить видовую принадлежность съеденных зверьков. Птицы сбрасывают погадки во время отдыха через 10-20 часов после кормежки. Погадка может содержать остатки зверька у мелких птиц и нескольких – у крупных хищников. Установлено, что птицы сбрасывают погадки недалеко от мест кормежки и можно считать, что исследование содержимого погадок характеризует именно ту территорию, на которой они собраны (в пределах 2-3 км от точек сбора).
Помет хищных млекопитающих (семейства куньих, собачьих) также состоит из не переваренных частей пищи, видовой состав которой в полевых условиях определить трудно, т.к. были разжеваны и прошли пищеварительный тракт хищника. Участок охоты хищных млекопитающих, как правило, постоянен и занимает территорию в несколько квадратных километров.
Длительность сохранения погадок и помета в природе, прежде всего, зависит от климатический условий местности. В зоне достаточного увлажнения разрушение их происходит в течение 4-5 месяцев под воздействием гнилостных процессов и насекомых-некрофагов. В засушливом климате степей и пустынь они могут сохраняться более длительное время (в течение года и более). Чем свежее погадка, тем они темнее окрашены. Гибель туляремийного микроба в погадках происходит быстро (в первые сутки, при отрицательных температурах, возможно, дольше) в связи с чем бактериологическое исследование этого материала нецелесообразно. Туляремийный антиген сохраняется в погадках и помете в течение всего периода их существования. Для поиска туляремииного антигена в ПП и ПХМ используют различные серологические методы, чаще всего наиболее простой и доступный – РНАТ.
Анализ результатов исследования ПП и ПХМ. Обнаружение туля-
ремийного антигена в исследуемом материале служит достоверным критерием наличия эпизоотии на обследуемой территории в период обследования или в недавнем прошлом и является основанием для организации противоэпидемических мероприятий, в том числе работ, направленных на выделение возбудителя. Количество положительных ПП и ПХМ позволяет судить об интенсивности эпизоотического процесса:
-в местах разлитых эпизоотий этот показатель составляет 20-60% от всего материала;
-а при локальных (вялых) эпизоотиях – 0,5-3%.
Для обнаружения антигена при вяло текущих эпизоотиях туляремии необходимо собрать и исследовать не менее 100 ПП и ПХМ из одного места в течение одного сезона обследования, а для контроля за эпизоотической ситуацией в известных очагах туляремии (для контроля за эпизоотической ситуацией в известных очагах туляремии) – не менее 25 ПП и ПХМ, собранные весной в лесной и лесостепной зонах, характеризуют эпизоотическое состояние зимнего периода и ранней весны, а собранные осенью – лета.
Исследование кровососущих членистоногих и беспозвоночных животных-гидробионтов. Добытых в природе насекомых и других беспозвоночных животных исследуют, как правило, в день доставки в лабораторию, или не позднее следующего дня. Исключение может быть только для взрослых иксодовых клещей, которых можно сохранять живыми 2-3 недели на холоду. Погибшие и высохшие членистоногие непригодны для бактериологического исследования.
Беспозвоночных животных перед исследованием определяют до вида (или рода) и группируют в отдельные пробы, содержащие животных одного вида (рода) и добытых с одного места. Обнаружение туляремийно
9
го микроба в организме беспозвоночных наиболее эффективно при использовании биологического метода или ПЦР-анализа, выявляющего специфическую ДНК возбудителя туляремии. Однако последний метод может быть использован и оценен в настоящее время только специализированными научными лабораториями. В редких случаях удается туляремийные бактерии в иксодовых клещах посевом содержимого их тела на питательную среду или с помощью люминесцентной микроскопии.
Исследование объектов внешней среды. Исследование объектов внешней среды является эффективным способом обнаружения возбудителя туляремии, т.к. последний обнаруживает значительную устойчивость во внешней среде, особенно при низкой температуре. Так в замороженной воде при –5С возбудитель сохраняется до 10,5 месяцев, во влажной почве при 4 0 С – до 4-х месяцев в зерне, соломе при –5 0 С - до 6 месяцев, при 8- 12 0 С – 2 месяца, в замороженных трупах мышей – 6 месяцев, зайцев –
112 дней.
Исследование воды. Пробы берут из речек, ручьев, прудов, озер, болот, колодцев. Из каждой точки желательно брать 2 пробы. Пробы берутся в затененном месте, на глубине 10-20 см от поверхности стоячей или слабо проточной воды. Желательно отбирать пробы в местах обитания зверьков (возле кормовых столиков, нор, хаток бобров или ондатр.) Воду в количестве 100-200 мл отбирают в стерильные бутылочки емкостью 20-250мл, закрывают пробкой, бумажным колпачком и обвязывают шпагатом. Исследование воды проводят в день ее доставки в лабораторию биологическим методом. Для концентрирования возбудителя используют фильтрование, центрифугирование, магнитные сорбенты и другие приемы. После этого белой мыши вводят подкожно до 1 мл, а морской свинке до 5 мл воды (желательно по 2 биопробы). Наиболее эффективно применение исследование воды в пойменно-болотных очагах туляремии в зимнее время.
Зерно, солома, подснежные гнезда грызунов, другие субстраты.С зерна, соломы, гнездового материала и других субстратов делают смыв физиологическим раствором. Для этого 5-10 г. исследуемого субстрата помещают в стерильный сосуд, заливают двойным по весу количеством физиологического раствора и тщательно встряхивают. Смыв набирают в шприц (через кусочек ваты) и вводят биопробному животному. Зимой с соломы ометов собирают замерзшую мочу, экскременты грызунов, которые также используют для биопробы. Подснежные гнезда грызунов биологическим и серологическим методами.
Эпидемиологические особенности туляремии.
Характерной особенностью эпидемиологии туляремии является множественность механизмов заражения и путей передачи возбудителями инфекции, почти 100% восприимчивость к ней людей, без различий пола и возраста, отсутствие передачи инфекции от человека к человеку.
Заражение людей происходит в природных или во вторичных синантропных очагах этой инфекции при реализации следующих механизмов передачи возбудителя инфекции:
•Трансмиссивный (инокулятивный) механизм заражения человека осуществляется в результате укусов инфицированными кровососущими членистоногими (комарами, слепнями, клещами). Контактный механизм реализуется при соприкосновении поврежденных кожных и слизистых покровов с больными или павшими грызунами и зайцами.
•Алиментарный механизм осуществляется при употреблении инфицированных больными грызунами продуктов питания (хлеб, печенье, суха
10