2 курс / Микробиология 1 кафедра / 5. 2

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1.Характеристика менингококков, вызываемые заболевания. Микро-

биологическая диагностика и специфическая профилактика менин-

гококковой инфекции.

Менингококки – Neisseria meningitidis.

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные диплококки бо-

бовидной формы, жгутиков и спор не имеют, в организме могут образовывать

капсулу.

Чистая культура Neisseria meningitides. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к условиям культиви-

рования, растут на сывороточном агаре, образуют мелкие гладкие прозрачные колонии. Строгий температурный оптимум 370С (при других температурах менингококки погибают) необходимо соблюдать как при культивировании, так и при транспортировке материала от больного в лабораторию.

Антигенная структура: по капсульным полисахаридным антигенам вы-

деляют 13 серогрупп, из которых наиболее патогенными для человека являются серогруппы А и С, вызывающие эпидемические вспышки.

Факторы патогенности менингококков:

1.Пили, белки наружной мембраны обеспечивают адгезию и инвазию в эпителий носоглотки;

15

2.Протеаза IgA расщепляет молекулы секреторных IgА, снижая местную защиту слизистых оболочек носоглотки;

3.Капсула защищает от фагоцитоза;

4.Ферменты инвазии: гиалуронидаза, нейраминидаза и др.;

5.Эндотоксин (ЛПС), основной фактор патогенности, который вызыва-

ет поражение кровеносных сосудов, что проявляется кровоизлияниями во внутренние органы и геморрагической сыпью на коже.

Источник инфекции: больной человек, бактерионоситель. Чаще (в 7080% случаев) болеют дети первых трех лет жизни.

Путь заражения: воздушно-капельный. Входные ворота инфекции слизи-

стая оболочка носоглотки.

Заболевания, вызываемые менингококками, представлены в табл. 6.

Микробиологическая диагностика менингококковых инфекций.

1.Бактериологический метод (основной): выделение чистой культуры возбудителя на сывороточных средах и определение его антибиотико-

чувствительности.

2.Бактериоскопический метод используется как обязательный ориенти-

ровочный. В мазках из нативного материала с окраской по Граму выяв-

ляется внутриклеточное расположение менингококков с характерной картиной незавершенного фагоцитоза.

3.Молекулярно-биологический метод: ПЦР.

16

Специфическая профилактика менингококковой инфекции проводится

только по эпидемическим показаниям менингококковой полисахаридной вак-

циной серогрупп А и С.

2.Характеристика гонококков. Микробиологическая диагностика гоно-

кокковых инфекций.

Гонококки – Neisseria gonorrhoeae.

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные диплококки бо-

бовидной формы, имеют микрокапсулу, неподвижны, спор не образуют.

N.gonorrhoeae. Мазок из гноя. Окраска метиленовым синим.

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к питательным средам и температуре инкубации, температурный оптимум 370С, растут на сывороточ-

ных средах.

Факторы патогенности гонококков:

1.Пили, белки наружной мембраны обеспечивают адгезию и инвазию в цилиндрический эпителий мочеполовых путей, ингибируют фагоцитоз;

2.Капсула защищает от фагоцитоза;

3.Протеаза IgA расщепляет секреторные иммуноглобулины;

4.Эндотоксин (ЛПС) вызывает повреждение клеток и воспалительную реакцию ткани;

17

5. R-плазмиды (факторы множественной лекарственной устойчивости).

Источник инфекции: больной человек.

Пути заражения: половой, контактный, контактно-бытовой, интранаталь-

ный (во время родов).

Клиническая классификация гонококковой инфекции (приведена в со-

кращенном варианте) основана на локализации патологического процесса

(Клинические рекомендации «Гонококковая инфекция», 2020):

1.Гонококковая инфекция нижних отделов мочеполового тракта: уретрит,

цервицит, цистит, вульвовагинит и др. У женщин в 70% случаев без симптоматики;

2.Гонококковая инфекция мочеполовых органов: эпидидимит, орхит,

простатит, эндометрит, сальпингоофорит и др.;

3.Гонококковая инфекция глаз: конъюнктивит, офтальмия новорожден-

ных;

4.Гонококковый фарингит;

5.Гонококковая инфекция аноректальной области;

6.Гонококковая инфекция костно-мышечной системы: артрит, бурсит и др.;

7.Другие гонококковые инфекции: эндокардит, менингит, сепсис и др.

Микробиологическая диагностика гонококковой инфекции.

1.Бактериоскопический метод: только при исследовании отделяемого уретры у мужчин с выраженными симптомами уретрита.

2.Молекулярно-биологический метод: определение специфических фрагментов ДНК N.gonorrhoeae с помощью ПЦР. Материал на исследо-

вание зависит от локализации: отделяемое уретры, моча, отделяемое влагалища, шейки матки, мазок со слизистой оболочки ротоглотки, от-

деляемое слизистой оболочки прямой кишки, отделяемое конъюнктивы.

18

3.Бактериологический метод: выделение чистой культуры возбудителя на сывороточных средах и определение его антибиотикочувствительно-

сти. Материал – в зависимости от локализации.

4.Характеристика гемофильных бактерий, роль в патологии. Микробио-

логическая диагностика гемофильных инфекций.

В группу гемофильных (от греч. haima – кровь, philos – любить) объедине-

ны мелкие грамотрицательные бактерии, способные расти только на средах, со-

держащих кровь или ее производные. Многие гемофильные бактерии в норме обитают на слизистых оболочках дыхательных путей человека.

Основную роль в патологии человека играет Haemophilus influenzaе. В

странах с тропическим климатом также регистрируют H.ducreyi.

Морфо-тинкториальные свойств: грамотрицательные мелкие палочки,

жгутиков и спор не имеют. H.influenzae может образовывать капсулу в орга-

низме.

Haemophilus influenzae. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: требовательны к питательным средам, для культивирования необходимы факторы роста, обозначенные буквами X и V: X-

фактор: гемин, содержащийся в эритроцитах; V-фактор: кофактор окислитель-

но-восстановительных ферментов (НАД). На шоколадном агаре (с прогретой кровью) образуют мелкие блестящие гладкие колонии.

19

Антигенная структура H.influenzae: по капсульному антигену подразде-

ляют на 6 серотипов, из них наиболее патогенный H.influenzae типа b.

Факторы патогенности H.influenzae:

1.Пили обеспечивают адгезию к эпителиальным клеткам;

2.Капсула защищает от фагоцитоза, обладает антикомплементарным дей-

ствием;

3.Протеаза IgA расщепляют секреторные IgA;

4.Эндотоксин (ЛПС) стимулирует инвазию и развитие воспаления;

Источник инфекции: больной человек, бактерионоситель.

Путь передачи: воздушно-капельный.

H.influenzae вызывает различные заболевания (табл. 7).

Таблица 7 Основные заболевания, вызываемые гемофильными бактериями и

материал для бактериологического исследования

Микробиологическая диагностика.

1.Бактериологический метод с определением антибиотико-

чувствительности возбудителя.

2.ПЦР.

20

Специфическая профилактика заболеваний, вызываемых гемофильными

бактериями в России, не разработана, но разрешены к применению зарубежные

вакцины против H.influenzae типа b.

5.Характеристика бордетелл. Микробиологическая диагностика коклюша

ипаракоклюша. Специфическая профилактика коклюша.

Род Bordetella включает 2 патогенных для человека вида:

B.pertussis – возбудитель коклюша;

B.parapertussis – возбудитель паракоклюша (коклюшеподобное заболевание

у человека).

Морфо-тинкториальные свойства: грамотрицательные мелкие, короткие бактерии, спор не образуют, имеют микрокапсулу, неподвижны.

Чистая культура B.pertussis. Окраска по Граму.

Культуральные свойства: строгие аэробы, требовательны к питательным средам. B.pertussis культивируют на специальных питательных средах: казеи-

ново-угольный агар (КУА), среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар с кровью человека), молочно-кровяной агар. На среде Борде-Жангу возбу-

дитель коклюша растет в виде гладких мелких блестящих выпуклых колоний,

напоминающих капельки ртути. B.parapertussis культивируют на МПА и в МПБ.

21

Антигенная структура:

1.О-антиген – родоспецифический;

2.К-антигены (капсульные) имеют значение для идентификации видов бордетелл по антигенным свойствам в реакции агглютинации.

Факторы патогенности B.pertussis:

1.Комплекс адгезинов: филаментозный гемагглютинин (протективный ан-

тиген), пили, белок наружной мембраны (пертактин), капсула;

2.Токсины:

•коклюшный экзотоксин вызывает повышенную чувствительность к ги-

стамину, лимфоцитоз;

•трахеальный цитотоксин повреждает мерцательный эпителий респира-

торного тракта;

•дермонекротоксин вызывает воспаление и некроз эпителия респиратор-

ного тракта;

•аденилатциклаза подавляет функции фагоцитов;

•эндотоксин (ЛПС) повреждает эпителиальные клетки респираторного тракта, обладает общетоксическим действием.

Коклюш – острое инфекционное заболевание. Чаще болеют дети до-

школьного возраста.

Источник инфекции: больной человек (особенно в катаральном периоде заболевания), редко – бактерионоситель.

Путь передачи: воздушно-капельный.

Заболевание характеризуется высокой контагиозностью. После контакта неиммунизированного человека с больным коклюшем вероятность развития за-

болевания составляет 75-90%.

Клиника: инкубационный период длится в среднем 2 недели, затем сле-

дует катаральный период (наиболее контагиозный, проявляется симптомами сухого, постоянно усиливающегося кашля). Пароксизмальный период (пери-

22

од судорожного кашля), который характеризуется появлением приступов спаз-

матического кашля, частые продолжительные приступы кашля могут приво-

дить к перевозбуждению дыхательного центра и остановке дыхания (развитию апноэ), стадия выздоровления характеризуется постепенным уменьшением частоты приступов кашля, выздоровление наступает медленно (в течение 1-2

месяцев).

Паракоклюш имеет более легкое течение.

Материал на исследование: слизь с задней стенки глотки.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-диагностика (в начале заболевания): РИФ и ИФА для опре-

деления антигенов возбудителей в материале от больного.

2.Бактериологический метод, основной (наиболее эффективен в конце инкубационного периода и в катаральном периоде): посев слизи с зад-

ней стенки глотки на соответствующие среды с последующей иденти-

фикацией. Забор материала в пароксизмальный период чаще проводят методом «кашлевых пластинок» (во время приступа кашля подносят чашку с питательной средой ко рту на расстояние 10-12 см). Реже берут мазок тампоном с задней стенки глотки.

3.Молекулярно-биологический: ПЦР.

4.Серологический метод (используют с 3 недели заболевания): опреде-

ление антител в сыворотке крови с помощью РА, РНГА, РИФ

(непрямая), ИФА.

Специфическая плановая профилактика коклюша.

В течение первого года жизни ребенку необходима трехкратная вакцина-

ция убитой коклюшной вакциной в составе АКДС (адсорбированная ко-

клюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина) (Россия).

23

Разработаны и применяются бесклеточные вакцины, содержащие очи-

щенные антигены возбудителей коклюша (филаментозный гемагглютинин, ко-

клюшный анатоксин и др.) (Япония, Бельгия, США и др.).

Экстренная профилактика (для неиммунизированных людей при кон-

такте с больным коклюшем): нормальный человеческий иммуноглобулин.

B.bronchiseptica представляют собой мелкие подвижные грамотрицатель-

ные палочки, которые являются паразитами млекопитающих. Они локализуют-

ся и размножаются среди ресничек эпителия дыхательных путей.

B.bronchiseptica крайне редко вызывает у людей заболевание, напоминающее паракоклюш. Ее можно обнаружить в носоглотке людей со сниженным имму-

нитетом, а также людей, содержащих домашних животных (кроликов, собак и др.). Возможно бессимптомное носительство этих бактерий у человека.

6. Характеристика легионелл, роль в патологии, микробиологическая диа-

гностика легионеллеза.

Из 22 видов легионелл, патогенных для человека, 95% случаев заболева-

ний связаны с видом Legionella pneumophila. Бактерии получили название бла-

годаря вспышке пневмонии со смертельными исходами среди участников съез-

да Американского Легиона в 1976 г. (болезнь легионеров, легионеллез).

Морфо-тинкториальные свойства: L.pneumophila – мелкие грамотрица-

тельные палочки, спор и капсул не образуют, подвижны.

Культуральные свойства: аэробы, требовательны к питательным средам,

размножаются только на сложных питательных средах (с добавлением железа и цистеина).

Факторы патогенности. Легионеллы – факультативные внутриклеточные паразиты. Активно размножаются в макрофагах, что приводит к их разруше-

нию и выходу бактерий в легочную ткань. Этот процесс обеспечивается следу-

ющими факторами патогенности: цитотоксином и супероксиддисмутазой.

Эндотоксин (ЛПС) обусловливает симптомы общей интоксикации.

24