3. Возбудители холеры: устойчивость во внешней среде, токсинообразование,

Устойчивость к ф-рам окр среды: при Т 60° С холерные вибрионы погибают в течение 5 мин, при кипячении - мгновенно. Низкие Т они переносят хорошо. Во льду сохр несколько мес, в морской и речной воде - несколько нед, в кишечнике мух - 4-5 дней. К высушиванию и солнеч свету холер вибрионы очень чувствительны. Общепринятые концентрации дез в-в убивают их быстро. Однако при работе с возбуд холеры пользуются дез р-рами большей концентрации. Холер вибрионы чувствит к к-там (хлороводородной к-те). Вибрион холеры Эль-Тор более устойчив.

Токсинообразование: Холер вибрионы продуцируют токсины 2х типов. Токсин I типа - эндотоксин, выделяется при разрушении микробной кл, термостабилен (липополисахарид). Считают, что он способствует развитию антибактериал иммунитета. Токсин И типа - экзотоксин (холероген) термолабилен, обладает энтеротоксическим действием и играет важную роль в патогенезе холеры (усиливает ф-цию секреторных кл тонкого кишечника, что приводит к обезвоживанию организма). Токсин III типа термостабилен, считают, что он подавляет активный транспорт натрия через эпителий кишечника.

4. Возбудители холеры: механизм заражения и клинические проявления болезни.

Механизм заражения – фекально-оральный Ист инфекции – больной чел, бактерионосители. Пути передачи: алиментарный, водный Входные ворота: слизистые ЖКТ Патогенез поражений: Холера — острая инфекц болезнь, характер поражением тонкой кишки, наруш водно-солевого обмена и интоксикацией. Это особо опасная карантинная инфекция. Инкубац период от 2 ч до 6 дней. Болезнь развивается остро с повыш Т тела до 38—39 ˚С, рвоты, поноса, болей в животе, тенезм. Стул имеет вид рис. отвара. Резкое обезвоживание приводит к наруш деят серд-сосуд и дых сис-м, развитию почечной недостат. При отсут леч болезнь может перейти в стадию холерного алгида (algidus — холодный), характерным признаком кот явл сниж Т тела до 34 °С. При отсут леч холерный алгид заканчивается летально.

5. Возбуд холеры: материалы для исслед, правила их забора и транспорт. Ход исслед. По каким признакам идентиф холерные вибрионы?

Материалом для исслед служат испражнения, рвотные массы,жёлчь, секционный материал (фрагменты тонкой кишки и жёлчного пузыря),загрязненное испражнениями постельное и нательное бельё, вода, ил, сточные воды, гидробионты, смывы с объектов окр среды, пищ продукты. Для выявл бактерионосит исслед испражнения. Испражнения отбирают резиновыми катетерами, стеклянными трубочками с оплавленными краями или ректальными тампонами. Из объектов внеш среды чаще всего исслед воду открытых водоемов и сточные воды. При отборе и транспортировке материала необходимо соблюдать следующие правила: - материал следует доставлять в лаб не позднее 2 ч после забора, т к возбуд быстро погибает, особенно в испражнениях. При невозможности быстрой доставки материала в лаб пробы помещают в транспортные среды (1% пептонная вода с рН 8,2-8,6); - ёмкости для материала нельзя обеззараживать хим в-вами, т к возбуд чувствителен даже к следовым кол-вам дезинфектантов; - после доставки в лаб исслед материал в возможно короткие сроки высевают на пит среды.

Исслед материала проводят по схеме: I этап. Из испражнений и рвотных масс готовят мазки, высушивают на воздухе, фиксируют в смеси Никифорова и окрашивают вод р-ром фуксина или по Граму. Подвижность бактерий опред методом раздавленной капли. Исслед материал высевают в 1ую среду накопления - пептонную воду (ПВ), на щелочной МПА и на элективную среду (СЭДХ или TCBS). Посевы инкубируют при Т 37ОС. По результатам проведенных исслед выдают 1ое предварительное заключение о наличии в исслед материале вибрионов.

II этап. Через 6-8 ч инкубирования посевов в термостате производят пересев с 1ой среды накопления во 2ую среду накопления (пептонную воду). Высеваемость холерного вибриона в этом случае повышается на 10%. С 1ой среды накопления производят также пересев на плотные пит среды (щелочной МПА, среду TCBS). Из пленки на поверхности ПВ готовят мазки и препараты раздавленной капли. Пленку на ПВ исслед в р-ции агглютинации с 31 О-холерной сывороткой. Выдают 2ое заключение о природе выделенного вибриона. Подозрительные колонии с плотных пит сред пересевают на среды Ресселя или Клиглера для выделения чистых культур.

III этап. Через 12-16 ч от начала исслед производят пересев со 2ой среды накопления на щелочной МПА, повторно изучают морфологию, подвижность и агглютинабельность культуры, выросшей на 2ой среде накопления и на плотных пит средах. При «+» результатах исслед агглютинабельности колоний выдают 3е заключение о результатах исслед.

IV этап. Через 18-24 ч с начала проведения работ подозрительные колонии с плотных пит сред исслед в р-ции агглютинации с холер сыворотками (О1, О139, Инаба, Огава) и пересевают на двууглеродные среды (лактозосахарозная, глюкозолактозная, Клиглера) и щелочной агар для выделения чистой культуры и ее идентификации.

V этап. Через 24-36 ч от начала исслед отбирают подозрительные колонии и проводят идентификацию культур по морфологическим, культуральным, биохим св-вам, подвижности, агглютинации с помощью диагностических агглютинирующих сывороток О, ОR, Инаба и Огава, фаголизабельности с холерными диагностическими фагами.

VI этап. Через 36-48 ч от начала исслед учитывают результаты идентификации выделенных культур и выдают окончательный ответ о возбудителе.

Идентификация культур холер вибрионов. Культуры, выделенные на различных этапах, идентифицируют с целью определения их принадлежности к виду Vibrio cholerae соответствующей срогруппы (О1, О139 или др).

К виду V. cholerae относят грам-, аспорогенные, полиморфные палочки, слегка изогнутые или прямые, активно подвижные, с 1им полярно располож жгутиком, образующие индофенолоксидазу, ферментирующие глюкозу в аэробных и анаэробных условиях до к-ты (без газа), расщепляющие маннит, маннозу, сахарозу, но не активные в отношении к арабинозе, инозиту, салицину и некот др субстратам. Холер вибрионы декарбоксилируют лизин и орнитин, но не обладают дигидролазой аргинина, образуют индол, обладают нитратредуктазой, не продуцируют сероводород.