4. Технология получения и применения биологических препаратов (бактериальных, грибных, вирусных).

Бактериальные препараты:

Технология получения биопестицидов на основе бактерий представляет собой культивирование периодической культуры, в строго стерильных и контролируемых условиях.

Основная задача – получение максимального урожая бактерий и накопление токсина.

Основу питательной среды составляет дрожжеполисахаридная смесь и пеногаситель (кашалотовый жир).

Длительность ферментации при 28–30 °С в режиме перемешивания и аэрации (0.2 л О2/л среды⋅мин.) 35–40 ч до накопления в культуральной жидкости 5–10 % свободных спор и кристаллов от общего их количества (при титре культуры не менее 1 млрд спор в 1 мл).

Далее споры и кристаллы отделяются в процессе сепарирования и обезвоживаются.

Выход пасты при влажности 85 % и титре около 20 млрд спор/г – около 100 г/м3 культуральной жидкости. Стабилизация пасты осуществляется смешиванием ее с карбоксиметилцеллюлозой, обладающей высокой сорбционной емкостью.

Споры и кристаллы в результате стабилизации образуют трехмерную сетчатую структуру, в которую равномерно проникает консервант, обеспечивая длительную сохранность препарата.

Готовый сухой продукт содержит до 30 млрд спор/г. Товарная форма препарата – сухой порошок, а также стабилизированная паста.

Грибные препараты:

Получение грибных препаратов является достаточно сложным технологическим процессом, поскольку грибы сложно поддаются культивированию в виде периодичной культуры.

Поверхностное культивирование гриба требует больших производственных площадей и более трудоемко, поэтому имеет меньшие масштабы.

Способ реализуется в разных вариантах: на жидкой среде без соблюдения правил стерильности, аэрации и перемешивания; на твердой или жидкой среде в условиях асептики и комбинированным способом пленки.

При твердофазной ферментации с использованием сусло-агара, картофеля, зерна пшеницы или кукурузы образование конидиоспор завершается на 12–15 сутки.

На жидких средах образование спор наблюдается через 7–10 суток, а на 18– 25 сутки сформированную спороносную пленку снимают. Полученный материал высушивают, размалывают и смешивают с тальком или торфом.

Вирусные препараты:

Очень перспективные препараты поскольку обладают высокой специфичностью и практически полностью безопасны для человека и остальной экосистемы.

Производство вирусных препаратов реализуется посредством массового размножения насекомого-хозяина на искусственных средах.

На определенной стадии развития насекомое заражают, добавляя суспензию вирусов в корм.

Спустя 7–9 суток погибших гусениц собирают, высушивают и измельчают.

В измельченную массу добавляют физиологический раствор (1 мл на 1 гусеницу), взвесь фильтруют.

Осадок суспендируют в небольшом количестве физиологического раствора и заливают глицерином.

Препарат стандартизуют (титр 1 млрд. полиэдров/мл) и разливают во флаконы. Одна зрелая гусеница способна дать до 36 млрд телец-включений (которые по сути и являются вирусным препаратом), что составляет до 30 % ее массы.

Препараты готовят в виде суспензий или масляных форм. При получении сухого препарата вирусный материал смешивают с каолином; для получения масляной формы осадок смешивают с 50 % раствором глицерина до титра 2 млрд. полиэдров/г.