- ••Бактериологические исследования мяса
- ••При различных заболеваниях животных и птицы мышцы и внутренние органы нередко обсеменены микроорганизмами.
- •1.при подозрении на остропротекающие инфекционные заболевания (сибирская язва, эмфизематозный карбункул и др.);
- •11.при пироплазмидозах в случае исчезновения желтушности в течение двух суток;
- •23.при обнаружении серозных и фибринозных, перикардитов у свиней;
- •В зависимости от предполагаемого диагноза и характера патологоанатомических изменений для бактериологического исследования в
- •Пробы берут стерильными инструментами. Каждую пробу в отдельности заворачивают в пергаментную бумагу или
- •Пробы: мясо, лимфатические узлы, внутренние органы, костный мозг
- •Образцы освобождают от жировой и соединительной ткани, погружают на 2—3 мин. в спирт
- •Посев в среду обогащения производят следующим
- •Колонии, подозрительные на Вас. anthracis, отвивают на
- •Обнаружение бацилл сибирской язвы. Сущность метода выявления бацилл сибирской язвы заключается в определении
- •Рост Вас. Anthracis на кровяном МПА
- •Мазок из чистой культуры Вас. Anthracis (РИФ)
- •На МПБ сибиреязвенные бациллы растут в виде крупных хлопьев, оседающих на дно пробирки
- •Из исследуемого материала готовят взвесь на физиологическом растворе. 0,5 мл этой взвеси вводят
- •2 г исследуемого материала мелко нарезают, помещают в пробирку и заливают 10 мл
- •Для дифференциации необходимо сделать посевы на МПБ с кровью, МПЖ и исследовать культуру
- •В две пробирки с МПА, содержащими 0,5 и 0,05 ед. пенициллина, и в
- •Для постановки этого теста применяют фаг «Гамма МВА». Исследуемую культуру высевают в 3
- •Свертываемость желтка куриного яйца определяют следующим образом. Исследуемую культуру высевают в пробирку со
- •Наличие в чашках с МПА прозрачных колоний обусловливает необходимость проведения исследований на присутствие
- •Если в мазках, приготовленных из мелких прозрачных колоний, обнаруживают коккообразные грамотрицательные палочки, расположенные
- •Показатели
- •Наличие на чашках с МПА мелких прозрачных или слегка мутноватых колоний, образующих иногда
- •На дифференциально-диагностических средах (Эндо, Левина) учитывают подозрительные колонии, характерные для сальмонелл. В случае
- •Сначала культуру испытывают в реакции агглютинации с одной из О- сывороток. Выбирают сыворотку,
- •На предметное стекло из ампулы наносят каплю неразведенной сыворотки. Затем платиновой петлей берут
- •В случае отрицательной реакции агглютинации, но при характерном росте на элективной среде и
- •Для идентификации сальмонеллезных культур предлагается использовать О-фаготест — определение фагочувствительности сальмонелл к О-бактериофагу.
- •Сущность метода заключается в изучении морфологических, культуральных, ферментативных свойств этих бактерий.
- •Сущность выявления анаэробов заключается в определении их морфологии, способности расти на питательных средах
- •Диагноз на анаэробные инфекции ставят на основании бактериоскопии, посева материала на питательные среды
- •Cl. perfringens — короткая, спорообразующая, неподвижная, грамположительная палочка, анаэроб. Существуют 6 типов Cl.
- •При подозрении на Cl. botulinum для выявления типа Е пробирки — одну непрогретую
- •Аналогичный эксперимент можно провести с 6—7-месячной культурой, выращенной на печеночном бульоне. Пастеровской пипеткой
- •Вид возбудителя
- •Вид возбудителя
- •Вид возбудителя
- •Микобактерии — это микроорганизмы, обладающие способностью при культивировании на питательных средах образовывать длинные
- •Влаборатории из присланного материала (кусочки печени, селезенки, легких
- •Для получения культур микобактерий туберкулеза материал перед посевом обрабатывают по методу Л, П.
Колонии, подозрительные на Вас. anthracis, отвивают на
поверхность скошенного МПА и МПБ для получения чистой культуры, которую используют в дальнейшем для определения видовой принадлежности выделенного микроба. Для этого производят высев на цветной ряд, состоящий из следующих сред: МПБ, МПА, МПЖ, молока, агара или бульона с кровью, ставят биологическую пробу на опытных животных, реакцию преципитации.
Обнаружение бацилл сибирской язвы. Сущность метода выявления бацилл сибирской язвы заключается в определении их характерной морфологии и характера роста на питательных средах, а также изучение патогенности заражением лабораторных животных (белых мышей).
Бациллы сибирской язвы неподвижны, в организме образуют капсулы, а во внешней среде при доступе кислорода и температуре 12— 42 °С — споры. При микроскопии мазков из патологического материала обнаруживают крупные грамположительные палочки, соединенные в короткие цепочки, а иногда цепочки имеют форму бамбуковой трости.
При окраске 2 %-ным раствором сафранина сибиреязвенные бациллы окрашиваются в кирпично-красный цвет, а капсулы и теки (следы распада бактерий) — в светло-желтый.
При окраске раствором Ребигера бациллы антракса окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, а капсулы — в красно-фиолетовый.
На МПА через 16—24 ч бациллы растут в виде серо-белых, шероховатых с бахромчатыми краями колоний, напоминающих при осмотре с лупой «головку медузы» Или «львиную гриву». Из подозрительной колонии делают посев в пробирку с МПБ.
Рост Вас. Anthracis на кровяном МПА
Мазок из чистой культуры Вас. Anthracis (РИФ)
Споры Вас. Anthracis, окраска по Ауеске
На МПБ сибиреязвенные бациллы растут в виде крупных хлопьев, оседающих на дно пробирки к концу первых суток, с образованием осадка, напоминающего комок ваты. Бульон остается прозрачным. Из бульонной культуры готовят препарат «раздавленная» или «висячая» капля. При микроскопии препарата под средним увеличением микроскопа обнаруживают неподвижные сибиреязвенные палочки.
Иногда возникает необходимость дифференцировать сибиреязвенные бациллы от сапрофитных бацилл, которые морфологически очень сходны. В этом случае чистую культуру, выросшую на МПА или МПБ, исследуют: на капсулообразование in vitro, на гемолитическую активность, на тест «жемчужное ожерелье», на чувствительность к сибиреязвенному фагу или на свертываемость желтка куриного яйца.
Для возбудителя сибирской язвы в отличие от сапрофитных бацилл характерно отсутствие гемолиза как вокруг колоний на МПА, так и в МПБ с кровью.
Из исследуемого материала готовят взвесь на физиологическом растворе. 0,5 мл этой взвеси вводят двум белым мышам подкожно в область спины. При исследовании материала от свиней (подчелюстные лимфатические узлы) опытных животных заражают молодой (16-часового роста) чистой культурой. После гибели мышей, которая наступает через 24—72 ч., их вскрывают; из крови сердца, печени, селезенки и места заражения готовят мазки и производят посевы на питательные среды (МПА, МПБ). Одновременно с бактериоскопией исходного материала в сомнительных случаях проводят реакцию преципитации (РП).
2 г исследуемого материала мелко нарезают, помещают в пробирку и заливают 10 мл карболинизированного 0,5%-ного физиологического раствора. Если исследуют свежий материал, то его предварительно выдерживают в термостате при 37°С в течение 18—24 ч. Полученный экстракт кипятят 30—40 мин. и фильтруют через асбестовую нейтральную вату до полной прозрачности. Прозрачный экстракт в количестве 0,25—0,3 мл вносят в узкую пробирку и под него подслаивают такое же количество преципитирующей сибиреязвенной сыворотки, профильтрованной через бумажный фильтр. В случае положительной реакции через 3—8 мин. на границе сыворотки и экстракта появляется преципитирующее кольцо; при сомнительной реакции оно появляется через 10—15 мин.; при отрицательной— кольцо отсутствует. При проведении РП контролем служат стандартный сибиреязвенный антиген и стандартная сибиреязвенная сыворотка, нормальная сыворотка с исследуемым экстрактом, преципитирующая сыворотка с физиологическим раствором. В первой контрольной пробирке должно образоваться кольцо, а в двух других — нет, т. е. реакция отрицательная.
Основанием для постановки диагноза на сибирскую язву являются наличие капсул в мазках из органов, а в мазках из культуры — грамположительных палочек, расположенных в виде цепочек; концы палочек, обращенные друг к другу, резко обрублены; характерный рост на МПА, МПБ, МПЖ; положительная РП и положительный результат биологической пробы.
При бактериологическом исследовании на сибирскую язву, особенно несвежего материала, часто обнаруживают большое количество посторонней микрофлоры. В этом случае трудно дифференцировать Вас. anthracis от антракоидов, псевдоантраксных палочек и других спорообразующих сапрофитных аэробов, положительно красящихся по Граму и имеющим колонии, сходные с колониями сибиреязвенного микроба.
Для дифференциации необходимо сделать посевы на МПБ с кровью, МПЖ и исследовать культуру микроорганизма на подвижность. Для ускоренной дифференциальной диагностики возбудителя сибирской язвы и сходных с ним почвенных аэробных бацилл рекомендуется использовать следующие тесты: феномен «жемчужное ожерелье», чувствительность к сибиреязвенному бактериофагу, свертываемость желтка куриного яйца, гемолитическую активность, феномен капсулообразования.