Возбудитель кампилобактериоза
.doc
Кампилобактериоз - острая инфекционная болезнь зоонозной природы, вызываемая патогенными микроорганизмами рода Саmpylobacteг, характеризующаяся различной степенью тяжести и полиморфностью проявлений.
Информация о кампилобактериозе начинается сообщением английских микробиологов Мак-Фадиана и Штокмана, обнаруживших в 1913 г. вибрион в плодах, в матке овец. В последующем возбудитель от овец был изолирован в США (1924). Германии (1927), Испании (1956) и в других странах. Возбудитель кампилобактериоза крупного рогатого скота открыт в 1918 г. Смитом. Первые сведения о возбудителе кампилобактериоза у коров в стране принадлежат В.А.Якимову (1926), позже - Е.В. Козловскому (1958). Большой вклад в изучение данной проблемы внесли П.А.Трилевко, П.А. Волосков, Н.Н.Михайлов, М.А. Лучко, А.В.Голиков и др.
Возбудители кампилобактериоза.
Рисунок 1. Типичная форма кампилобактеров: S-образная (а) и спиралевидная (б) |
В настоящее время род Campylobacter насчитывает более 14 видов и подвидов (табл. 1), выделенных от животных и человека, и это число постоянно растет, уточняются потенциальные возможности этих микроорганизмов в этиологии и патогенезе заболевания у человека. Наибольшее значение на сегодня имеют C.jejuni, C.coli, C.laridis, C.fetus. Последний, однако, чаще поражает ослабленных интеркуррентными заболеваниями людей с развитием гематогенно-диссеминированных форм заболевания. Большинство случаев кампилобактериоза, протекающих как диарейное заболевание, вызывается C.jejuny и C.coli.
Носителями кампилобактеров являются различные виды домашних и диких животных, а также птица. Из организма млекопитающих выделение вибрионов в окружающую среду происходит с молоком, истечениями из половых органов, спермой, абортированным плодом, плацентой, фекалиями. Распространение возбудителя осуществляется через корм, подстилку, волу, продукцию животноводства. Отмечено, что обильная контаминация мясных туш наблюдается в случае надреза кишечника, когда содержимое попадает на органы и ткани убитого животного. Табл. 1. Виды кампилобактеров, выделенных от людей и животных.
Виды |
Источники выделения |
Формы патологии |
C. fetus subsp.fetus |
Крупный рогатый скот, овцы, свиньи, птица |
У жвачных животных аборты, эндометриты |
C. hyointestinalis |
Овцы |
Аборты |
C. jejuni |
Различные виды животных, птица, человек |
Энтериты |
C. coli |
Различные виды животных, птица, человек |
Энтериты |
C. laridis |
Чайки, собаки, человек |
Энтериты |
C. pyloridis |
Человек, некоторые виды животных |
Возможно участие в этиологии язвенной болезни |
C. cinaedi |
Различные виды животных |
- |
C. fennelliae |
Различные виды животных |
- |
C. fecalis |
Различные виды животных |
- |
C. consisus |
Различные виды животных |
- |
C. sputorium subsp.sputorum |
Крупный рогатый скот, овцы |
Непатогенный |
Наибольшую эпидемическую опасность представляют птицы (ку-
ры), домашние и сельскохозяйственные животные, контакт с которыми
у человека наиболее велик, причем в наивысшей степени опасны особи,
у которых инфекция протекает в форме бактерионосительства без ви-
димых клинических проявлений. Активное носительство кампилобактера отмечено у чаек (20-70%), ворон (90%), голубей (20-40%), гусей (10-6О%), грачей (45-83%). Человек при определенных условиях
(больной или бактерионоситель) может явиться источником возбудите-
лей инфекции.
Кампилобактеры - это грамотрицательные микроорганизмы, спор не образуют, полярно снабжены одним или двумя жгутиками, обладают энергичным винтообразным движением. Форма их спиралевидная, изогнутая. При соединении двух клеток образование напоминает - образную форму или вид летящей чайки. Длина клеток - 0,5-8 мкм, ширина - 0,2-0,5 мкм. В старых культурах возможно появление кокковидных клеток микроба. Кампилобактеры относятся к микроаэрофилам. Для их инкубирования необходимо присутствие СО2, температура 37,5°С. С целью получения культур возбудителя используют полужидкие и твердые питательные среды. Термофильные кампилобактеры растут при температуре 37-43°С. Оптимальная температура 42-43°С. Желаемую репродукцию этих микробов получают в газовой смеси, состоящей из 5% кислорода, 10% СО2 и 85%азота. Микроорганизмы, вызывающие кампилобактериоз, биохимически мало активны: выделяют каталазу, редуцируют нитраты, слабо образуют сероводород, не растут в МПБ с содержанием 3,5%. Для получения культуры возбудителя фетус венералис или фетус интестиналис используют полужидкий 0,15-0,2%-ный мясо-печеночный пептонный агар (ПЖА), сафранино-железо-новобиоциновую среду (СЖН), 2-3%-ный мясо-печеночный пептонный агар (ЖПА), среду Китта-Тароцци, агар Мартена и др. При этом в питательные среды добавляют 5-10% дифибринированной крови крупного рогатого скота, овец, кроликов или сыворотку крови лошади, аминопептид-2 (5-10%), экстракт сухих дрожжей (5 г на 1 л среды), тиогликолят натрия (0,5 на 1 л среды). Рост культуры на ПЖА отмечается над поверхностью среды в виде серовато-голубоватого диска толщиной 1-4 мм. На плотной среде появляются мелкоросинчатые колонии, видимые через лупу. На СЕН рост кампилобактеров не сопровождается изменением цвета среды (розовый). В присутствии развития посторонней микрофлоры среда приобретает ярко-желтую окраску. В этих случаях проводят очистку культуры от посторонней микрофлоры. Процедуру выполняют различными методами: а) заражают беременных свинок, которые абортируют. Из абортированных плодов делают посевы. Если аборт не наступает, то их через 10-12 дн. убивают, из эмбрионов и полости матки делают посевы; б) производят рассев загрязненной культуры в чашки Петри с последующим отсевом характерных колоний в пробирки на ПЖА; в) культуры вносят в пастеровские пипетки под слой ПЖА; г) смешанные культуры пропускают через мембранные фильтры. Более сложным делом является изоляция термофильных кампилобактеров: C.jejuni, C.coli, C.laridis. Для их выделения пригоден ПЖА с добавлением 7% аминопептида-2 и 0,05% тиогликолата натрия. Пробирки, чашки Петри помешают в эксикатор или в микроанаэростат, воздушный микробассейн которых наполняется газовой смесью, состоящей из 5% кислорода, 10% углекислого газа и 85% азота. Культивирование ведется в термостате при температуре 43°С. Кампилобактеры этих видов, в отличие от микробов группы фетус, имеют длину от I до 3 мкм, толщину - 0,5-1 мкм. Микробные клетки имеют вид точильного камня - они более широкие в средине и сужены в концах. На твердых питательных средах патоген образует более мелкие колонии (0,1-0,3 мл), блестящие, без - форм. Отличительной особенностью этих кампилобактеров является и то, что они не растут при температуре 25°С, гидролизуют натриевую соль гипуровой кис лоты. Биохимическая активность различных видов кампилобактеров слабо выражена. Вместе с тем, некоторые показатели этой активности используют для дифференциации возбудителей рода Кампилобактер (табл. 3).
Табл. 3. Идентификация кампилобактеров по биохимическим свойствам(по Берги,1980)
|
Каталаза |
Воссановление нитрата |
Н2 |
1% глицина |
3,5% глицина |
Рост при 25°С |
C. fetus subsp. fetus |
+ |
- |
- |
- |
- |
+ |
C. fetus subsp. hyointestinalis |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
C. jejuni |
+ |
- |
+ |
+ |
- |
- |
C. sputorium |
- |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
C. bubulus |
- |
+ |
+ |
+ |
+ |
-/+ |
C. fecalis |
+ |
? |
+ |
+ |
-/+ |
- |
Возбудители кампилобактериозов малоустойчивы во внешней
среде и в пищевых продуктах. Все используемые в пищевой промыш-
ленности и животноводстве дезинфектанты обеспечивают гибель воз-
будителей кампилобактериоза в течение 5 минут.
Патогенность различных видов вибрионов различна. Кампилобактеры, вызывающие патологию у крупного рогатого скота и овец, обладают антигенными особенностями и вирулентностью. В патогенном отношении представляют интерес Термофильные вибрионы группы Jejuni:C.jejuni, C.coli, C.laridis , которые вызывают кишечную патологию. Названные микроорганизмы способны к инвазивности, продуцируют цитолитические токсины. Антигенная структура кампилобактеров изучена недостаточно. Однако результаты исследований многих авторов свидетельствуют о наличии серовариантов микроба в пределах вида. К настоящему времени идентифицировано 34 серотипа термофильных вибрионов. В целях диагностики кампилобактериоза животных применя-
ют клинико-эпизоотологический, серологический и бактериологичес-
кий методы.
Серологический метод диагностики на кампилобактериоз
включает в себя реакцию агглютинации с влагалищной слизью (РАВС)
и люминесцентную микроскопию мазков. РАВС применяют только при
диагностике кампилобактериоза крупного рогатого скота, а люминес-
центную микроскопию мазков у крупного рогатого скота и овец. Дан-
ный метод является ориентировочным.
Готовят мазки, которые после фиксации, окрашивают по Граму или фуксином Циля в течение 1-2 мин. Раствор фуксина предварительно 1:5 разбавляют дистиллированной водой. В окрашенных препаратах в положительных случаях обнаруживают грамотрицательные микробные клетки, имеющие форму удлиненных спирилл, мелких кокков, летящих чаек, запятой. При окраске по методу Романовского-Гамзы в терминальных участках микробной клетки выявляется зернистость. Мазки можно исследовать с помощью метода иммунофлуоресценции (РИФ). Культуры возбудителя, кроме этого, исследуют в висячей или раздавленной капле на подвижность.
Кампилобактериоз отдельных видов животных Среди животных кампилобактериоз передается половым, али-
ментарным и контактным путем.
Основными факторами передачи возбудителя кампилобактериоза
людям являются продукты животного происхождения - мясо, птица
(куры), сырое молоко, а также контаминированная вода.
Крупный рогатый скот. Кампилобактериоз крупного рогатого скота вызывается двумя видами Саmpylobacteг.
Вид - Саmpylobacteг fetus.
Подвиды:
- lа - Саmpylobacteг fetus subspecies fetus (c.f.s.fetus);
- 1б - Саmpylobacteг fetus subspecies venerealis (С.f.s.venerealis).
Вид - Саmpylobacteг jejuni.
Патология характеризуется комплексным поражением органов размножения, в процесс вовлекаются слизистые оболочки влагалища, матки, яйцеводов и яичники. Плодоношение нередко на 4-7 мес. стельности прерывается абортом. Динамика развития воспалительного процесса продолжается 4-5 мес. В этот период на ранней стадии развития возможна гибель плода, которая просматривается и о ней можно говорить по течке, наступающей в отдаленные сроки. Информация о возрасте абортированных плодов представляется различной. По учтенным данным они могут быть обнаружены на 38, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 дни после зачатия Максимальное количество абортов однако происходит в первый месяц, а затем с 5 по 8 мес. стельности. Течение инфекционного процесса после аборта сопровождается удлинением фазы полового покоя. Нарушается ритм полового цикла. На зачатие требуется от 3 до 6 и более осеменений. Отдельные коровы перегуливают 4-6 мес. У инфицированных коров и телок развивается катаральный, катарально-узелковый вагинит. После аборта заметна острая гиперемия слизистой оболочки влагалища, кровянисто-слизистые выделения. Вибриозный выкидыш, как правило, сопровождается задержанием последа, эндометритом. Абортированные плоды, плацента не имеют характерных признаков. У плодов до трех месячного возраста наблюдают гиперемию, кровоизлияния, отечность. Такие же показатели остаются и в последующем, но локализуются в ограниченных участках. Для плодов старших возрастов свойственно накопление жидкости в полостях организма. У быков, больных кампилобактериозом отмечают гиперемию слизистой оболочки препуция и полового члена, обильное выделение слизи в течение 2-3 дней после заражения. В дальнейшем перечисленные признаки исчезают, процесс протекает бессимптомно в виде бактерионосительства. Овцы. Кампилобактериоз овец вызывается Саmpylobacteг fetus subspecies fetus
Саmpylobacteг jejuni.
У овец показателем на кампилобактериоз является аборт, мертворождаемость. Наступлению аборта предшествует угнетение, снижение или прекращение позыва к приему корма. В последующем становится заметным беспокойство, отечность срамных губ. После аборта повышается температура тела до 41,2-41,4°С. Изгнание плода нередко сопровождается задержкой последа, выделениями коричневатой жидкости. Инкубационный период при экспериментальном заражении длится 7-25 дней. Аборты происходят в разные сроки суягности, что зависит от времени алиментарного заражения. Абортированные плоды обычно содержат повышенное количество жидкости в грудной и брюшной полостях, в желудке - коричневатая слизь с примесью крови, паренхиматозные органы с кровоизлияниями. Свиньи. Кампилобактериоз свиней мало изученное заболевание. Проявление инфекции также сопровождается абортами, мертворождаемостью. При этом в отдельных популяциях свиней аборты могут достигать 65,8-68,6% к числу опоросившихся свиноматок. Полагают, что инфицирование свиней гложет происходить через сперму хряка, алиментарно. Видимо в эпизоотическом процессе определенную роль играют крысы, выделенные кампилобактеры от которых имели сходство с возбудителем, изолированным от больных свиноматок. Аборты наступают без предшественников в последний месяц супоросности. После аборта у свиноматок развивается катаральный вагинит. Птицы. Кампилобактериоз птиц - Саmpylobacteг jejuni.
Кампилобактериоз сопровождается гибелью цыплят, снижением привеса живой массы у бройлеров и яйценоскости кур. Возбудителем болезни является кампилобактер йеюни. У больных птиц, кроме общих симптомов, диагностируются признаки гепатоэнтерита. На вскрытии трупов обнаруживают катаральное воспаление слизистой оболочки кишечника, некротические фокусы в печени, истощение. Норки. В эпизоотический процесс вовлекаются также норки. Болезнь проявляется абортами, мертворождением. У щенят норок поражаются органы пищеварения, значительная часть щенят гибнет.
Лечение. Для лечения больных быков применяют пеницеллин и стрептомицин по I мл ЕД, антибиотики эмульгируют в 50-60 мл растительного масла или рыбьего жира. Препараты вводят в препуциальннй мешок после его обработки антисептическими растворами. Одновременно с этим указанные антибиотики в дозе по 4 тыс. ЕД на кг массы животного на 0,5% растворе новокаина 2 раза в сутки инъецируют внутримышечно. После четырехдневного лечения делают перерыв за 5-6 дней. Затем курс терапии повторяют: дважды в сутки внутримышечно вводят окситетрациклин по 5 тыс. ЕД/кг массы животного. Препуций обрабатывают 5%-ной эмульсией фуразолидона. Через месяц после лечебных процедур сперму быка трижды с интервалом в 10 дней подвергают бактериологическому исследованию на кампилобактериоз. При отрицательных результатах исследования быков признают здоровыми. Коров лечат также пенициллином и стрептомицином. Антибиотики по 1 млн ЕД вводят в полость матки в течение 4 дней. Кроме этого инъекцируют внутримышечно стрептомицин по 4 тыс. ЕД на кг массы в сутки. Влагалище орошают раствором фурациллина или риванола. Важным обстоятельством обеспечивающим эффективность лечения, является определение чувствительности кампилобактеров к препаратам. Из приведенных выше данных в этих це лях с наилучшим успехом могут быть использованы ампициллин, стрептомицин, канамицин, левомицетин, мицерин, мономицин, окситетрациклин, пентриксил, теллуристокислый калий, тетрациклин, тиомерсал, фуразолидон, хлортетрациклин, дигидрострептомицин с ампициллином, окситетрациклин с олеандомицином или с фуразолидоном. Иммунитет. Стойкий иммунитет после переболевания наблюдается у овец. Такие овцы повторно заболевают весьма редко. У крупного рогатого скота, перенёсшего заболевание, иммунитет менее стойкий. Информативные данные относительно иммунитета у этого вида животных, по данным исследователей, противоречивы. Если при кампилобактериозе овец сложилось твердое убеждение, касающееся напряженного и продолжительного иммунитета после спонтанного заражения, что нельзя сказать о патологии у крупного рогатого скота.
Литература.
http://vetfac.narod.ru/index.html
http://www.mcxpx.ru/base_gvc/vetzac/document/3.html
(«Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных». Санитарные правила СП 3.1. 087-96 Ветеринарные правила ВП 13.4 1307-96.)
http://www.medlinks.ru/article.php?sid=15099
и биотехнологий им. К. И. Скрябина, г. Москва, Россия.
ТЕМА:
Возбудитель кампилобактериоза.
выполнил:
Качурин Егор
ВБФ 3 группа №2