- •5.7.3. Розчин фурациліну готують на киплячій воді за нижче
- •6.3. Для зберігання замороженої сперми на пунктах штучного
- •6.4. Розміщення обладнання в лабораторії. Посудину Дьюара зі
- •8.2. Рухливість сперміїв визначають під мікроскопом таким
- •8.3. Живучість сперміїв визначається проміжком часу,
- •11.2.2. При використанні сперми, розфасованої в пайєти,
- •11.2.3. Для використання пайєт різних об'ємів (максі - 0,5 мл
- •11.2.4. Для осіменіння корів і телиць розмороженою спермою у
- •11.2.5. Для осіменіння корів спермою, розфасованою в
- •11.2.6. При використанні сперми, замороженої в облицьованих
- •11.4. Візо-цервікальний спосіб осіменіння.
- •70 Град.Ний розчин спирту. Цими розчинами промивають
- •14.2.2. Стенд фізіологічного стану корів виготовляють з
8.2. Рухливість сперміїв визначають під мікроскопом таким
чином. Декілька предметних скелець кладуть на електронагрівальний
столик мікроскопа, температура на столику повинна бути 38-40 град.
C. Скляною стерильною паличкою на підігріте предметне скельце
наносять краплю розмороженої сперми середнього об'єму, накривають
покривним скельцем, під яким не повинно бути пухирців повітря, а
крапля не повинна випливати за межі покривного скельця.
Мікроскопію сперми проводять під збільшенням від 120 до 200 разів.
Після розморожування кожну гранулу досліджують на рухливість
сперміїв під мікроскопом за 10-бальною шкалою.
При цьому сперму в облицьованих гранулах оцінюють за
допомогою спеціального приладу без дегерметизації крізь прозору
плівку стінки гранули. Сперма розфасована у формі пайєт
(соломинок), оцінюється за рухливістю під мікроскопом вибірково:
зразу при завозі і 1-2 рази на протязі використання завезеної
партії. Для визначення рухливості розмороженої сперми в пайєтах
(соломинках) крапельку сперми наносять поряд з крапелькою 3%-ного
розчину натрію цитрату на предметне скло. Краплі змішують і
визначають рухливість.
8.3. Живучість сперміїв визначається проміжком часу,
вираженим у годинах, протягом якого вони зберігають ППР у процесі
їх інкубування при температурі +38 град. C. Його визначають за
показником рухливості сперматозоїдів безпосередньо після
розморожування сперми і через кожну годину її інкубування у
водяному термостаті з температурою +38 (+-) 0,5 град. C, у якому
розміщують біотермостат з розмороженою спермою. Придатною для
використання є сперма з рухливістю сперматозоїдів після
розморожування не менше 4 балів, а після 5-годинного інкубування -
не нижче 0,5 бала. При відсутності спеціального термостату його
доставляють з племпідприємства.
9. Відбір корів і телиць для осіменіння
9.1. Відбір самок для штучного осіменіння потрібно проводити
з урахуванням ознак стадії збудження статевого циклу (тічка,
загальне збудження, статева охота і овуляція).
9.1.1. Тічка - це комплекс змін, що проходить у статевих
органах самки (гіперемія і набряк, посилення скорочень м'язів
матки і функції залоз, розкриття шийки матки, витікання слизу,
зміна епітелію слизової оболонки статевих органів). Тривалість
тічки 2-4 доби. Тічка починається раніше на 12-24 години від
загального збудження і охоти. Найбільш характерна клінічна ознака
тічки - виділення слизу із матки в піхву і назовні.
9.1.2. Статеве збудження характеризується змінами в поведінці
самки у вигляді загального неспокою, зменшення апетиту, зниження
надоїв, потягу до інших тварин та дозволу стрибати на себе. Воно
виникає через 24-36 годин після початку тічки.
9.1.3. Статева охота (далі - охота) - це такий стан організму
самки, коли найкраще проявляються безумовні статеві рефлекси і
готовність до спаровування або позитивна реакція самки на самця.
Основна ознака охоти - рефлекс нерухомості. Тварина стоїть
спокійно, коли на неї стрибають інші тварини. Охота в корів і
телиць триває в більшості випадків 12-18 годин. За часом вона
відповідає середині та кінцю тічки.
9.1.4. Овуляція - складний фізіологічний процес виділення
яйцеклітини із зрілого фолікула яєчника. Вона проходить через
10-15 годин після закінчення охоти. При недоліках годівлі,
утримання тварин та деяких захворюваннях (гіпофункція яєчників)
вона може не відбуватися (ановуляторний цикл).
9.2. Існує декілька способів виявлення корів і телиць в
охоті, але найбільш поширеними є візуально-клінічний та
рефлексологічний способи.
9.2.1. Візуально-клінічний спосіб грунтується на виявленні
змін поведінки самки і безпосередньому огляді корів чи телиць та
їх статевих органів. Тварину в охоті виявляють за загальним
збудженням і рефлексом нерухомості під час перебування на пасовищі
чи вигульному майданчику не менше 3-4 разів на добу. При
клінічному огляді самок виявляють характерні ознаки тічки, а при
ректальному дослідженні статевих органів - тонус матки, стан
яєчників тощо.
9.2.2. При рефлексологічному способі використовують
бугаїв-пробників або бугаїв-маркерів після їх спеціальної
підготовки. Пробників утримують разом із самками вранці та ввечері
протягом 2 годин, які є одночасно стимуляторами статевої функції
самок. На 150-200 корів потрібно мати одного пробника. Тварину з
ознаками охоти і тічки відокремлюють із стада для осіменіння.
9.2.3. Охоту можна визначити за допомогою детекторів (ампула
з кольоровою рідиною), які приклеюють до шкіри крижів самки. При
стрибках тварин на самку в охоті ампула розривається і забарвлює
її крижі.
9.2.4. Для визначення корів в охоті можна використовувати
андрогенізованих корів або тварин з фолікулярними кістами,
електрометричні прилади та ін.
10. Визначення оптимального часу та кратність осіменіння
корів і телиць
10.1. Корів і телиць осіменяють двічі в одну охоту: перший
раз після виявлення тварин в охоті та другий - через 10-12 годин
при її наявності. Корів осіменяють перед доїнням або через 2-3
години після нього.
10.2. При визначенні охоти рефлексологічним способом або за
стадією розвитку фолікула висококваліфікованим техніком
проводиться одноразове осіменіння через 8-12 годин від початку
охоти за принципом "ранок-вечір" або "вечір-ранок". При
продовженні охоти корову осіменяють повторно.
10.3. Оптимальний час осіменіння самок визначають за ступенем
розвитку фолікула. На початку охоти він злегка виступає над
поверхнею яєчника, твердуватий на дотик і збільшений в діаметрі до
0,5-1 см. Під кінець охоти фолікул збільшується в діаметрі до
1,5-2 см і при пальпації його відчувають у вигляді міхурця з
переливанням фолікулярної рідини, що свідчить про зрілість
фолікула і оптимальний час осіменіння корів і телиць. При
дослідженні яєчників потрібно виявляти обережність, щоб не
пошкодити яйценосний бугорок і цілісність міхурця.
11. Способи штучного осіменіння корів і телиць
11.1. Штучно осіменяють тільки клінічно здорових корів і
телиць при наявності ознак охоти і тічки ректо-цервікальним,
візоабо мано-цервікальним способом.
Ректо-цервікальним способом дозволяється осіменяти корів і
телиць безпосередньо у місцях їх утримання.
Візо-цервікальним і мано-цервікальним способами проводять
штучне осіменіння тільки в умовах манежу пункту у фіксаційному
станку.
Використовують такі комплекти інструментів для різних
способів штучного осіменіння з використанням певних форм
розфасовки замороженої сперми.
------------------------------------------------------------------
| Ректо-цервікальний | Мано-цервікальний | Візо- |
| | | цервікальний |
|----------------------------------------------------------------|
| Гранули не облицьовані |
|----------------------------------------------------------------|
|Катетер | Катетер | Шприц-катетер |
|полістироловий довгий| поліетиленовий | скляний |
| | короткий | |
|---------------------+----------------------+-------------------|
|Ампула поліетиленова| Ампула поліетиленова | Дзеркало |
|(гумова) | | вагінальне |
|---------------------+----------------------+-------------------|
|Рукавиця | Рукавиця | |
|поліетиленова довга | поліетиленова коротка| |
|----------------------------------------------------------------|
| Гранули облицьовані |
|----------------------------------------------------------------|
|Здовжувач металевий | Зоошприц | |
| | поліетиленовий | |
|---------------------+----------------------+-------------------|
|Циліндр зоошприца| ОСХАР-1 - 100мм | |
|поліетиленовий | | |
|---------------------+----------------------+-------------------|
|Чохол поліетиленовий | ______ | ______ |
|---------------------+----------------------+-------------------|
|Рукавиця | Рукавиця | |
|поліетиленова довга | поліетиленова коротка| |
|----------------------------------------------------------------|
| Пайєти (соломинки) |
|----------------------------------------------------------------|
|Пайєтоввід | | |
|(французький, | ______ | |
|німецький, канадський| | |
|та інші) | | |
|---------------------+----------------------+-------------------|
|Чохол пропіленовий | ______ | ______ |
|---------------------+----------------------+-------------------|
|Рукавиця | | |
|поліетиленова довга | | |
------------------------------------------------------------------
Перед осіменінням корів і телиць піддають
клініко-гінекологічному дослідженню для визначення фізіологічного
стану їх статевих органів і вирішення питання про спосіб і
кратність осіменіння.
11.2. Ректо-цервікальний спосіб осіменіння
11.2.1. Перед осіменінням корів і телиць ректоцервікальним
способом з використанням заморожено-відтанутої сперми у формі
необлицьованих гранул технік бере пакет з ампулами, кут якого
знезаражує спиртово-ватним тампоном, надрізає і виштовхує шийку
ампули, знезараженими ножицями зрізує конус шийки ампули. Таким
саме чином бере пакет з довгими полістироловими катетерами,
знезаражує кут, надрізає стерильними ножицями і виштовхує не
більше ніж на 2 см кінець катетера, після цього приєднує до
ампули, набирає розморожену сперму в катетер, а не в ампулу.
У залежності від навику роботи технік одягає довгу рукавицю
на ліву або праву руку. Після санітарної обробки корови великим і
вказівним пальцями розкриває статеву щілину і катетер вводить
знизу вверх під кутом 30-45 град. по верхній стінці всередині
піхви приблизно до половини його довжини. Потім вільно змінює
напрямок просування з таким розрахунком, щоб він пройшов до шийки
матки. Після цього руку вводять в пряму кишку. Рукавицю перед
уведенням зволожують теплою мильною водою або змащують вазеліном.
Маніпуляції рукою в прямій кишці можна проводити тільки після
випорожнення її від калових мас.
Перед уведенням катетера в шийку матки слід дослідити стан
статевого апарату корови, яєчників, наявність в них фолікула.
Після цього технік фіксує шийку матки, відшукує піхвову частину
каналу шийки матки і вводить катетер під контролем пальця в канал.
Шийку матки фіксують різними способами:
а) підводять кисть руки під шийку матки і мізинцем відшукують
канал шийки матки;
б) можна покласти кисть руки на шийку матки, при цьому канал
шийки матки контролюють великим пальцем;
в) фіксують шийку матки двома пальцями (вказівним і
середнім), а канал шийки матки відшукують (контролюють) великим
пальцем. Зразу після цього підводять катетер до розетки шийки
матки під контролем пальця. Треба впевнитись, що катетер у шийці
матки, для цього необхідно подати шийку матки в один бік, катетер
у протилежний, і якщо вони не роз'єднуються, то катетер
знаходиться в каналі шийки.
Технік направляє шийку матки на катетер таким чином, щоб
останній пройшов весь канал і вийшов у тіло матки. У цьому місці
кінець катетера легко прощупується пальцем на глибині 6-8 см.
Після цього ампулу здавлюють і сперма виливається з катетера
завдяки повітряній пробці ампули. Виймають катетер із здавленою
ампулою між пальцями, а руку з прямої кишки.
При гіпотонії матки проводять її масаж перед уведенням
сперми.
Одноразовий інструмент і рукавицю після використання
знищують.