- •Модуль 2 общие закономерности обмена веществ занятие 1
- •Общие правила
- •Работа с кислотами, щелочами и прочими сильнодействующими реактивами
- •Работа с открытым пламенем
- •Работа с электронагревательными приборами
- •Литература
- •Занятие 2
- •11. Классификация и номенклатура ферментов. Характеристика типов химических реакций, лежащих в основе классификации ферментов.
- •Определение ферментов в биологических объектах. Изучение влияния температуры и рН среды на активность ферментов.
- •Литература
- •Занятие 3
- •Литература
- •Занятие 4
- •Занятие 5
- •Литература
- •Занятие 6
- •Количество аскорбиновой кислоты в мкмоль/сутки
- •Литература
- •Занятие 7
- •Расщепление гидроген пероксида каталазой крови. Определение каталазного числа крови.
- •Литература
- •Занятие 8
- •Литература
- •Занятие 9
- •Перечень вопросов к итоговому модульному контролю № 2
- •Литература
- •Занятие 2
- •Литература
- •Занятие 3
- •15. Аспирин оказывает противовоспалительное действие, так как подавляет активность циклооксигеназы. Уровень каких биологически активных веществ снижается при этом?
- •Литература
- •Занятие 4
- •Задания для самостоятельной работы
- •А. Окисление. В. Восстанавление. С. Аминирование.
- •Литература
- •Занятие 5
- •Литература
- •Занятие 6
- •Литература
- •Занятие 7
- •Качественные реакции на желчные кислоты
- •Литература
- •Занятие 8
- •Количественное определение лпнп и лпонп, общих липидов в сыворотке крови
- •Литература
- •Занятие 9
- •Качественные реакции на кетоновые тела в моче
- •Литература
- •Занятие 10
- •Определение концентрации холестерола в сыворотке крови ферментативно по набору реактивов
- •Литература
- •Занятие 11
- •Перечень вопросов к итоговому модульному контролю № 3
Расщепление гидроген пероксида каталазой крови. Определение каталазного числа крови.
Задание 1. Выявить действие каталазы.
Ход работы. В пробирку наливают 10-15 капель 3% раствора Н2О2 и прибавляют 1 каплю крови. Происходит бурное выделение кислорода: жидкость пенится, пена заполняет всю пробирку.
Задание 2. Определить каталазное число крови.
Принцип. Метод основан на определении количества гидроген пероксида, расщепленного ферментом за определенный промежуток времени. О количестве расщепленного гидроген пероксида судят по разности количества КМnО4, израсходованного на титрование до и после действия каталазы: 2КМnО4 + 5Н2О2 + 3Н2SO4 → 5О2 + 2МnSО4 + K2SО4 + 8H2O.
Ход работы. В две колбы для титрования наливают по 1 мл разбавленной крови (1:1000) и прибавляют по 7 мл Н2О (дист.). Затем в исследуемую пробу прибавляют 2 мл 1% Н2О2, а в контрольную – 5 мл 10% раствора Н2SО4. Действие каталазы в кислой среде (в контрольной пробе) прекращается, поскольку она действует при рН=7,4. Обе пробы оставляют при комнатной температуре на 30 мин, затем наливают в исследуемую колбу 5 мл 10% Н2SO4, а в контрольную – 2 мл 1% раствора Н2О2. Содержимое каждой колбы титруют 0,1н раствором КМnО4 до слабо розовой окраски. Рассчитывают каталазное число (КЧ) по формуле:
КЧ (ед) = (А-В)×1,7, где А – количество 0,1н КМnО4, пошедшее на титрование контрольной пробы (мл); В – количество 0,1н КМnО4, пошедшее на титрование исследуемой пробы (мл); 1,7 – количество Н2О2, эквивалентное 1 мл 0,1н КМnО4 (мг) [1 мл 0,1н КМnО4 эквивалентен 1 мл 0,1н Н2О2].
Клинико-диагностическое значение. Каталаза (КФ 1.11.1.6) – геминовый фермент, который расщепляет гидроген пероксид на молекулярный кислород и воду. Показателем активности каталазы является каталазное число - количество мг гидроген пероксида, которое расщепляется одним микролитром крови за определенный промежуток времени. В норме каталазное число колеблется от 10 до 15 единиц, оно снижается при ряде заболеваний, сопровождающихся кахексией (рак, анемия, туберкулёз).
Литература
1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 122-136.
2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 157-174.
3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 256-286.
4. Вороніна Л.М. та ін. Біологічна хімія. – Харків: Основа, 2000. – С. 172-228.
5. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 305-316.
6. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 264-280.
7. Николаев А.Я. Биологическая химия. – М.: ООО Медицинское информационное агентство, 1998. – С. 199-212, 222-231.
8. Практикум з біологічної хімії / Бойків Д.П., Іванків О.Л., Кобилянська Л.І. та ін./ За ред. О.Я. Склярова.–К.:Здоров’я,2002.–С.67-88.
9. Лабораторні та семінарські заняття з біологічної хімії: Навч. посібник для студентів вищих навч. закл. / Л.М. Вороніна, В.Ф. Десенко, А.Л. Загайко та ін. – Х.: Вид-во НФаУ; Оригінал, 2004. – С. 107-123.