- •Хроматография
- •Газовая хроматография (гх и гжх)
- •Формальные аспекты газовой хроматографии
- •Составные части газового хроматографа
- •Газы, применяемые в хроматографии
- •Ввод пробы
- •Колонки применяемые в газовой хроматографии
- •Неподвижная фаза
- •Детекторы применямые в газовой хроматографии
- •Детектор электронного захвата (дэз)
- •Пламенно-ионизационный детектор (пид)
- •Детектор по теплопроводности (дтп)
- •Качественный анализ
- •Количественный анализ
- •Тонкослойная хроматография
- •Формальные аспекты тонкослойной хроматографии
- •Преимущества и недостатки тсх
- •Экспрессность
- •Расход анализируемого вещества
- •Простота техники тсх
- •Наглядность и информативность
- •Простота протоколирования результатов
- •Простота оборудования
- •Стоимость
- •Характеристика основных “участников” тсх
- •Подложка
- •Сорбент
- •Растворители в тсх
- •Камеры для тсх
- •Методы проявления хроматограмм
- •Особенности качественного и количественного тсх-анализа
- •Качественный анализ
- •Количественный анализ
Количественный анализ
В области количественного анализа ТСХ может дать ответ только на вопрос: “Не превышает ли содержание примеси определенный уровень”. При применении денситометров этот вопрос можно сконкретизировать до “Сколько содержится данного вещества в смеси?”, но только в том случае, если имеется калибровка по определяемому веществу. Однако, относительная погрешность измерения в этом случае достаточно велика. Достоверность анализа по системе “не больше” в силу этого превышает достоверность по системе “сколько”. Кроме того, применение качественных денситометров значительно удорожает процесс. Для определение количественного состава смеси использование жидкостного хроматографа предпочтительнее.
При ответе на первый вопрос (“не превышает ли…?”) на хроматограмму наносят строго определенное количество анализируемого вещества, рядом – одно или несколько пятен обнаруживаемой примеси с разным ее содержанием (свидетели). После элюирования пластинки пятна проявляют подходящим образом и сравнивают интенсиность окраски и площадь пятна с этими же параметрами свидетелей. Если для анализируемого вещества имеется НТД, строго регламентирующая содержание примеси на определенном уровне, то используют только один свидетель с заданным содержанием примеси. В этом случае положительный (соответствует) или отрицательный (не соответствует) результат анализа определяется по тому, превышает или не превышает по совокупности площади и интенсивности окраски пятно примеси пятно свидетеля. При этом наиболее надежный (достоверный) результат получается в том случае, если количество анализируемого образца подобрано таким образом, чтобы в нем примесь содержалась на границе обнаружения, а в свидетеле – пятно было четко различимым и надежно определяемым. Так, например, в амиксине регламентируется содержание 2-[2–(диэтиламино)этокси]флуоренона-9 – “не более 0.1 %”. Чувствительность обнаружения этой примеси составляет 0.05 мкг. Тогда, при нанесении 200 мкг амиксина и 0.2 мкг 2-[2–(диэтиламино)этокси]флуоренона-9 (0.1 % основного вещества и в 4 раза боьше предела обнаружения) и наличии на хроматограмме слабо различимого пятна примеси при четком пятне свидетеля, можно с высокой степенью достоверности утверждать, что содержание этой примеси в амиксине меньше заданного предела.