6 курс / Эндокринология / Генетические_детерминанты_развития_нарушений_минеральной

11

Полученные данные свидетельствовали, что распределение больных с разными молекулярно-биологическими подтипами между группами происходило равномерно. Распределение больных в соответствии со стадией заболевания представлено в таблице 1.

Таблица 1 – Распределение больных РМЖ в зависимости от клинической стадии заболевания

Результаты исследования и их обсуждение

В настоящем исследовании на основании маркеров метаболизма костной ткани, отражающих скорость процессов резорбции и костеобразования, был проведен анализ эффективности выбранных терапевтических стратегий у больных РМЖ с различным состоянием костной ткани и условно-здоровых женщин.

Результаты сравнительного анализа b-Cross laps между больными РМЖ разных групп и пациентками контрольной группы представлены на рисунке 3. На этапе «до проведения терапии» были выявлены статистически значимые отличия данного показателя среди всех групп больных РМЖ с остеопорозом

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

13

Результаты сравнительного анализа P1NP между больными РМЖ разных групп и пациентками контрольной группы представлены на рисунке 4.

Рисунок 4 – Динамика изменения показателя P1NP среди пациенток различных групп Примечания. * – статистически значимые отличия при p <0,05: 1 – против больных

РМЖ без остеопороза (группа 1)

При проведении сравнительного анализа динамики изменения показателя P1NP среди пациенток различных групп было выявлено, что изучаемый показатель в подгруппах 3.1 и 3.2 (РМЖ с остеопорозом и костными событиями, получающие ЗК и деносумаб соответсвенно) статистически значимо (p<0,05) отличался от показателя в группах больных РМЖ с различным состоянием костной ткани без костных событий. Так, через 6 месяцев терапии процент отличия концентрации P1NP в группах больных с костными метастазами, получающими ЗК и деносумаб, составил, соответственно, 43% (p<0,05) и 33,8% (p<0,05) относительно больных РМЖ без остеопороза и не отличался (p>0,05) относительно больных РМЖ и остеопорозом без костных метастазов. Через 12 месяцев после начала проведения остеопротективной терапии процент изменений концентрации

P1NP у пациенток 3.1 и 3.2 подгрупп составил 32% (p<0,05) и 51% (p<0,05)

относительно больных РМЖ без остеопороза, соответственно.

При проведении сравнительного анализа динамики остеокальцина среди

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

15

данных групп пациенток, может быть достигнуто путем изменения схемы терапии ЗК.

Динамика изучаемых маркеров в подгруппах 3.1 и 3.2, позволяет говорить о выраженном остеопротективном эффекте на фоне терапии. При использовании ЗК было зарегистрировано торможение процессов костной резорбции и некоторое «нарастание костной массы», свидетельствующее о компенсации метаболических процессов. При оценке изменений маркеров костного ремоделирования за весь период наблюдения (12 месяцев) у пациенток, получавших деносумаб, положительная динамика остеомаркеров имела более выраженный характер, чем при применении ЗК.

Внастоящем исследовании, в связи с возрастом и менопаузальным статусом пациенток, для диагностики и последующего мониторинга за метастатическими очагами, а также контроля изменения показателя минеральной плотности костной ткани (МПК) на фоне проводимой терапии были использованы методы денситометрии и остеосцинтиграфии.

Врезультате проведенного исследования было выявлено, что остеопоротические изменения костной ткани во всех группах больных РМЖ распространено чаще, чем остеопеническое, причем наиболее пораженным сайтом являлся позвоночный столб. При оценке динамики изменения значения Т-критерия на фоне проводимой терапии во 2 группе, 3.1 (получающие ЗК) и

3.2(получающие деносумаб) подгруппах снижения МПК выявлено не было (p>0,05). Данные стартовой остеоденситометрии и исследования, проведенного через 12 месяцев, сопоставленные с лабораторными результатами представлены в таблице 2.

На основании полученных результатов остеосцинтиграфии и их комплексной оценки в сочетании с биохимическими показателями, можно говорить о положительной динамике при проведении остеопротекции. Так, у пациенток группы 3.2 на фоне снижения маркера резорбции b-Cross laps и повышения концентрации P1NP. В группе 3.1 в динамике изменения суммарного числа очагов метастазирования не наблюдалось (47,3% и 43,6%, соответственно, исходно и через 12 месяцев терапии, p>0,05).

Входе исследования был проведен анализ распределения частот аллелей

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

17

генотипом wild type, причем число носителей wild type в группах больных РМЖ без остеопороза и больных РМЖ и остеопорозом было меньше в 1,25 и 3 раз относительно числа носителей в группе условно здоровых соответственно.

В ходе анализа распределения частот аллелей и генотипов rs9594782 было обнаружено, что аллель rs9594782 встречался в группе условно здоровых с частотой 0,535, в группе больных РМЖ без остеопороза – 0,482, в группе больных РМЖ и остеопорозом – 0,43. Из обследованных женщин 30,4% обладали генотипом wild type, а число его носителей среди больных РМЖ без остеопороза и больных РМЖ и остеопорозом было больше числа носителей в контрольной группе в 1,6 и 1,9 раз соответственно. Полученная в настоящем исследовании частота встречаемости rs9594782 среди 700 обследованных женщин составила 0,464, что статистически значимо отличается от частот, представленных в базе GnomAD. Наблюдаемая высокая частота встречаемости rs9594782 среди больных остеопорозом потенциально может быть связана с его клинической значимостью, как маркера развития данной патологии.

Анализ относительного риска развития остеопороза у больных РМЖ в постменопаузе. В качестве количественной оценки вероятности снижения МПК и развития остеопоротических изменений костной ткани при сравнении относительных показателей также был использован критерий относительного риска (OR). Исходя из полученных данных, значимость взаимосвязи снижения МПК и SNP считалась статистически значимой в случае нахождения доверительного интервала за пределами границы отсутствия эффекта, принимаемой за 1.

Результаты оценки относительного риска снижения МПК у носителей rs9594738. Выявлено, что наличие аллеля Т увеличивает риск снижения МПК и развития остеопороза более чем в 3 раза (OR=3,45, 2,71–4,39), причем, носительство данного SNP в гомозиготном варианте увеличивает риск развития остеопороза в 5,88 раз.

Результаты оценки относительного риска снижения МПК у носителей rs9594759. Выявлено, что наличие аллеля Т увеличивает риск снижения МПК и развития остеопороза более чем в 2 раза (OR=2,37, 1,87–2,99), причем,

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

19

параметров диагностической модели была оценена в ходе предыдущих этапов исследования.

Способ прогнозирования развития остеопороза у больных раком молочной железы в постменопаузе был разработан на основе применения метода множественной регрессии. В матрице для разработки прогностической модели прогностический коэффициент F1 ранжировали как +1 при отсутствии у больных РМЖ остеопороза и костных метастазов, и -1 при наличии данных событий.

Согласно разработанной модели прогностический индекс F1 по рассчитывают по следующей формуле:

F1=0,11*P5+0,22*Р1+Р3*0,44+ Р4*0,33-0,07*Р2-4,41,

где Р1 – уровень остеокальцина в нг/мл; Р2 – концентрация P1NP в мкг/л;

Р3 – уровень b-Cross laps в нг/мл;

Р4 – гистологический подтип опухоли:

люминальный А и В подтипы соответствуют коэффициенту 2,5; HER+ подтип соответствует коэффициенту – 1,12;

трижды негативный подтип соотносится с коэффициентом – 0.

Р5 – наличие у пациентки специфических полиморфизмов гена RANKL (rs9594759, rs9594738), где наличие мутации соответствует коэффициенту – 1,25, а отсутствие – 0.

При F1 меньше нуля вероятность развития остеопороза у пациентки оценивается как высокая, требующая регулярного наблюдения и назначения остеомодулирующей терапии. Если F1 больше нуля, то риск развития остеопороза у пациентки оценивается как низкий – рекомендовано динамическое наблюдение.

Детерминационная значимость совокупности биохимических, генетических и гистологических показателей, используемая в модели, для прогноза остеопороза и костных метастазов у больных РМЖ была высокой, поскольку коэффициент детерминации составил R2=0,72. Соответствующий коэффициент множественной корреляции (0,85) указывал на сильное взаимовлияние между показателями. Критерий Фишера 18,9 отражал

Рекомендовано к изучению сайтом МедУнивер - https://meduniver.com/

20

достоверное влияние величин на результирующий признак (р<0,001), так как значительно превышал критическую величину.

Разработанный способ может осуществляться на этапе постановки диагноза и планирования дальнейшего ведения пациенток с РМЖ.

В ходе исследования была предпринята попытка комплексной оценки состояния МПК и диагностики остеопороза у больных РМЖ, с учетом гистологического подтипа опухоли, наличия или отсутствия полиморфизмов в гене RANKL, а также концентрации маркеров костного ремоделирования в крови. Способ обладает высоким прогностическим потенциалом и может быть использован для определения стратегии персонализированной терапии больных РМЖ, что достигается благодаря учету молекулярно-генетических особенностей конкретного пациента.

Далее в работе был разработан метод прогноза костных метастазов у больных РМЖ и остеопорозом. ROC-анализ прогностического потенциала остеомаркеров крови у пациенток в группах 2 и 3 позволил выявить диагностическую информативность только в отношении уровня P1NP крови.

Установлено, что при условии снижения концентрации P1NP ниже 28,32 мкг/л появление костных метастазов у больных РМЖ и остеопорозом происходит с диагностической чувствительностью 98,2% и специфичностью

98% (рисунок 6).

Рисунок 6 – ROC-кривая, диагональная опорная линия и площадь под ROC кривой (AUC)

c доверительной вероятностью р для прогноза костных метастазов у больных РМЖ и остеопорозом