3 курс / Фармакология / Диссертация_Горбатюк_Н_О_Гиполипидемическое_действие_суммы_тритерпеновых

Таблица 5.2.3.1 – Влияние ТО и ТК при использовании в дозах 100 мг/кг на

показатели процесса свертывания крови у здоровых животных

Примечание:n – количество животных в группе; Т1 – начало свертывания крови; Т2 – окончание свертывания крови;

Т – продолжительность времени свертывания крови;

∆ – р<0,05 – данные достоверны по отношению к контрольным значениям; р – уровень достоверной разницы.

Таким образом, анализ результатов исследований по изучению влияния ТО и ТК на некоторые показатели гемостаза у животных с экспериментальными гиперлипидемиями показал, что внесение изменений в стандартный рацион питания животных с включением повышенного количества нейтральных липидов и ХС сопровождается помимо отклонений от нормальных значений биохимических показателей, также изменениями реологических свойств крови, состояния и степени реакции свертывающей системы. Повышение свертываемости крови на фоне гиперлипидемии это дополнительный и весьма серьезный фактор риска, значительно увеличивающий вероятность сосудистой патологии. Испытываемые тритерпеновые соединения уже в дозе 10 мг/кг нивелировали нежелательные сдвиги характеристик системы гемостаза, в результате чего время свертывания крови достигло нормальных значений. При использовании дозы препаратов 100 мг/кг время свертывания крови достоверно

111

не отличалось от интактных значений и значений группы животных, которые получали ТО и ТК в дозе 10 мг/кг, но отмечали значительное увеличение времени начала реакции свертывания (Т1) (на 50% для ТО и на 61% для ТК). Такая направленность действия используемых тритерпеновых соединений прослеживалась и при изучении их влияния на показатели гемостаза у здоровых животных. И в случае ТО, и в случае ТК увеличивалось время начала свертывания крови, причем этот эффект был более выражен при использовании ТО. Кроме того, у здоровых животных под действием тритерпеноидов отмечали продление времени свертывания, которое при введении ТО оказалось достоверно выше контрольных значений, а при использовании ТК отмечали тенденцию к увеличению, но эти изменения были недостоверны.

Образцы коагулограмм животных опытных групп приведены на рисунках 2 – 10.

Рисунок 2 – Образец коагулограммы интактных крыс

112

Рисунок 5 – Образец коагулограммы крыс, получавших ТО в дозе 100 мг/кг на фоне алиментарной гиперлипидемии

Рисунок 6 – Образец коагулограммы крыс, получавших ТК в дозе 10 мг/кг на фоне алиментарной гиперлипидемии

114

Рисунок 7 – Образец коагулограммы крыс, получавших ТК в дозе 100 мг/кг на фоне алиментарной гиперлипидемии

Рисунок 8 – Образец коагулограммы крыс, получавших ципрофибрат в дозе 50 мг/кг на фоне алиментарной гиперлипидемии

115

Рисунок 9 – Образец коагулограммы интактных крыс, получавших ТО в дозе 100 мг/кг

Рисунок 10 – Образец коагулограммы интактных крыс, получавших ТК в дозе 100 мг/кг

116

5.3 Изучение мембраностабилизирующей активности суммы тритерпеноидов из плодов облепихи и клюквы и их влияние на интенсивность перекисного окисления липидов при алиментарной гиперлипидемии

Перекисное окисление липидов (ПОЛ) – свободно-радикальный, вырожденно-разветвлённый цепной процесс, во многом сходный с окислением природных и синтетических углеводородов и полимеров. Весь процесс ПОЛ делят на стадии: зарождение цепей, развитие цепных реакций и их разветвление, обрыв цепей. Процессы ПОЛ постоянно протекают в организме и имеют важное значение в обновлении и поддержании функциональных свойств биомембран, участии в энергетических процессах, клеточном делении, синтезе биологически активных веществ. Через стадию перекисных производных неэтерифицированных жирных кислот осуществляется биосинтез простагландинов и лейкотриенов, а тромбоксаны, оказывающие мощное влияние на адгезивно-агрегационные свойства форменных элементов крови и микроциркуляцию, сами являются гидроперекисями. Образование гидроперекисей ХС – одно из звеньев в синтезе некоторых стероидных гормонов. Многие исследователи считают, что продукты ПОЛ играют ведущую роль в развитии стресс-реакций в организме и в адаптационных механизмах [55, 114, 208].

К мембранно-повреждающему действию свободно-радикальных интермедиатов и продуктов ПОЛ можно отнести, во-первых, изменение липидного микроокружения, мембранно-связанных ферментов, рецепторов ферментов и каналов ионной проводимости, образование новых каналов проводимости для ионов кальция, способствующих его избытку в клетке, вовторых, нарастание продуктов распада ФЛ, взаимодействующих со свободными аминогруппами мембранных белков, образующих межмолекулярные сшивки и инактивирующих эти белки, и, наконец, отмечается окисление SH-групп в активных центрах мембранно-связанных ферментов, вызывая тем самым потерю функциональных свойств биомембран

117

[79]. Процессы ПОЛ связаны и с другими компонентами «липидной триады» (активация ФЛ и липаз, детергентное действие жирных кислот). Активация ПОЛ приводит к лабилизации лизосом, в которых локализованы фосфолипазы. Активируемые лизосомальные мембранно-связанные фосфолипазы играют важную роль в разрушении липидного слоя мембран и образовании лизофосфолипидов и свободных жирных кислот. Последние за счёт своего детергентного действия нарушают упорядоченное расположение ФЛ в мембранах, что также может быть причиной активации процессов ПОЛ. Увеличение при этом проницаемости мембран для ионов кальция и возникающий в результате кальциевый избыток в клетке активирует фосфолипазы и процессы ПОЛ. В итоге усугубляется повреждение клеточной мембраны, переходящее в необратимое и приводящее к гибели клеток.

В нормальных физиологических условиях ПОЛ протекает на крайне низком уровне, что предохраняет организм от накопления токсичных продуктов в концентрациях, опасных для жизнедеятельности. Обнаружение в каждом конкретном случае того порога, после которого кардинально меняется роль активных форм кислорода и инициируемого ими ПОЛ в гомеостазе организма, представляет собой весьма важную и непростую задачу, решение которой – одна из актуальнейших проблем современной свободно-радикальной биологии [53].

Многофакторность условий развития длительной гиперлипидемии и, как следствие, атеросклероза, делает интерсным раскрытие разных сторон изменений обмена веществ при экспериментальном изучении свойств тритерпеновых соединений облепихи и клюквы. В последние годы повышен интерес к ПОЛ, увеличение продуктов которого может являться одним из ведущих факторов риска развития гиперлипидемии и атеросклероза [4, 45, 272].

Интенсификация перекисных процессов и рост уровня вторичных продуктов окисления приводит к повреждению структуры липидно-белкового комплекса мембран, в том числе эндотелия сосудов [227].

118

Учитывая выше сказанное и данные о гиполипидемической активности ТО и ТК, представило интерес изучение возможности влияния исследуемых тритерпеноидов на интенсивность пероксидации и их мембранопротекторные свойства в условиях экспериментальной гиперлипидемии.

Для оценки интенсивности перекисных процессов в опытах на животных при хронической гиперлипидемии определяли содержание ТБК-активных продуктов в суммарной фракции β- и пре-β-липопротеинов крови.

Как видно из данных, представленных в таблице 5.3.1, у крыс после воспроизведения модели алиментарной гиперлипидемии, регистрировалась активации свободно-радикального ПОЛ. У этих животных отмечалось увеличение количества ТБК-активных продуктов во фракции β- и пре-β- липопротеинов на 22% по отношению к контролю.

Таблица 5.3.1 – Влияние суммы тритерпеноидных кислот из плодов облепихи и клюквы на интенсивность свободно-радикальных процессов и резистентность биомембран на фоне алиментарной гиперлипидемии

Вкачестве показателя мембраностабилизирующей активности ТО и ТК использовали уровень гемолиза эритроцитов по Ягеру, который в контрольной группе животных вырос в 2,3 раза.

Таким образом, при развитии алиментарной гиперлипидемии наблюдается усиление процессов пероксидации, что может приводить к значительным нарушениям в функционировании эндогенной антиоксидантной системы и усилению деструктивных процессов в клетке и её мембранах: повышение степени окисленности ФЛ и белков, рост проницаемости клеточных и субклеточных мембран для белков и ферментов и снижение их резистентности.

У животных, получавших ТО и ТК, наблюдалось достоверное улучшение изученных показателей по отношению к контролю.

Так, применение ТО в дозе 10 мг/кг привело к следующему: уровень ТБКактивных продуктов в суммарной фракции β- и пре-β-липопротеинов крови был ниже по сравнению с контролем на 57%, причём этот показатель был достоверно ниже, чем у животных интактной группы на 48% соответственно. Повышение дозы ТО до 100 мг/кг способствовало ещё в большей степени подавлению процессов свободно-радикального окисления. Уровень ТБКактивных продуктов в крови стал ещё меньше контрольных значений на 65%, что оказалось достоверно ниже группы здоровых животных на 58% соответственно (таблица 5.3.1).

Вотношении животных, получавших ТК в дозах 10 мг/кг и 100 мг/кг, отмечается явное подавление процессов ПОЛ, причём увеличение дозы не влияет на способность данных соединений к снижению интенсификации ПОЛ, вызванной алиментарной гиперлипидемией. Применение ТК в дозе 10 мг/кг привело к уменьшению уровня ТБК-активных продуктов на 68%, а ТК в дозе 100 мг/кг на 70% соответственно. При этом содержание ТБК-активных продуктов было достоверно ниже значений интактной группы как в дозе 10 мг/кг, так и 100 мг/кг: -62% и -63% соответственно.

Интенсивность спонтанного гемолиза эритроцитов в большей степени

уменьшилась под влиянием ТК в дозе 10 мг/кг и 100 мг/кг на 59% и 68%

120